广州市科技计划项目(2004J1-C0241)
- 作品数：7 被引量：20H指数：2
- 相关作者：沈伟哉郭国庆钟世镇山爱景欧阳钧更多>>
- 相关机构：暨南大学南方医科大学更多>>
- 发文基金：广州市科技计划项目广东省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性和相关基因的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:观察小鼠胚胎神经干细胞的体外生长特性并检测其相关基因的表达。方法:实验于2005-02/06在暨南大学医学院中心实验室进行。①取妊娠13.5d昆明小鼠分离胚胎大脑中的神经干细胞,用添加碱性成纤维细胞生长因子的无血清培养基进行体外培养,取培养3d的神经球接种于多聚赖氨酸包被的培养瓶,用含血清的培养基诱导分化。②免疫细胞化学检测细胞表面抗原。③四甲基偶氮唑盐法绘制生长曲线。④流式细胞术检测细胞周期。⑤反转录-聚合酶链反应和免疫细胞化学技术对神经干细胞进行鉴定。结果:①胚胎神经干细胞及其分化细胞的抗原表达:血清诱导8h,分化细胞中(8.9±5.6)%细胞呈Tubulin阳性,(87.5±7.4)%细胞胞浆呈胶质纤维酸性蛋白阳性表达。未诱导细胞近100%呈巢蛋白阳性,仅有极少数细胞Tubulin阳性或胶质纤维酸性蛋白阳性。②胚胎神经干细胞的细胞周期:从小鼠胚胎大脑获取的神经干细胞3d左右进入指数生长期;原代培养细胞83.8%处于静止期/DNA合成前期。③原代与传代细胞均表达巢蛋白mRNA,聚集形成的神经球巢蛋白阳性。血清诱导4h胚胎神经干细胞开始转录神经元相关基因Tau和胶质细胞相关基因胶质纤维酸性蛋白。结论:从小鼠胚胎大脑可成功分离获得大量胚胎神经干细胞,并在含碱性成纤维细胞生长因子的条件培养基中迅速增殖,血清诱导下分化生成神经元和星型胶质细胞。
- 山爱景郭国庆孙艳沈伟哉
- 关键词：细胞分化细胞逆转录聚合酶链反应
- 大鼠主动脉内皮细胞的原子力显微镜观察
- 2006年
- 郭国庆陈静沈伟哉钟世镇
- 关键词：原子力显微镜观察主动脉内皮细胞生物医学领域显微技术AFM
- 大鼠海马发育过程中突触蛋白-Ⅰ和生长相关蛋白-43mRNA的表达
- 2006年
- 目的:探讨大鼠海马突触蛋白和生长相关蛋白-43 mRNA的表达,了解神经元的发育。方法:采用RT-PCR方法检测大鼠发育不同阶段突触蛋白和生长相关蛋白-43 mRNA量的变化。结果:RT-PCR产物电泳后在731 bp、984 bp、324 bp处出现清晰的电泳条带,实际扩增长度与设计长度相吻合,未出现与DNA相同的杂带。内参照β-actin的PCR产物电泳条带在孕期、新生和成年时亮度均一。突触蛋白的PCR产物电泳条带以成年大鼠表达最强,胎鼠次之,新生大鼠较弱。生长相关蛋白-43的PCR产物电泳条带以新生鼠亮度最强,胎鼠次之,成年大鼠最暗。结论:大鼠海马在新生期处在轴突生长旺盛的时期,而在胚胎期和成年期是突触形成和建立的主要阶段。
- 辛莉郭国庆沈伟哉邱小忠余磊欧阳钧秦建强钟世镇
- 关键词：海马生长相关蛋白-43发育
- 丹酚酸B促进胎鼠大脑皮质神经干细胞增殖、突起生长和分化被引量：12
- 2009年
- 丹参是一种常用于治疗脑卒中的传统中草药,丹酚酸B是其有效成份之一.但人们对丹酚酸B如何影响神经干细胞的生长还了解甚少.本研究用MTT、流式细胞术、免疫荧光和RT-PCR技术检测丹酚酸B对胎鼠大脑皮质神经干细胞增殖、突起生长和分化的作用.结果显示,20和40μg/mL丹酚酸B对促进神经干细胞增殖的作用相似,适量的丹酚酸B可促进神经干细胞增殖并形成较多的神经干细胞球,其促增殖作用通过提高G2/S期细胞的数量而实现.丹酚酸B还可促进神经干细胞球发出较多的突起并分化出较多的成熟神经元.分化开始时,tau,GFAP和nestin mRNA均有表达.但分化后的细胞与对照组比较,tau mRNA表达增多,而GFAP mRNA表达减少.说明外源性的丹酚酸B具有促进神经干细胞增殖并向神经元分化的作用,有望成为一种获取更多神经干细胞和促进神经干细胞分化的药物.
- 郭国庆李斌王圆圆山爱景沈伟哉原林钟世镇
- 关键词：丹酚酸B增殖分化突起生长神经干细胞大脑皮质胎鼠
- 糖尿病大鼠主动脉内皮细胞膜结构的原子力显微镜观察和三维重建被引量：4
- 2007年
- 观察糖尿病大鼠主动脉内皮细胞膜形态的动态变化,了解持续高血糖对内皮细胞结构的影响。取胸主动脉,用原子力显微镜观察内皮细胞并进行三维重建。结果显示对照组内皮细胞表面有许多绒毛样突起、窗孔样结构和虫蚀样小凹等结构,内皮仅有少量的颗粒样物质黏附;糖尿病内皮细胞绒毛样突起减少,内皮细胞类似风化岩石样外观,同时颗粒样物质黏附增多,尤其以12周最为显著;虫蚀样小凹7周开始变深,12周直径增加明显,但在12周的数量减少,以小型的小凹减少明显。三维重建后的图像显示对照组内皮细胞较平滑,而糖尿病组表面突起增多,失去平滑的外观,其平均粗糙度随着时间延长从7周起逐渐增加。提示高血糖状态可破坏血管内皮细胞的结构,使其粗糙度增加和蛋白颗粒黏附,同时细胞膜上虫蚀样小凹变深扩大,出入胞功能加强。
- 郭国庆沈伟哉欧阳钧钟世镇
- 关键词：糖尿病内皮细胞原子力显微镜三维重建
- 大鼠纹状体神经元型一氧化氮合酶神经元的分布和超微结构特征被引量：2
- 2007年
- 目的观察大鼠纹状体神经元型一氧化氮合酶(nNOS)免疫阳性神经元的分布以及阳性神经元的超微结构特征。方法取健康成年SD大鼠,ABC法显示nNOS免疫阳性神经元,包埋前染色方法对阳性细胞进行免疫电镜观察。结果光镜下,nNOS免疫阳性细胞呈棕褐色,胞体及突起清晰,纹状体外侧区阳性细胞较多,内侧区较少。各区内阳性细胞以中、小型细胞为主,且大多数为中型细胞,小型细胞次之,大型细胞最少。透射电镜观察nNOS阳性神经元核大,胞浆少,呈中间神经元的特征;阳性颗粒呈黑色斑块样,在胞体内,可见小的阳性物质分布于胞核周围或者细胞膜内侧均无膜样结构包裹,大的团块样阳性物质主要存在于胞浆,有清晰的单层膜样结构包裹,亦可见部分无膜样结构包裹的大的阳性物质;在树突和轴突集中的部位亦可见免疫阳性物质,但并不在突起终末的囊泡内;脑组织内微血管壁旁的免疫阳性终末较多见,其突起毗邻血管外膜。结论大鼠纹状体nNOS免疫阳性神经元以中、小型细胞为主,符合中间神经元的特征,nNOS阳性物质分布于胞质和突起,大块物质多有膜性结构包裹,小块和部分大块阳性物质以及位于轴树突内的无膜性结构包裹,这可能与其功能状态有关。
- 郭国庆山爱景沈伟哉邱小忠余磊秦建强欧阳钧廖华钟世镇
- 关键词：神经元型一氧化氮合酶纹状体免疫细胞化学超微结构
- 大鼠海马发育过程中netrin-1、nogo-A和tsp-1 mRNA的表达
- 2006年
- 目的:探讨神经元突起定向生长和突触形成过程的规律。方法:采用RT-PCR方法检测大鼠发育不同阶段胶质细胞源性netrin-1、nogo-A和tsp-1 mRNA的表达。结果:RT-PCR实际扩增长度与设计长度相吻合,未出现与DNA相同的杂带。内参照β-actin的PCR产物电泳条带在胚胎、新生和成年时灰度较均一。netrin-1 mRNA以胎鼠和新生大鼠表达较多,成年大鼠弱表达(P<0.01)。nogo-A在各个阶段均呈高表达,以胎鼠和新生大鼠较多,其中新生大鼠表达最多(P<0.01),成鼠相对较低(P<0.01)。tsp-1以胎鼠和新生大鼠表达较多,成年大鼠表达微弱(P<0.01)。结论:大鼠海马胚胎和新生后是突起定向生长的主要阶段,抑制突起的生长则发生在发育的各个阶段,以新生后为主,突触结构和功能的发育发生在胚胎和新生后阶段。
- 郭国庆辛莉沈伟哉邱小忠钟世镇
- 关键词：NETRINNOGO-ATSP-1海马
