国家自然科学基金(50573073) 作品数:7 被引量:15 H指数:2 相关作者: 方月娥 慕卿 赵宇 白欣 赵伟亮 更多>> 相关机构: 中国科学技术大学 安徽医科大学 安徽医科大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 安徽省自然科学基金 安徽省重点科研计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 理学 更多>>
巯基烷基化壳聚糖载绿色荧光蛋白质粒基因纳米粒子的制备与研究 被引量:2 2010年 合成了新型的基因载体巯基烷基化壳聚糖(TACS),采用复凝聚法制备了巯基烷基化壳聚糖基因纳米粒子,并表征其形态和粒径。利用体外转染实验定性评估了纳米粒子的转染效率。结果表明,粒子形态不很均一,粒径在390nm左右;凝胶电泳实验证明了载体能有效地包裹和保护基因不受DNaseⅠ酶的消化;溶解实验证实了巯基化增强了TACS的水溶性;体外基因转染实验证实了TACS能够在人胚胎肾细胞(HEK293)转染基因,并且其转染效率远高于壳聚糖纳米粒子。这些结果表明,巯基烷基化壳聚糖有望成为有价值的基因载体。 慕卿 赵伟亮 白欣 李树宝 卢迪 方月娥 赵宇关键词:壳聚糖 烷基化 基因转染 水溶性 复合头孢曲松钠和BMP的壳聚糖抗菌成骨生物陶瓷的制备实验研究 被引量:1 2009年 目的使用壳聚糖和磷酸钙骨水泥(CPC)复合头孢瞌松钠和BMP,制备出一种具有成骨和抗感染作用的植骨材料。方法使用不同成分和比例的壳聚糖固化液将磷酸钙骨水泥、头孢曲松钠和BMP共混制备抗菌成骨生物陶瓷,绘制头孢曲松钠的紫外吸光度一浓度标准直线,测定生物陶瓷中头孢曲松钠体外释放浓度。微生物法测定生物陶瓷体外抑菌效果。生物陶瓷埋于大鼠腿部肌袋研究其成骨性能。将生物陶瓷填充大鼠污染骨缺损模型,研究其抑菌和成骨作用。结果生物陶瓷的优化制备方案为0.1g磷酸钙骨水泥复合10.4mg头孢曲松钠和0.5mgBMP与2.4ml固化液C混合后在600C、100%湿度下固化24h。该生物陶瓷体外释放稳定,微生物测定结果表明头孢曲松钠在体外释放持续1周高于金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度,达到了局部抗菌效果,组织切片显示8周后埋于大鼠腿部肌袋的生物陶瓷周围有骨组织产生,污染骨缺损实验中白细胞计数和组织切片显示实验组较对照组炎症反应轻微,成骨显著。结论复合头孢曲松钠、壳聚糖和BMP的抗菌成骨生物陶瓷有望成为治疗污染性骨缺损的理想材料。 夏睿 方诗元 徐玮 张亮 董行 赵伟亮 方月娥关键词:壳聚糖 头孢曲松钠 生物陶瓷 骨形态发生蛋白 成骨 Preparation of Thermal-responsive Chitosan-graft-N-isopropyl- acrylamide Membranes via γ-Ray Irradiation 2006年 A novel thermo-sensitive switching membrane has been prepared by radiation-induced simultaneous grafting N-isopropylacrylamide (NIPAAm) onto chitosan membrane. Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) was used to identify the structure of the grafted membranes. The surface morphology of the grafted membrane was observed from scanning electron microscopy (SEM). Pure water flux measurements showed that water flux of the grafted membrane decreased with the increase of temperature, while that of chitosan membrane was constant. It was proved that grafted membrane was sensitive to temperature. Qing MU Yue E FANG关键词:N-ISOPROPYLACRYLAMIDE 辐射法制备聚丙烯酸-改性壳聚糖体系的两性凝胶(英文) 2008年 以O-马来酸酐化N-邻苯二甲酰化壳聚糖(MPCS)为中间产物,通过γ射线引发,在均相溶液体系制备含有改性壳聚糖-聚丙烯酸的两性凝胶。用红外光谱证实了接枝反应的发生。同时还系统地研究了接枝反应的影响因素,结果表明,接枝率依赖于单体浓度和所用的剂量。通过研究了接枝产物在不同pH值缓冲溶液中溶胀度的变化,结果发现,接枝产物在酸性条件(Ph<7)下溶胀较小,在碱性条件(pH>7)下溶胀度较大。而且还测试了接枝产物在DMF溶剂中的溶胀情况。 慕卿 丁志嘉 方月娥关键词:壳聚糖 丙烯酸 辐射接枝 PH敏感 壳聚糖抗菌生物陶瓷的制备及其体内外实验研究 被引量:3 2009年 目的利用壳聚糖固化液和磷酸钙骨水泥(CPC)复合头孢曲松钠,研制一种新型的抗菌生物陶瓷。方法使用壳聚糖固化液将磷酸钙骨水泥与头孢曲松钠共混制备抗菌生物陶瓷,根据头孢曲松钠的紫外吸光度-浓度标准直线研究生物陶瓷中头孢曲松钠的体外释放。微生物法测定生物陶瓷体外抑菌效果。利用大鼠污染骨缺损模型,研究其体内抗感染作用。结果2.4ml壳聚糖固化液与0.1g磷酸钙骨水泥固体及10.4mg头孢曲松钠混合,在60摄氏度100%湿度下固化24h得到的抗菌生物陶瓷体外头孢曲松钠体外持续释放1W均高于金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度,大鼠白细胞计数和组织切片证实污染缺损实验组较对照组的炎症反应轻微。结论复合头孢曲松钠和壳聚糖的磷酸钙骨水泥陶瓷具有良好的抑菌抗感染作用。 夏睿 方诗元 孔荣 徐玮 董行 赵伟亮 方月娥关键词:壳聚糖 头孢曲松钠 生物陶瓷 抑菌 巯基烷基化壳聚糖介导共表达质粒pIRES-hVEGFl2lcDNA/hBMP4体外转染的研究 被引量:2 2009年 目的以新型巯基烷基化壳聚糖(TACS)为载体介导重组共表达质粒pIRES—hVEGFl2lcDNA/hBMP4体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs),探讨TACS用作骨组织工程中基因载体的可行性。方法复凝聚法制备TACS-基因纳米粒,检测其形态和粒径;全骨髓培养法分离、培养大鼠MSCs;将纳米粒转染第3代大鼠MSCs,并设壳聚糖组、脂质体组及裸质粒组分别为实验对照、阳性对照及阴性对照,噻唑蓝(MTT)比色法测定TACS的细胞毒性。分别于转染后3、4d提取MSCs的总RNA、总蛋白,逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)和Western blot检测目的基因的表达。结果TACS能有效包裹和保护共表达质粒,TACS组细胞存活率(73.18±6.56)%,明显高于脂质体组(45.92±4.93)%(P〈0.01)。除阴性对照组外,RT-PCR和Western blot均检测到转染后MSCs中hVEGFl2l及hBMP4的表达,TACS组目的蛋白表达量低于脂质体组(P〈0.05),但明显高于壳聚糖组(P〈0.01)。结论共表达质粒在TACS介导下成功转染大鼠MSCs并获得表达。TACS细胞毒性小,且较未改性壳聚糖转染效率明显提高。 卢迪 慕卿 赵宇 白欣 方月娥 汪春兰关键词:间质干细胞 血管内皮生长因子 骨形态发生蛋白 转染 新型基因载体巯基烷基化壳聚糖的制备及体外性质的初步研究 被引量:7 2009年 目的制备巯基烷基化壳聚糖(TACS)载基因纳米粒,并对其体外相关性质进行初步研究。方法复凝聚法制备TACS/pDNA复合纳米粒子,并用透射电镜对其的形态和粒径进行观察和表征;凝胶阻滞分析观察其对基因的保护情况;以Lipofectamine 2000转染试剂作为阳性对照,检测其对人胚胎肾细胞(HEK293)的转染活性;四噻氮唑盐(MTT)比色法测定其对细胞活性的影响。结果TACS/pDNA复合纳米粒子形态不很均一,粒径在390nm左右;凝胶阻滞分析证明了载体能有效地包裹和保护基因不受DNaseⅠ酶的消化;体外基因转染实验证实了TACS纳米粒子能够有效地转染HEK293,其转染效率远高于壳聚糖纳米粒子,略低于脂质体;MTT测定其对细胞活力影响甚微,对细胞的毒性明显低于脂质体。结论TACS有望成为一种有价值的新型基因载体。 白欣 慕卿 李树宝 张梅 何金生 方月娥 汪春兰 赵宇关键词:壳聚糖 转染