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安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ20078369ZC)
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蛋白激酶Cθ在γδT细胞表达L-选择素中的调控作用
2009年
目的探讨蛋白激酶Cθ(PKCθ)信号转导途径在γδT细胞表达L-选择素(CD62L)中的调控作用。方法用结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)刺激人外周血单个核细胞(PBMC)并培养6~8d,获得富含γδT细胞的结核分枝杆菌活化T细胞(MtbAT),作为γδT细胞来源,分别加佛波醇酯(PMA)、PMA+离子霉素(IMN)培养3、6、12、24h,或用培养8d的MtbAT细胞分别加入Mtb—Ag、Rottlerin+Mtb-Ag、PMA、Rottlerin+PMA刺激4h,收集细胞用荧光抗体染色后,流式细胞术(FCM)检测CD62L在18T细胞表面的表达。结果体外激活培养6~8d的18T细胞表面CD62L的表达率为75.0%~87.0%。PMA刺激78T细胞3~12h时CD62L表达逐渐下调,表达率为42.3%~25.5%;但在刺激后24h时,又明显回升至53.2%。而PMA+IMN刺激3、6h时,18T细胞CD62L表达也下调,表达率分别为52.1%、39.3%;但在刺激12h和24h时CD62L表达率分别为52.9%和35.3%。在PMA刺激γδT细胞同时加入Rottlerin,则CD62L的表达率(47.9%)明显高于PMA单独刺激组(31.8%);MtbAT用Mtb—Ag再刺激4h后,γδT细胞CD62L的表达率由70.0%降为54.8%,而在Mtb.Ag再刺激时加入Rottlerin,则CD62L表达率增加到63.1%。结论γδT细胞在PMA或Mtb-Ag刺激后CD62L的表达下调可被PKCθ特异性抑制剂部分阻断,表明CD62L在γδT细胞表面的表达可能与PKCθ信号转导途径的调控相关。
武文娟
耿英华
唐洁
李柏青
关键词:
L-选择素
ΓΔT细胞
蛋白激酶C
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