山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(BS2011SW006)
- 作品数：6 被引量：44H指数：3
- 相关作者：常红张秋业林毅张守青程娜更多>>
- 相关机构：青岛大学青岛大学医学院附属医院青岛市市立医院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省医药卫生科技发展计划项目青岛市公共领域科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过敏性紫癜患儿外周血树突状细胞Toll样受体与共刺激分子表达的意义被引量：2
- 2014年
- 目的观察过敏性紫癜（HSP）患儿外周血树突状细胞（DC）表面Toll样受体（TLR）2、TLR3、TLR4表达状况，探讨TLR表达异常在HSP免疫发病机制中的作用。方法选择2011年12月至2012年7月在青岛大学医学院附属医院住院治疗的HSP患儿20例为HSP组，20例健康体检儿童为健康对照组。无菌条件下采集外周静脉抗凝血，密度梯度离心法分离获得外周血单个核细胞（PBMC），体外经细胞因子重组人粒细胞．巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）、重组人白细胞介素4（rhlL-4）和重组人肿瘤坏死因子-α（rhTNF-α）诱导培养获得DC，采用流式细胞仪检测DC表面TLR2、TLR3、TLR4、CD83、CD86的表达。结果1．HSP组DC表面CD83表达率与健康对照组比较差异无统计学意义（t=0．80，P〉0．05）。2．HSP组DC表面CD86表达率显著高于健康对照组（t=9．56，P〈0．01）。HSP组DC表面TLR2、TLR3、TLR4表达率均明显高于健康对照组（t=11．79、13．29、9．45，P均〈0．01）。3．HSP组DC表面TLR2、TLR3、TLR4表达率与CD86表达率皆呈正相关（r=0．84，P〈0．01；r=0．53，P〈0．05；r=0．66，P〈0．05）。结论HSP患儿DC表面TLR2、TLR3、TLR4和共刺激分子CD86表达增强且呈正相关，提示TLR和共刺激分子表达异常在HSP发病机制中起重要作用，可能通过启动以Th2为优势的异常免疫应答参与HSP的发病。
- 常红刘秀琴陈玉秀曹永献林毅王薇张秋业
- 关键词：紫癜过敏性树突状细胞TOLL样受体CD86
- 过敏性紫癜患儿外周血单核细胞表面TLR2,4,6的表达及其与辅助性T细胞17的相关性分析被引量：2
- 2014年
- 目的研究过敏性紫癜（HSP）患儿急性期外周血单核细胞（PBMC）TLR2,4,6的表达及其与血浆白细胞介素（IL）-17的相关性,探讨TLR2,4,6在HSP发病机制中的作用。方法选取2013年4月至12月青岛大学附属医院收治入院的HSP急性期患儿42例为研究对象（纳入HSP组）,年龄为4-13岁,男性患儿为25例,女性为17例。另选取同期于本院儿童保健科进行健康体检的30例儿童纳入对照组。采用流式细胞术检测HSP患儿PBMC TLR2,4,6蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR（RTPCR）法检测HSP患儿PBMC髓样分化蛋白88（MyD88）mRNA的相对表达水平,采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血浆白细胞介素（IL）-17水平。组间比较采用独立样本t检验,相关性分析采用Pearson相关检验。本研究遵循的程序符合青岛大学附属医院人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,并征得受试对象监护人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书。结果 1HSP患儿PBMC TLR2,4,6蛋白表达均显著高于对照组,差异均有统计学意义（t=9.432,P〈0.01;t=8.876,P〈0.01;t=10.486,P〈0.01）。2HSP组MyD88mRNA相对表达水平（1.279±0.419）较对照组水平（0.995±0.251）显著升高,二者比较,差异有统计学意义（t=2.463,P〈0.05）。3HSP组患儿血浆IL-17水平较对照组显著增高[（13.168±2.841）pg/mL vs（11.091±1.768）pg/mL],差异有统计学意义（t=2.641,P〈0.05）。4HSP组PBMC TLR2,4,6蛋白表达均与MyD88mRNA的相对表达水平呈显著正相关关系（r=0.850,P〈0.01;r=0.669,P〈0.01;r=0.788,P〈0.01）;与血浆IL-17水平均呈正相关关系（r=0.438,P〈0.01;r=0.404,P〈0.05;r=0.357,P〈0.05）。结论 TLR2,4,6信号途径的异常活化可能参与HSP发生发展,活化的TLR2,4,6可能通过上调辅助性T细胞（Th17）介导HSP的免疫发病机制。
- 张庆群陈秀霞付元訾广芹常红
- 关键词：单核细胞TOLL样受体白细胞介素-17
- 过敏性紫癜患儿外周血单个核细胞 TLR2、TLR4表达及其与 Th1和 Th2型免疫应答相关性观察被引量：20
- 2013年
- 目的：研究Toll样受体（Toll-like receptor，TLR）2、TLR4在过敏性紫癜（HSP）患儿外周血单核细胞的表达及其与Th1和Th2型免疫应答的相关性，探讨TLR2、TLR4在HSP发病机制中的作用。方法选取2011年10月-2012年11月于我院儿内科收治的HSP患儿64例为研究对象，分为HSP无肾损害组（NHSPN，36例）及HSP有肾损害组（HSPN，28例），另选取我院儿保科健康查体儿童30例作为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血T淋巴细胞亚群及单核细胞TLR2及TLR4蛋白表达，实时荧光定量PCR技术检测外周血单核细胞TLR2 mRNA及TLR4 mRNA的基因相对表达量，ELISA法检测血浆IFN-γ、IL-4、IL-6水平。结果（1） HSP 患儿外周血单核细胞TLR2 mRNA、TLR4 mRNA相对表达量及TLR2、TLR4蛋白表达均显著高于正常对照组（P均＜0．01），HSPN组外周血单核细胞TLR2 mRNA、TLR4 mRNA相对表达量及TLR2、TLR4蛋白表达均明显高于NHSPN组（P＜0．05；P＜0．01；P＜0．01；P＜0．01）。（2）HSP组CD3＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞显著降低，CD3＋CD8＋T细胞及CD3＋HLADR＋活化T细胞明显升高（P均＜0．01）。（3）HSP组血浆IL-4、IL-6水平显著高于正常对照组（P＜0．01，P＜0．01），IFN-γ水平显著低于正常对照组（P＜0．05），IFN-γ/IL-4比值显著低于对照组（P＜0．01）。（4）HSP组TLR2、TLR4蛋白表达与血浆IL-4、IL-6水平均呈显著正相关（P＜0．01，P＜0．05；P＜0．01，P＜0．01）；与IFN-γ/IL-4比值均呈显著负相关（P＜0．01；P＜0．01）。结论TLR2及TLR4活化可能参与了HSP的免疫发病机制，TLR2及TLR4的过度活化可能与HSP的肾损伤有关。 HSP患儿存在T淋巴细胞亚群失调，功能紊乱，Th1/Th2失衡。活化的TLR2及TLR4可能通过上调Th2型免疫应答介导HSP的免疫发病机制。
- 常红张秋业程娜张守青林毅
- 关键词：过敏性紫癜TOLL样受体IL-4
- 过敏性紫癜患儿外周血单核细胞TLR2、TLR4、TLR6及与Treg相关细胞因子的表达被引量：15
- 2014年
- 背景:Toll样受体介导的信号通路转导及调节性T细胞异常活化在过敏性紫癜发病中的作用不清楚。目的:研究Toll样受体TLR2、TLR4、TLR6在过敏性紫癜患儿外周血单核细胞的表达及调节性T细胞(Treg)的免疫应答,探讨TLR及Treg活化在敏性紫癜发病机制中的作用。方法:选择处于过敏性紫癜急性期的患儿42例为观察对象,另选取15名门诊健康查体儿童为正常对照组。采用流式细胞术检测外周血单核细胞的TLR2、TLR4、TLR6的蛋白表达量;应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及实时荧光定量PCR检测外周血单核细胞TLR信号途径分子MyD88 mRNA的基因相对表达量;ELISA法测Treg细胞分泌的转化生长因子β、白细胞介素10的血浆水平;两组间比较采用独立样本t或t’检验,相关性分析采用Pearson相关检验。结果与结论:过敏性紫癜患儿外周血单核细胞的TLR2、TLR4、TLR6蛋白的表达及MyD88 mRNA基因的相对表达量均显著高于对照组(P<0.01);过敏性紫癜患儿血浆中转化生长因子β、白细胞介素10均高于对照组(P<0.05);过敏性紫癜患儿TLR2、TLR4、TLR6的蛋白表达量与Myd88 mRNA的基因相对表达量呈正相关(P<0.01),与血浆白细胞介素10、转化生长因子β水平无明显相关(P>0.05)。提示TLR2、TLR4、TLR6活化后可能通过MyD88依赖的途径参与敏性紫癜的发病,而过敏性紫癜急性期Treg代偿性活化可能为机体的保护性免疫应答。
- 高辉香田玲玲常红朱海燕张秋业
- 关键词：紫癜过敏性紫癜单核细胞MYD88白细胞介素10
- 紫癜性肾炎患儿外周血单核细胞Toll样受体3和Toll样受体4表达的意义被引量：10
- 2014年
- 目的探讨Toll样受体（TLR）3、4在紫癜性肾炎（HSPN）患儿外周血单核细胞的表达及临床意义。方法选择青岛大学附属医院首次住院的过敏性紫癜（HSP）患儿105例，依据是否合并。肾损害及24h尿蛋白定量，将患儿分为HSP无。肾脏损害组（A组），HSPN无蛋白尿组（B组），HSPN蛋白尿组（c组）；另取青岛大学附属医院健康体检儿童30例作为健康对照组（N组）。采用流式细胞术及实时荧光定量聚合酶链反应（real．timePCR）检测外周血单核细胞的TLR3，4蛋白及mRNA的表达。结果1．A组、B组、c组外周血单核细胞TLR4mRNA及蛋白表达均显著高于N组（F=37．33、24．01，P均〈0．05）；C组TLR4mRNA及蛋白表达显著高于A组和B组（P均〈0．05），A组和B组TLR4mRNA及蛋白表达比较差异均无统计学意义（P均〉0．05）。2．C组TLR4蛋白表达与24h尿蛋白定量呈正相关（r=0．69，P〈0．01）。3．TLR3的蛋白及mRNA表达在A、B、c、N组无统计学差异（F=0．86、1．78，P均〉0．05）。4．HSP患儿外周血单核细胞TLR4mRNA表达与TLR4蛋白表达呈正相关（r=0．61，P〈0．01）。结论HSPN患儿外周血单核细胞TLR4表达水平显著上调，且与尿蛋白排泄量呈正相关，提示TLR4持续异常活化可能参与了HSPN的发病过程。
- 常红刘秀琴张秋业程娜张守青林毅
- 关键词：紫癜性肾炎TOLL样受体
- 紫癜性肾炎患者外周血单个核细胞Toll样受体3和4的信号转导途径
- 2013年
- 背景:目前关于Toll样受体3和Toll样受体4介导的信号转导通路在紫癜性肾炎的发病机制中的作用尚不清楚。目的:分析Toll样受体3和Toll样受体4在过敏性紫癜和紫癜性肾炎发病机制中的作用。方法:选取过敏性紫癜患儿64例,分为过敏性紫癜无肾损害组36例及过敏性紫癜性肾炎组28例,另选健康儿童30例作为正常对照组。实时荧光定量PCR检测外周血单核细胞Toll样受体3、Toll样受体4、髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6、白细胞介素12 mRNA的基因相对表达量;应用流式细胞术检测外周血单核细胞Toll样受体3、Toll样受体4蛋白表达率。结果与结论:①过敏性紫癜患儿Toll样受体4 mRNA及蛋白表达显著高于正常对照组(P<0.05)。紫癜性肾炎组Toll样受体4 mRNA及蛋白表达均显著高于紫癜无肾损害组(P<0.05)。②过敏性紫癜组髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6 mRNA的表达均显著高于正常对照组(P<0.05),白细胞介素12 mRNA的表达显著低于正常对照组(P<0.05);紫癜性肾炎组髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6 mRNA的表达显著高于紫癜无肾损害组(P<0.05),紫癜性肾炎组白细胞介素12 mRNA的表达显著低于紫癜无肾损害组(P<0.05)。③过敏性紫癜组患儿外周血单核细胞Toll样受体4 mRNA与蛋白表达呈正相关(r=0.60,P<0.01);过敏性紫癜患儿Toll样受体4 mRNA与髓样分化蛋白2、髓样细胞分化因子88、白细胞介素1β、白细胞介素6表达均呈正相关(P<0.01),与白细胞介素12 mRNA表达呈负相关(r=-0.66,P<0.01)。提示Toll样受体4可能通过髓样细胞分化因子88依赖信号转导途径介导过敏性紫癜的免疫发病机制,Toll样受体4的过度活化可能与过敏性紫癜的肾损伤有关。
- 付元刘秀琴程娜张守青常红张秋业陈秀霞高兴娟
- 关键词：TOLL样受体3白细胞介素类
