上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金(07JWYQ03)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 相关作者：楚胜华冯东福马延斌朱志安袁先厚更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第三人民医院武汉大学更多>>
- 发文基金：上海市高校选拔培养优秀青年教师科研专项基金上海市卫生局青年科研基金湖北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 腺病毒载体介导的RNAi对胶质瘤U251细胞肝细胞生长因子受体表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨腺病毒载体介导的RNA干扰技术对胶质瘤细胞肝细胞生长因子(HGF)受体(c-Met)的表达和细胞凋亡的影响。方法用PCR法获得人U6启动子及带有c-Met反向互补靶序列的片段HU6shmet;利用腺病毒载体将其传递至U251细胞;分别采用RT-PCR和Westernblot方法检测U251细胞的c-MetmRNA和蛋白的表达,Annexin-V-PI双染法流式细胞术检测细胞的凋亡状况。结果获得了带有人U6启动子及c-Met反向互补靶序列的重组腺病毒载体rAdUshmet1和rAdUshmet2。转导了rAdUshmet1和rAdUshmet2的U251细胞的c-MetmRNA和蛋白相对表达量较未转导腺病毒及转导了rAdGFP和rAdU-sicon的U251细胞均有明显下降(P<0.01),rAdUshmet1和rAdUshmet2转导的U251细胞凋亡率分别为(13.5±4.2)%和(28.2±5.6)%,明显高于未转导腺病毒的及rAdGFP和rAdUsicon转导的U251细胞凋亡率(P<0.05)。结论腺病毒载体rAdUshmet通过抑制HGF受体c-Met表达,能在一定程度上阻断HGF-c-Met信号通路,有可能成为对胶质瘤进行基因治疗的有效载体。
- 张红楚胜华冯东福马延斌邱建华朱志安
- 关键词：肝细胞生长因子受体肝细胞生长因子腺病毒
- 肝细胞生长因子受体的shRNA抑制胶质瘤生长的体内外研究被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨肝细胞生长因子受体(c-metprotooncogene,c-Met)的RNA干涉(RNAi)技术在体内外对U251细胞生长抑制作用。方法:PCR法获得人U6启动子及带有c-Met反向互补靶序列的片段HU6shmet;利用腺病毒载体将其传递至U251细胞;应用MTT法、流式细胞术和Matrigel基质生长实验评价肿瘤细胞转导前后的生物学行为。进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察腺病毒载体介导shRNA基因治疗对U251细胞生长的抑制作用。对肿瘤组织应用免疫组化的方法进行c-Met和增殖细胞核抗原(PCNA)表达比较。结果:MTT法分析显示rAdUshmet2转导组细胞生长抑制率为70%;与对照组和rAdUsicon转导组比较,细胞周期分析结果表明rAdUshmet2转导组G0～G1期细胞数没有明显变化,进入S期的细胞数较对照组减少了12.6%～12.9%,而进入G2期细胞则增加了10.6%～l1.8%。Matrigel基质生长实验显示对照组和rAdUsicon转导组细胞呈正常形态贴壁生长,而rAdUshmet2转导组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长。裸鼠皮下荷瘤模型实验显示rAdUshmet2显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组c-Met表达下降、PCNA标记指数降低。结论:靶向c-Met的RNAi技术在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用。因此,shRNA表达腺病毒载体介导的基因治疗可以成为胶质瘤靶向性c-Met治疗的新策略。
- 楚胜华冯东福马延斌
- 关键词：神经胶质瘤肝细胞生长因子受体腺病毒
- 肝细胞生长因子受体反义寡核苷酸对胶质瘤细胞的作用被引量：4
- 2007年
- 近期的研究认为肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF）及其受体c—Met信号通路的激活对肿瘤发生、生长和侵袭起着关键的作用，而选择性地阻滞肿瘤细胞的信号通路，控制肿瘤的增殖和侵袭是当前的研究热点，这也是研究肿瘤信号通路的潜在价值所在。利用c—Met癌基因反义寡核苷酸转染至人胶质瘤U251细胞，对c—Met进行基因封闭并对比转染前后细胞增殖及黏附变化，以探讨阻断HGF／c—Met信号通路在胶质瘤中的作用。
- 楚胜华袁先厚朱志安李志强
- 关键词：肝细胞生长因子受体反义寡核苷酸转染胶质瘤细胞肿瘤发生U251细胞
- 肝细胞生长因子受体反义寡核苷酸对胶质瘤生长的抑制作用被引量：1
- 2008年
- 有研究证实肝细胞生长因子受体c-Met和胶质瘤的发生、进展关系密切。我们针对c-Met的反义寡核苷酸对人胶质瘤U251细胞进行体内外抑瘤研究，探讨将c-Met作为恶性胶质瘤基因治疗靶基因的可能性。一。
- 楚胜华冯东福朱志安
- 关键词：肝细胞生长因子受体反义寡核苷酸人胶质瘤受体C-METU251细胞恶性胶质瘤
- 脑胶质瘤患者血清中肝细胞生长因子定量测定的临床意义被引量：5
- 2010年
- 目的检测脑胶质瘤患者血清肝细胞生长因子(HGF)水平,分析血清HGF水平与胶质瘤恶性程度、手术、放射治疗及化学治疗的关系。方法 32例脑胶质瘤患者按病理分级标准分为高级别组和低级别组。以20例健康人作为对照组,采用ELISA法检测患者外周血中的HGF水平,比较正常人及胶质瘤患者手术前后、放射治疗和化学治疗前后血清HGF水平。结果高级别组脑胶质瘤患者血清中HGF水平显著高于低级别组HGF水平(P<0.01),且高级别组和低级别组均显著高于正常人(P<0.01、P=0.000446);脑胶质瘤患者手术、放射治疗及化学治疗后血清HGF水平显著下降。结论脑胶质瘤患者血清HGF浓度水平可以反映肿瘤恶性程度及治疗预后。
- 楚胜华马延斌冯东福李志强江普查袁先厚
- 关键词：神经胶质瘤肝细胞生长因子预后
