国家自然科学基金(41276158)
- 作品数：6 被引量：15H指数：3
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- 三疣梭子蟹卵巢发育期间孕激素受体的免疫识别与分布被引量：1
- 2013年
- 为探讨三疣梭子蟹卵巢发育过程中孕激素受体(progestin receptor,PR)的调控作用,采用免疫印迹和免疫组化方法,首次对三疣梭子蟹卵巢、肝胰腺、大颚器、Y器官、视神经节和胸神经团中的PR进行免疫识别和定位,并系统研究了卵巢发育期间PR在这些器官中的分布和变化。结果表明:(1)三疣梭子蟹视神经节中存在PR阳性条带,分子量为100 ku;(2)PR仅在早期(Ⅰ～Ⅲ期)生殖细胞胞质和后期(Ⅲ～Ⅴ期)细胞核呈强阳性,但在各期滤泡细胞中始终呈强阳性;(3)PR阳性主要存在于Ⅰ～Ⅴ期肝胰腺F细胞和Ⅲ期R细胞核中,其余肝胰腺细胞中均无PR阳性;(4)大颚器腺细胞中的PR阳性仅发现于Ⅳ期腺细胞胞质中,各期Y器官腺细胞中均呈PR阴性;(5)就视神经节而言,PR主要存在于Ⅲ～Ⅴ期的神经细胞。就胸神经团而言,Ⅰ～Ⅴ期神经细胞中的PR阳性呈增强趋势,而Ⅰ～Ⅴ期神经髓质中PR始终呈PR强阳性。结果表明,孕酮不仅可以通过与卵巢和肝胰腺中PR结合直接调控三疣梭子蟹的卵黄发生和卵巢发育,还可能通过影响其它内分泌激素的合成和分泌来间接调控其卵巢发育。
- 陈浩吴旭干刘智俊成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹孕激素受体免疫印迹卵巢发育
- 三疣梭子蟹几丁质酶基因的克隆及其在蜕皮过程中的表达分析被引量：4
- 2015年
- 为探究几丁质酶基因在三疣梭子蟹蜕皮过程中的生理作用,本研究通过转录组测序和RACE技术克隆了三疣梭子蟹几丁质酶基因（Pt Chi）c DNA全长（登录号：KF914663）,并通过荧光定量PCR（qRT-PCR）技术研究了该基因在三疣梭子蟹不同组织及不同蜕皮阶段的表达情况。结果表明：（1）Pt Chi基因c DNA全长2 200 bp,包括5＇非编码区（5＇-UTR）16 bp、3＇非编码区（3＇-UTR）714 bp和开放阅读框1 470 bp,编码489个氨基酸,预测蛋白质分子量和等电点为53.97 ku和4.76。（2）Blast P结果显示,Pt Chi推导氨基酸序列与已知甲壳动物Chi-3的一致性为61%～96%,系统进化树分析表明Pt Chi与其他甲壳动物Chi-3聚为一支。（3）qRTPCR结果显示Pt Chi基因在C期三疣梭子蟹肝胰腺中表达水平最高,胃、大颚器、心脏和眼柄中Pt Chi-mRNA表达水平依次降低,在其他组织中Pt Chi-mRNA表达量最低,且表达水平无显著差异。（4）不同蜕皮阶段,Pt Chi在肝胰腺、肠、胃和大颚器4种组织中的表达变化模式有所不同,肝胰腺中Pt Chi-mRNA表达水平在AB期最高,C期最低,暗示Pt Chi可能参与三疣梭子蟹蜕皮后期对病原体的免疫防御;肠中的Pt Chi-mRNA表达水平在E期最高,C期最低,推测Pt Chi参与蜕皮过程中肠道围食膜的分解和免疫功能;胃中Pt Chi表达水平在C期最高,暗示其参与了食物消化。以上结果表明,本研究克隆的Pt Chi可能为甲壳动物Chi-3型,其准确生理学功能及其在蜕皮过程中的调控机制有待进一步深入研究。
- 王伟王伟潘桂平吴旭干潘桂平
- 关键词：三疣梭子蟹几丁质酶基因克隆
- 饲料中DHA/EPA比例对三疣梭子蟹卵黄发生的调控
- 三疣梭子蟹是我国重要的海水养殖蟹类,池塘养殖雌体卵巢发育不良严重阻碍了其养殖业的健康发展,脂肪酸营养可能是其重要原因之一。本研究通过配制四组不同DHA/EPA比值的半纯化饲料,投喂生殖蜕壳后的雌体,系统研究了饲料中DHA...
- 吴旭干徐蕾丰浪成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹卵黄发生
- 水温和单体筐养对三疣梭子蟹雌体卵巢发育和常规生化成分的影响被引量：6
- 2015年
- 单体筐养是一种新型的三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)养殖方式。以交配后的三疣梭子蟹雌体为研究对象,采用养殖实验和生化分析方法,在相同的养殖环境条件下,研究了升温单体筐养(简称升温单养组,T1)、升温群体养殖(简称升温群养组,T2)、常温单体筐养(简称常温单养组,T3)和常温群体养殖(简称常温群养组,T4)4种养殖模式对三疣梭子蟹雌体卵巢指数(GSI)及其常规生化成分的影响。结果显示:(1)加温可以显著促进雌体卵巢发育,提高出肉率和总可食率;相同水温条件下,单体筐养和群体养殖组间的卵巢发育无显著差异。(2)尽管实验后各组雌体的GSI均有所上升,但升温组的上升幅度显著大于常温组。(3)加温可以显著提高肝胰腺中的脂肪含量,降低其水分和灰分含量,而对卵巢和肌肉中的常规成分影响较小。(4)水温和养殖方式对各组织中灰分含量影响显著,加温显著降低组织中的灰分含量;常温与升温温度条件下,单体筐养可以提高雌蟹卵巢和肝胰腺中的脂肪含量。研究表明,适当加温可以显著促进三疣梭子蟹雌体卵巢发育,单体筐养对雌体卵巢发育和常规生化组成影响不大。
- 潘桂平候文杰吴旭干吴仁福张年国龙晓文周文玉成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹水温卵巢发育
- 三疣梭子蟹雌激素相关受体基因在蜕皮过程中的表达分析被引量：4
- 2016年
- 雌激素相关受体(ERR)在甲壳动物蜕皮过程中可能起着重要的调节作用,但是尚不清楚该基因在三疣梭子蟹不同组织和不同蜕皮阶段的表达模式。本文采用荧光定量PCR(qRT-PCR)技术研究了三疣梭子蟹雌激素相关受体(Pt ERR)基因在不同组织和不同蜕皮阶段的表达情况。结果表明,Pt ERR-mRNA在C期三疣梭子蟹的Y器官和鳃中表达水平最高,其次眼柄和胃中表达水平也相对较高,在3种肌肉组织和三角膜中表达水平较低。在不同蜕皮阶段,13种组织中的Pt ERR-mRNA表达水平均差异显著。Y器官中Pt ERR-mRNA从AB期到E期呈显著上升趋势;胸神经节和眼柄中的Pt ERR-mRNA变化模式均为先上升后下降趋势,大颚器中的Pt ERR-mRNA变化趋势为先下降后上升;大螯肌肉、附肢肌肉和三角膜中的Pt ERR-mRNA表达水平均呈显著升高趋势,而腹部肌肉中Pt ERR-mRNA为先下降后上升趋势;就消化代谢器官而言,胃、肝胰腺和鳃中Pt ERR-mRNA在整个蜕皮周期中均为先升高后降低的趋势,其中D期达最高值;肠道中Pt ERR-mRNA相对表达量在D期最高,C期和E期较低;从AB期至E期,心脏中Pt ERR-mRNA表达水平一直显著增加,每期增加1倍左右。综上,Pt ERR主要在Y器官、鳃、眼柄和胃中表达,可能参与调控蜕皮过程、细胞增殖和能量代谢等。
- 陆洋吴旭干潘桂平王伟候文杰成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹雌激素相关受体
- 饲料中DHA/EPA比例对三疣梭子蟹卵黄发生的调控
- 三疣梭子蟹是我国重要的海水养殖蟹类,池塘养殖雌体卵巢发育不良严重阻碍了其养殖业的健康发展,脂肪酸营养可能是其重要原因之一。本研究通过配制四组不同DHA/EPA比值的半纯化饲料,投喂生殖蜕壳后的雌体,系统研究了饲料中DHA...
- 吴旭干徐蕾丰浪成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹卵黄发生
- 三疣梭子蟹卵巢发育过程中雌二醇的免疫定位和变化
- 2017年
- 雌二醇(estradiol,E_2)是甲壳动物体内重要的性类固醇激素,对其卵巢发育和卵黄发生起着十分重要的调控作用。本实验采用免疫组织化学方法系统研究了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)卵巢发育过程中E_2在卵巢、肝胰腺、胸神经节、脑神经节和大颚器中的分布及变化。结果表明:(1)蟹卵巢中E_2的免疫阳性主要分布于滤泡细胞和卵巢发育中后期的卵母细胞细胞质(II-V期),卵巢发育过程中卵母细胞细胞质和细胞核中的E_2免疫阳性均为先上升后下降的趋势,最大免疫阳性分别出现在IV期和II-III期,滤泡细胞中始终存在较强的E_2免疫阳性;(2)肝胰腺中的E_2免疫阳性主要分布于F细胞及R细胞细胞核中,R细胞细胞核中的E_2免疫阳性从III期开始显著下降,F细胞中始终存在较强的E_2免疫阳性;(3)卵巢发育(I-V期)的神经组织,E_2主要分布于胸神经团的神经细胞和神经髓质以及脑神经节神经细胞细胞核内,其中脑神经节神经细胞细胞核中始终保持着强免疫阳性,卵巢发育早期(I-II期)胸神经团中的神经髓质中为E_2中等免疫阳性,神经细胞中一直为弱免疫阳性;(4)就大颚器而言,E_2强免疫阳性始终存在于大颚器腺细胞的核仁以及细胞核周围的细胞质内。以上结果表明,E_2在三疣梭子蟹卵巢、肝胰腺、神经组织和大颚器中广泛分布,且免疫阳性与卵巢发育具有一定的相关性,E_2可能通过作用于多个靶器官来调控三疣梭子蟹的卵巢发育。
- 柳梅梅吴旭干潘杰成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹卵巢发育雌二醇免疫定位作用靶点
- 雌激素拮抗剂对三疣梭子蟹卵巢发育及相关基因表达的影响被引量：1
- 2018年
- 通过活体注射、养殖实验和荧光定量PCR等方法,研究了不同浓度他莫昔芬(TAM)对三疣梭子蟹雌体成活率、卵巢指数、肝胰腺指数及卵巢发育相关基因表达的影响。结果显示,不同浓度TAM对雌体存活率和肝胰腺指数均无显著影响,但在一定程度上抑制了卵巢指数。不同组织中的卵黄蛋白原(Vg)、雌激素相关受体(ERR)、维甲酸受体(RXR)和蜕皮激素受体(Ec R)基因表达均受到了TAM的影响,Vg基因在卵巢和肝胰腺中的表达水平明显受到TAM的抑制;低浓度TAM组(6.7和13.4μg/g)促进了卵巢和胸神经节中的ERR基因的表达,但高浓度TAM(20μg/g)抑制了大部分组织中ERR基因表达水平;外源注射TAM对三疣梭子蟹卵巢和肝胰腺中的Ec R基因表达的变化模式与ERR基因基本相似;此外,低浓度TAM促进了卵巢中RXR基因的表达,对肝胰腺中RXR基因表达无显著影响。研究表明,TAM通过抑制Vg基因表达影响卵巢发育,同时ERR和Ec R可能参与了雌激素或雌激素拮抗剂对三疣梭子蟹卵巢发育的调控过程。
- 陆洋吴旭干柳梅梅巩杰成永旭
- 关键词：三疣梭子蟹卵巢发育雌激素拮抗剂基因表达
