黑龙江省科技攻关计划(GB06C40503)
- 作品数：7 被引量：28H指数：3
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- 恒定性及波动性高糖对牛视网膜周细胞凋亡的影响被引量：2
- 2007年
- 目的探讨恒定性高糖及不同频率的波动性高糖对原代培养的牛视网膜周细胞增生、细胞周期及凋亡的影响。方法以体外培养3代近融合的牛视网膜毛细血管周细胞为对象,分别在对照组(5.5mmol/L)、恒定性高糖组(25mmol/L)及不同波动频率的高糖组(5.5mmol/L与25mmol/L交替,频率分别为6h和24h)中孵育6d,采用MTT比色法观察周细胞增生情况;流式细胞术观察周细胞周期情况;TUNEL法检测培养后周细胞的凋亡率。结果周细胞增生受抑制,周期阻滞,出现典型的细胞凋亡特征。恒定性高糖组的作用高于波动性高糖组(P<0.05);波动性高糖组内波动频率越高作用越明显(P<0.05)。结论恒定性高糖较波动性高糖可能具有更强的抑制周细胞增生、周期阻滞及诱导凋亡作用,波动组间波动频率高者比频率低者作用更明显。
- 匡洪宇段鹏马丽丽朱雪磊江红
- 关键词：糖尿病视网膜病变周细胞细胞凋亡
- 恒定及波动高糖下牛视网膜血管周细胞凋亡的线粒体机制被引量：3
- 2008年
- 目的研究恒定及波动高糖培养对牛视网膜血管周细胞凋亡的影响，并探讨其线粒体调控机制。方法体外培养接近融合的视网膜血管周细胞在恒定及波动高糖中孵育6d后，采用电镜观察周细胞超微结构改变；TUNEL法检测周细胞凋亡；激光共聚焦显微镜检测周细胞线粒体跨膜电位的改变；分光光度计检测周细胞胞质细胞色素C的变化；免疫组化和RT-PCR测定Bax、Bcl-2基因的表达。结果（1）恒定及波动高糖下周细胞呈现出典型的细胞凋亡改变，恒定高糖作用强于波动高糖组；（2）恒定及波动高糖培养使周细胞线粒体跨膜电位降低，周细胞线粒体跨膜电位与周细胞凋亡率负相关（r=-0．89，P〈0．01）；（3）恒定及波动高糖促使周细胞线粒体细胞色素C转移到胞质，胞质细胞色素c浓度增加，与细胞凋亡率正相关（P〈0．01）；（4）恒定及波动高糖能诱导凋亡基因Bax表达增加，抑制Bcl-2的表达，Bax／Bcl-2比值增加。Bax／Bcl-2比值与线粒体跨膜电位负相关，与胞质细胞色素c浓度正相关，与周细胞凋亡率正相关（均P〈0．01）。结论恒定及波动高糖均可诱导培养的周细胞线粒体跨膜电位降低，细胞色素c释放，细胞发生凋亡，且恒定高糖作用强于波动高糖；线粒体凋亡途径在周细胞凋亡中起重要作用，凋亡基因Bax、Bcl-2可能参与其调控。
- 匡洪宇段鹏马丽丽朱雪磊江红康英英阴慧清
- 关键词：糖尿病视网膜病变线粒体周细胞凋亡基因
- 炎症因子与糖尿病视网膜病变被引量：11
- 2007年
- 近年的研究发现许多炎症因子如C-反应蛋白、白细胞介素、肿瘤坏死因子-α、血浆纤溶酶原激活物抑制因子与糖尿病视网膜病变的发生、发展密切相关。许多药物如非甾体抗炎药、他汀类药物、血管紧张素转换酶抑制剂、血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂、噻唑烷二酮类药物均可使炎症因子表达水平下降。
- 江红匡洪宇
- 关键词：炎症因子糖尿病糖尿病视网膜病变
- 持续及间断高糖培养对牛视网膜血管周细胞凋亡的影响被引量：5
- 2008年
- 目的探讨不同浓度的持续高糖和间断高糖对牛视网膜血管周细胞(BRPs)增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法分别在低糖、持续及间断高糖下培养BRPs7天;应用MTT比色法观察各组BRPs增殖情况;应用TUNEL法检测BRPs凋亡率;应用流式细胞术观察BRPs细胞周期的情况。结果(1)持续及间断高糖均可抑制BRPs增殖,诱导其凋亡,与对照组比较,P<0.01,其中35mmol/L持续高糖组的吸光度为0.274,凋亡率为48.73%;(2)持续及间断高糖可使BRPsG0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,G2/M细胞比例无明显改变;(3)间断高糖组中波动幅度及频度大者对BRPs的作用更明显。结论高糖毒性和高糖波动性共同参与视网膜病变的发生,且高糖绝对水平的作用超过高糖的不稳定性作用。
- 匡洪宇马丽丽江红朱雪磊
- 关键词：糖尿病视网膜病变凋亡周细胞细胞周期
- 高浓度葡萄糖对牛视网膜血管周细胞凋亡及凋亡调节基因表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的研究不同浓度葡萄糖培养条件对牛视网膜血管周细胞凋亡及凋亡调节基因Bcl-2、Bax表达的影响，探讨Bcl-2、Bax对周细胞凋亡的调控。方法在体外培养第3代近融合的视网膜血管周细胞中加入不同浓度的葡萄糖（5．5mmol／L、15．0mmol／L、25．0mmol／L和35．0mmol／L）孵育6d后，应用MTT方法检测高糖下牛视网膜周细胞增殖情况，TUNEL法特异性标记凋亡细胞，免疫组化染色法和RT—PCR测定Bcl-2、Bax基因的表达。结果周细胞在高浓度葡萄糖培养下，细胞增殖受抑制，呈现出典型的细胞凋亡特征，凋亡率分别为（28．4±0．8）％、（40．4±0．9）％与（50．2±0．6）％。高浓度葡萄糖培养呈剂量依赖性促周细胞凋亡（r=0．959，P〈0．01）和凋亡调节基因Bax的表达（蛋白水平r=0．966，P〈0．01；mNRA水平r=0．874，P〈0．01）及抑制凋亡调节基因Bcl-2的表达（蛋白水平r=-0．964，P〈0．01；mNRA水平r=-0．912，P〈0．01）；周细胞的凋亡率与Bax／Bcl-2比率呈正相关（r=-0．810，P〈0．01）。结论高浓度葡萄糖培养以剂量依赖的方式促进周细胞凋亡，Bcl-2、Bax基因表达的改变参与了细胞凋亡的调控。
- 匡洪宇段鹏马丽丽朱雪磊江红康英英阴慧清
- 关键词：糖尿病视网膜病变周细胞细胞凋亡
- 高糖诱导视网膜血管周细胞凋亡中线粒体细胞色素C的变化被引量：3
- 2007年
- 目的:研究高糖诱导牛视网膜血管周细胞凋亡中线粒体细胞色素C(Cyt-C)的变化。方法:以在体外培养3代近融合的牛视网膜毛细血管周细胞为对象,分别在对照组(5.5mmol/L)与高糖各组(15,25,35mmol/L)中孵育6d,透射电镜观察周细胞超微结构改变,TUNEL法检测培养后周细胞的凋亡情况,分光光度计检测周细胞胞质Cyt-C变化。结果:高糖各组周细胞出现明显凋亡改变,凋亡率明显高于对照组(t1=57.450,t2=83.754,t3=136.403,P<0.01);高糖各组胞质Cyt-C浓度明显高于对照组(t1=17.361,t2=17.866,t3=24.072,P<0.01),且Cyt-C浓度与周细胞凋亡率明显正相关(r=0.964,P<0.01)。结论:高糖呈剂量依赖性诱导牛视网膜血管周细胞凋亡,线粒体Cyt-C释放可能参与周细胞凋亡过程。
- 段鹏匡洪宇马丽丽朱雪磊江红康英英
- 关键词：糖尿病视网膜病变周细胞细胞色素C细胞凋亡
- 黄芪总黄酮对高糖下牛视网膜血管周细胞凋亡及凋亡基因表达的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨不同浓度黄芪总黄酮对高糖下原代培养的牛视网膜血管周细胞凋亡及凋亡基因表达的影响。方法以在体外培养3代近融合的牛视网膜血管周细胞为对象,分别在对照组(5.5mmol/L葡萄糖)、高糖模型组(25mmol/L)、干预组(在高糖组基础上分别加入0.5、1.0、2.0mg/ml黄芪总黄酮)中孵育6d,采用TUNEL法检测周细胞的凋亡率;RT-PCR测定Bcl-2、Bax基因的表达。结果(1)高糖下血管周细胞出现明显凋亡现象,高糖组血管周细胞凋亡率与对照组有显著差异(P<0.01)。(2)高糖组诱导凋亡调节基因Bax表达增加,Bcl-2表达下降,与对照组有显著差异(P<0.01)。(3)黄芪总黄酮各组血管周细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.01),凋亡调节基因Bax表达下降,Bcl-2表达增加。在TFA各干预组之间,1.0mg/ml组与0.5mg/ml相比凋亡率低,Bax表达下降,Bcl-2表达增加(P<0.01),但1.0mg/ml与2.0mg/ml组间凋亡率及凋亡基因表达无明显差异(P>0.05)。结论黄芪总黄酮可能通过促使凋亡调节基因Bax表达下降,Bcl-2表达增加,抑制高糖诱导的牛视网膜微血管周细胞凋亡。
- 匡洪宇段鹏马丽丽王立平刘辉康英英
- 关键词：黄芪总黄酮糖尿病视网膜病变周细胞细胞凋亡
