浙江省自然科学基金(302095)
- 作品数：5 被引量：29H指数：4
- 相关作者：瞿佳周翔天吕帆付小莹胡诞宁更多>>
- 相关机构：温州医学院浙江省人民医院吉林大学第二医院更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省教育厅科研计划更多>>
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- 正常幼年豚鼠视觉发育的正视化过程被引量：8
- 2008年
- 目的:研究正常豚鼠眼球生长发育变化规律,为豚鼠作为近视研究的动物模型提供理论依据。方法:选取刚出生的英国种三色豚鼠64只,随机分为8组,每组8只,雌雄各半。分别在第0、1、2、3、5、7、9和11周测量其中一组豚鼠的屈光力(R)、角膜曲率半径(RCC)、前房深度(AS)、晶状体厚度(CL)、玻璃体腔长度(VC)和眼轴总长度(AL)。将左右眼测量值合并在一起分析正视化过程中各屈光成分的变化规律。RCC、AS、CL、VC、AL和R分别做直线相关分析。结果:各组中左右眼的R、RCC、AS、CL、VC和AL差异无显著性(P>0.05),雌雄鼠的R、RCC、AS、CL、VC和AL差异无显著性(P>0.05)。豚鼠出生时为远视[(+5.25±0.22)D],以后远视度数逐渐下降,到11周龄达(+1.34±0.61)D并趋于稳定(P=0.215)。RCC出生时为(3.23±0.01)mm,AS出生时为(1.20±0.00)mm,CL出生时为(2.72±0.02)mm和VC出生时为(3.27±0.01)mm,4项参数在出生后的3周内总体呈上升趋势;3周后除了AS基本保持不变,其他3个参数仍在逐渐增加。AL[出生时为(7.19±0.02)mm]发生了明显的延长(P<0.05)。各参数与屈光力的相关性分析,其中VC与屈光力密切相关(r=-0.818,P<0.01),其他5个参数与屈光力呈中等相关(r=-0.558～-0.680,P<0.01)。结论:在视觉发育期内,豚鼠的各项屈光参数均向正视化发展,完成正视化的时间在9～11周。正视化进程主要与玻璃体腔长度的变化有关。
- 王瑞卿赵海岚胡娱新吴荒苏冠方
- 关键词：正视化动物模型
- 人眼虹膜色素上皮细胞的培养与鉴定被引量：5
- 2003年
- 目的 :观察体外培养的人眼虹膜色素上皮细胞(irispigmentepithelium ,IPE)的生长状况 ,用透射电镜、细胞免疫化学实验鉴定其性质 ,为进一步研究IPE细胞生理、病理作用提供模型。方法 :对来源于不同个体的健康人眼采用酶消化加显微分离法 ,分离IPE细胞 ,对其进行培养、传代、冻存和复苏。用透射电镜、细胞免疫化学法鉴定细胞性质。建立IPE细胞的有限细胞系。结果 :原代培养的IPE呈棕黑色多角形或不规则形 ,2 4h内 73%细胞贴壁。贴壁细胞体积变大呈多边形或方形 ,胞核轮廓变清 ,胞浆内充满黑色素颗粒。分裂增殖生长的细胞色素颗粒逐渐减少 ,4～ 6代后细胞内色素随着不断分裂逐渐减少至消失 ,部分形态变为成纤维细胞状。电镜下可见细胞表面有丰富的微绒毛 ,胞浆内含少量色素颗粒。细胞免疫化学抗角蛋白与抗S 10 0染色显示IPE细胞胞质呈鲜红色着色。结论 :采用酶消化加显微分离法可以建立人IPE的有限细胞系。
- 付小莹周翔天宋宗明吕帆瞿佳胡诞宁
- 关键词：虹膜色素上皮细胞细胞培养免疫组化
- 黄色人种葡萄膜黑色素细胞的体外培养及其色素合成研究被引量：4
- 2004年
- 目的 探讨体外培养黄色人种脉络膜、虹膜黑色素细胞的可行性 ,并观察黑色素细胞能否在体外培养时合成色素。方法 将除去色素上皮细胞的脉络膜、虹膜基质组织用胰酶与胶原酶消化 ,分离得到的细胞用添加胎牛血清、碱性成纤维细胞生长因子、异丁基甲基黄嘌呤、霍乱毒素的F12培养液培养。用角蛋白抗体、S 10 0抗体进行细胞免疫组化染色。用分光光度计测定细胞内黑色素含量并计算其生成量。结果 成功体外培养了葡萄膜黑色素细胞 ;生长期每个黑色素细胞内的平均色素含量为 (79 83± 36 2 0 ) pg ,每个细胞每天合成黑色素 (11 4 4± 5 77) pg ,体外培养的葡萄膜黑色素细胞S 10 0表达阳性 ,但角蛋白表达阴性。结论 体外培养的黄色人种葡萄膜黑色素细胞能在体外合成色素 ,黄色人种葡萄膜黑色素细胞内的色素含量与制造量介于白色人种和黑色人种之间。
- 周翔天瞿佳付小莹吕帆胡诞宁
- 关键词：黄色人种葡萄膜黑色素细胞体外培养脉络膜
- 人眼巩膜成纤维细胞中视黄酸受体的分布及其对巩膜成纤维细胞的生长调控被引量：12
- 2007年
- 目的研究正常人眼巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达，进一步研究视黄酸对人巩膜成纤维细胞的生长调控作用，从而阐明其和近视发生发展的关系。方法应用定点解剖及游走促进法分离培养人巩膜成纤维细胞，取3～5代生长良好的细胞，运用逆转录聚合酶链式反应（RT—PCR）检测培养的巩膜成纤维细胞视黄酸受体亚型的表达；在培养液中分别加入0．01、0．10、1．00、10．00和100．00nmol／L的视黄酸，6d后进行细胞计数。每株细胞重复3次，共用3株细胞，观察视黄酸对巩膜成纤维细胞的生长调控作用。结果培养的巩膜成纤维细胞呈双极型或纺锤型，平均分裂时间为2～3d左右，细胞生长旺盛，近融合时细胞成规则排列的纺锤型。RT—PCR提示体外培养的人巩膜成纤维细胞表达所有的视黄酸受体亚型。视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长，对细胞生长的抑制作用呈明显的剂量效应关系，RA浓度≥0．10nmol／L时，与无RA的对照组相比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论所有的视黄酸受体亚型在人巩膜成纤维细胞上均有分布，视黄酸能明显抑制人巩膜成纤维细胞的生长。
- 闫东升周翔天陈晓燕吕帆王教胡诞宁瞿佳
- 关键词：巩膜成纤维细胞受体维甲酸近视
- 杆状病毒介导LacZ基因转染体外培养的人虹膜色素上皮细胞(英文)
- 2003年
- 目的 :研究重组杆状病毒 (baculovirus)载体介导 β 半乳糖苷酶基因 (LacZ)对体外培养虹膜色素上皮(IPE)细胞的转染和表达情况。方法 :将质粒pCMV β中的CMV LacZ表达盒插入杆状病毒表达载体pFastBacI的EcoRI/HindⅢ位点 ,构建重组质粒pBac β ,并利用Bac to Bac表达系统在Sf9细胞中产生出重组杆状病毒BV β。将MOI为 2 0 0的BV β感染经酶消化加显微法分离培养的IPE细胞 ,2 4h后进行X gal染色。在显微镜下观察IPE中LacZ表达阳性的情况 ,记录阳性细胞所占的百分比。结果 :限制性酶切分析及测序结果表明 ,我们已成功构建表达质粒pBac β及重组杆状病毒BV β。X gal染色证实杆状病毒介导LacZ在细胞中的表达呈蓝色 ,弥漫于整个胞浆。感染后 2 4h时表达阳性率达 85 %。结论 :重组杆状病毒可有效介导报告基因在体外培养的IPE细胞中表达 ,为利用杆状病毒构建可供移植的基因工程化虹膜色素上皮细胞提供了实验依据。
- 彭颖周翔天付小莹吕建新瞿佳
- 关键词：杆状病毒LACZΒ-半乳糖苷酶基因
