国家教育部博士点基金(20123107110003) 作品数:19 被引量:83 H指数:6 相关作者: 高月求 孙学华 周振华 李曼 张鑫 更多>> 相关机构: 上海中医药大学附属曙光医院 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 国家科技重大专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
非酒精性脂肪性肝病先天免疫机制的研究进展 被引量:3 2015年 非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病机制和疾病进展与先天免疫系统的激活密切相关。综述了各类免疫细胞、Toll样受体及其下游信号通路参与胰岛素抵抗、介导氧化应激和肝脏炎症及纤维化过程。树突状细胞的减少或消除可延迟肝脏炎症反应和纤维组织增生的发生。自然杀伤T淋巴细胞的减少在单纯脂肪变阶段可诱导脂质积累,而在炎症阶段可减轻纤维化进程。胰岛素及氨基酸m TOR信号通路可通过短期或长期调控抑制自噬过程,引起内质网应激及胰岛素抵抗状态改变,从而影响NAFLD的发生发展。中医药治疗NAFLD的机制研究亦愈来愈偏向免疫机制方向。 翟晴晴 周振华 王唯坚 孙学华 朱晓骏 张鑫 李曼 高月求关键词:脂肪肝 枯否细胞 TOLL样受体 自噬 白桦脂酸对质粒急性感染模型小鼠的HBV DNA抑制作用研究 被引量:2 2014年 桦木酸是一种天然存在的五环三萜系化合物,它具有抗逆转录病毒,抗疟疾和抗炎特性。该研究主要目的是观察白桦脂酸对Payw1.3质粒急性感染小鼠模型的HBV DNA复制的抑制作用。实验的Payw1.3质粒急性感染小鼠模型(n=15)采用水动力转染技术构建,随机分为PBS对照组(n=5),白桦脂酸药物治疗组(n=5)及拉米夫定对照组(n=5),建模成功后次日分别予以白桦脂酸(100 mg·kg-1),拉米夫定(50 mg·kg-1),PBS药物灌胃,每日1次,连续7 d,分别在3,5,7 d眼眶静脉后采血,ELISA法测血清中HBsAg及HBeAg表达,并在7 d后处死小鼠,southern法检测肝组织HBV DNA表达。结果发现与PBS对照组相比,5 d时白桦脂酸能明显抑制Payw1.3质粒急性感染小鼠HBsAg表达(P<0.05),与拉米夫定效果无明显差异。与对照组相比,白桦脂酸和拉米夫定对HBeAg表达均无明显抑制作用,白桦脂酸和拉米夫定对肝组织HBV DNA表达均有抑制作用。这些结果揭示了白桦脂酸能够抑制Payw1.3质粒急性感染小鼠血清HBsAg表达及肝脏内HBV DNA的复制。 乔兵 高月求 李曼 吴韶飞 郑超 金树根 吴惠春 余卓 孙学华关键词:白桦脂酸 乙型病毒性肝炎 二甲基亚硝胺对不同年龄及性别小鼠急性肝损伤的影响 被引量:3 2015年 目的:研究年龄与性别对二甲基亚硝胺(DMN)中毒所致小鼠急性肝损伤的影响。方法:采用一次性DMN 17.5μl/kg腹腔内注射染毒致4、8、12周龄雌雄性小鼠急性肝损伤,通过肝功能血清生化指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、直接胆红素(DBil)、血清白蛋白(Alb)和总胆固醇(TC)]检测和肝组织HE染色病理学检查,观察不同性别和年龄小鼠急性肝损伤变化特征。结果:DMN染毒48h后致4周龄小鼠血清ALT、AST上升和肝内出血性坏死,以雌性小鼠病变更为明显,部分雌性小鼠出现腹水。8周龄和12周龄小鼠血清ALT、AST上升和肝内出血性坏死更为明显,以雌性小鼠病变极为严重,12周龄小鼠肝呈花斑状,雌性小鼠全部出现腹水并出现死亡,8周龄和12周龄小鼠各有2只雄性小鼠出现腹水。结论:DMN中毒所致小鼠急性肝损伤与年龄和性别密切相关,以雌性、成年小鼠更加明显,表现为肝内出血性坏死和腹水为特征。 陈高峰 平键 高月求 金树根关键词:二甲基亚硝胺 小鼠 性别 急性肝损伤 出血性坏死 腹水 HBV细胞模型研究进展 被引量:2 2015年 HBV感染已成为肝癌发病的最主要原因,建立一系列HBV细胞模型为研究HBV的致病机理和治疗奠定了良好的基础。介绍了以HBV转染和感染为主的单一种类细胞培养模型、多种细胞共培养模型以及其他动物模型,探讨HBV感染细胞模型的建立方法及其病毒学特点,为科学阐释中医药防治慢性乙型肝炎的优势作用环节提供可靠的模型依据。 吴疆 周振华 孙学华 朱晓骏 李曼 张鑫 高月求关键词:细胞培养技术 TGF-β-Smad信号转导途径在肝纤维化中的作用及中药干预的研究进展 被引量:3 2014年 肝纤维化(LF)的病理过程是当肝细胞发生炎症刺激或坏死时,因ECM的合成、沉积与降解不平衡等因素而引起的,其中涉及复杂的细胞及分子机理的一个动态过程.肝纤维化不仅是向肝硬化发展的重要阶段,而且也是各种慢性肝病共同的病理特征,如果病因持续地存在,将导致肝小叶、血管等的改变,同时中心静脉区和汇管区出现假小叶而使肝脏的正常结构遭到不可逆的转变,即发展为不可逆转的肝硬化. 何林蔓 李曼 周振华 张鑫 高月求关键词:转化生长因子-Β SMAD蛋白 肝纤维化 中药 复方鳖甲软肝片治疗原发性胆汁性肝硬化的临床疗效评价 被引量:20 2015年 目的评价复方鳖甲软肝片治疗原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床疗效。方法按照随机双盲安慰剂对照设计方法,纳入上海中医药大学附属曙光医院2011年11月-2013年12月确诊的56例PBC患者,分为治疗组和对照组各28例。治疗组给予复方鳖甲软肝片(4片/次,3次/d,口服)联合熊去氧胆酸片(UDCA)(50 mg/片,10~15 mg·kg^-1·d^-1)治疗。对照组给予空白安慰剂(4片/次,3次/日,口服)联合UDCA 50 mg/片,10~15 mg·kg^-1·d^-1)治疗。两组患者均治疗12个月。观察治疗前后患者临床症状、PBC-40量表、肝功能(ALT、AST、ALP、GGT、TBil)、肝脏弹力硬度值的变化。组间计量资料比较采用t检验,计数资料比较采用χ2检验。结果治疗12个月后,治疗组患者肝功能ALT、AST、GGT、ALP、TBil均有显著下降,与治疗前相比差异有统计学意义(t值分别为3.2019、3.0953、3.0279,P值均〈0.01;t值分别为2.4420、2.1621,P值均〈0.05),对照组患者肝功能仅GGT显著下降,与治疗前相比差异有统计学意义(t=1.9981,P〈0.05);治疗后两组患者肝功能比较,治疗组GGT、ALP较对照组显著下降,两组相比差异有统计学意义(t值分别为2.0061、2.3106,P值均〈0.05)。治疗组患者脏弹力硬度值由治疗前(14.37±10.58)k Pa显著下降至(10.02±5.96)k Pa,差异有统计学意义(t=2.1134,P〈0.05)。治疗组患者治疗后PBC-40量表皮肤瘙痒、社交和疲劳维度较治疗前显著下降,差异有统计学意义(t值分别为2.5158、2.1409、3.2441,P值均〈0.05),两组患者治疗后在疲劳和社交维度差异有统计学意义(t值分别为3.1491、2.6287,P值均〈0.05)。结论复方鳖甲软肝片可显著改善PBC患者肝功能,降低患者肝脏弹力硬度值,显著改善患者PBC-40皮肤瘙痒和疲劳等临床症状,在临床上具有一定推广应用价值。 黄凌鹰 周振华 孙学华 李曼 朱晓骏 金树根 张鑫 高月求关键词:肝硬化 胆汁性 复方鳖甲软肝片 牛磺 熊去氧胆酸 血府逐瘀汤对刀豆蛋白A诱导小鼠肝纤维化的干预作用 被引量:7 2014年 目的:观察血府逐瘀汤对刀豆蛋白A(Con A)诱导小鼠肝纤维化的干预作用。方法:Balb/c雄性小鼠40只,随机分为正常组(8只),模型组(16只)和治疗组(16只)。模型组和治疗组按照1.25mg/100g小鼠体重予以尾静脉注射Con A,正常组予注射相应剂量生理盐水,1次/周,共10周。治疗组于造模同时,予血府逐瘀汤药液1ml/100g小鼠体重灌胃,正常组及模型组则予以等量饮用水,1次/d。10周后,处理各组小鼠,留取血清、肝脾标本。全自动生化仪检测血清血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)和白蛋白(Alb);HE和天狼星红染色观察肝组织炎症和胶原沉积;RT-PCR和Western Blot法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和转化生长因子β1(TGF-β1)表达。结果:模型组小鼠ALT和AST活性均较正常组明显升高(P<0.05);肝组织HE染色可见肝细胞坏死和大量炎性细胞浸润;天狼猩红染色可见大量胶原沉积和假小叶形成;肝组织α-SMA和TGF-β1较正常组显著升高(P<0.01)。与模型组相比,治疗组ALT、AST水平明显降低(P<0.05);肝脏炎症和胶原沉积明显改善;α-SMA和TGF-β1表达显著下调(P<0.01)。结论:血府逐瘀汤可通过减轻肝脏炎症和抑制肝星状细胞活化而改善Con A诱导的小鼠肝纤维化。 吴惠春 吴韶飞 周振华 张鑫 李曼 高月求关键词:刀豆蛋白A 肝纤维化 小鼠 NK细胞和NKT细胞在慢性乙型肝炎中的表型和功能特征 被引量:7 2015年 目的检测慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血自然杀伤(NK)细胞、自然杀伤T(NKT)细胞的比例、NKG2D/NKG2A水平和γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。方法采集并分离CHB患者外周血单个核细胞(PBMC),流式细胞术检测NK、NKT细胞占PBMC的比例,NKG2D、NKG2A水平,经佛波酯(PMA)、布雷菲德菌素A(BFA)、离子霉素(ionomycin)处理后,流式细包术检测IFN-γ、TNF-α的水平,分析各指标与乙肝病毒载量和血清丙氨酸氨基转移酶的关系,采用独立样本t检验与Pearson相关性分析。结果与正常对照者相比,CHB患者外周血NK细胞和NKT细胞比例明显降低;NKG2A阳性的NK细胞和NKT细胞明显升高;经PMA、BFA、ionomycin刺激后,IFN-γ阳性的NK细胞和NKT细胞明显降低。结论 CHB患者NK、NKT细胞存在不同程度的减少、受体表达失调和细胞因子分泌功能下降等功能紊乱。 吴韶飞 李曼 孙学华 周振华 朱晓骏 张鑫 高月求关键词:慢性乙型肝炎 NK细胞 NKT细胞 受体 细胞因子 刀豆蛋白A通过ERK信号分子对小鼠脾脏细胞表达纤维化蛋白的诱导作用 被引量:1 2013年 目的:探讨刀豆蛋白A(Con A)对小鼠脾脏细胞表达纤维化蛋白(FBRS)的诱导作用及可能的分子信号机制。方法:选择雄性BALB/c小鼠,制备小鼠脾脏细胞悬液。采用实时荧光定量PCR检测Con A刺激不同时间脾脏细胞后FBRS的mRNA表达水平,Western blot检测Con A刺激不同时间后FBRS的蛋白表达水平,以及信号通路阻滞剂对FBRS的蛋白表达的影响和Con A对胞外信号调节激酶(ERK)信号表达的活化作用。结果:Con A能刺激小鼠脾脏细胞FBRS的mRNA和蛋白表达,ERK信号通路阻断剂PD98059可以明显抑制Con A引起的FBRS蛋白表达,且Con A刺激后能够明显活化ERK的表达。结论:Con A可通过活化ERK信号通路,诱导小鼠脾脏细胞FBRS的表达。 曾震军 何峥 李曼 孙学华 周振华 朱晓骏 张鑫 高亚婷 高月求关键词:刀豆蛋白A 信号调节激酶 CCR5在慢性乙型肝炎中的研究进展 被引量:3 2015年 趋化因子受体5( CCR5)是一类趋化因子受体,它之所以现在受到世界医学界的日益关注,主要由于十几年前它作为HIV的辅助受体之一[1], CCR5基因编码区32 bp片段的缺失(即CCR5Δ32)导致其不表达在 T 细胞表面,从而能够阻止 HIV 感染[2]。研究发现CCR5作为一个免疫反应的调节因子受体主要通过调节炎症[3],调整免疫细胞的运动及其功能而发挥重要作用[4-8]。 CCR5及其配体能够吸引效应T细胞进入肝脏并且调节炎性细胞分泌的炎性细胞因子如IFN-γ和细胞表面分子FasL等,这就为研究T细胞介导的肝脏炎症性疾病,如自身免疫性肝炎( AIH)以及HCV、HBV等引起的病毒性肝病提供了可能的治疗靶点和方向[9,10]。本文主要针对CCR5在慢乙肝研究领域中的一些研究进展进行阐述。 乔兵 孙学华 张鑫 周振华 李曼 高月求关键词:CCR5 慢性乙型肝炎 趋化因子受体5 细胞表面分子 炎症性疾病 基因编码区