国家高技术研究发展计划(2004AA243011)
- 作品数：6 被引量：32H指数：4
- 相关作者：王栋朱化彬程金华郝海生王振玲更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所中国农业大学北京农业职业学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 哺乳动物精子性别特异膜蛋白的研究进展被引量：1
- 2006年
- 在精子形成过程中,存在性染色体特异基因的表达,这是X、Y精子膜蛋白差异形成的基础。尽管精子形成过程中形成的细胞间桥可能使精子细胞间共享基因表达产物,但雄性传递偏移现象和性别偏移现象的发生又证明两类精子间存在非共享蛋白,同时H-Y抗原表位的成功鉴定、精子分离实验结果以及性别特异蛋白的检测结果都肯定了精子膜蛋白差异的存在,只是这种膜蛋白的差异很小。蛋白分离技术的进步及技术间的优化集成,为精子间细微差异膜蛋白的分离提供了可能。
- 王栋王振铃程金华朱化彬郝海生刘永华
- 关键词：精子基因表达
- 我国体细胞克隆牛的研究进展被引量：5
- 2006年
- 近年来,由于体细胞克隆技术在畜牧业生产、疾病治疗、生物学基础理论研究及濒危动物保护等诸多领域所蕴藏的巨大应用价值,克隆效率成为科学界研究的热点问题。对克隆技术的相关影响因素进行了综述,研究表明,不同细胞系影响到体细胞克隆牛效率,胎儿细胞和颗粒细胞重构胚的囊胚发育率、犊牛成活率比成年成纤维细胞高。关于卵母细胞和克隆胚胎冷冻保存的研究表明,玻璃化冷冻法可以用于克隆胚胎以及卵母细胞的冷冻保存。在此基础上,讨论了国际上哺乳动物体细胞克隆研究新进展和体细胞克隆的效率,指出体细胞克隆中亟待解决的问题。
- 程金华朱化彬戴蕴平孙秀柱王栋郝海生
- 关键词：体细胞克隆核移植
- 鲁西黄牛体细胞克隆保种技术的研究被引量：1
- 2006年
- 以体外培养的鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞作核供体,研究利用体细胞克隆技术保存我国地方黄牛优良品种的技术方法。通过组织块培养法建立的鲁西黄牛(1♂,4♀)成纤维细胞系,作为核移植供体细胞,利用屠宰场母牛卵巢卵母细胞经体外培养成熟后作为核受体进行核移植,试验结果表明:重构胚的融合率为62.5%(242/387),分裂率为63.6%(154/242),体外培养第7天囊胚发育率为42.9%(66/154)。体外培养第7天的囊胚的内细胞团细胞(ICM)与滋养层细胞数平均为37和47,ICM占44.2%。体外发育到7 d的囊胚新鲜胚胎的移植妊娠率(新鲜胚胎)移植受体10头,60 d妊娠率为20%(2/10)。
- 朱化彬程金华孙秀柱王栋戴蕴平龚国春万荣郝海生
- 关键词：鲁西黄牛成纤维细胞系体细胞克隆
- 二维电泳分离牛精子蛋白技术被引量：12
- 2006年
- 二维电泳是蛋白质分离技术并可用于对精子蛋白的分离。旨在通过对双向电泳条件的研究摸索出一种适用于分离牛精子蛋白的二维电泳技术，并利用其对牛精子蛋白进行分离鉴定。在实验中，优化了等电聚焦程序，研究了精子蛋白的不同制备方法、不同上样量、不同胶条长度对电泳结果的影响。结果表明，采用尿素-盐酸胍两步裂解法裂解精子细胞制备蛋白，使用13cm非线性胶条进行蛋白二维电泳，能获得较好的电泳图谱。图谱经二维电泳软件分析，可检测出约800多个蛋白质点，分子量基本分布在10～100kDa、等电点约为4～9的区域内。对精子蛋白二维电泳条件的摸索，为后续牛精子X、Y差异蛋白的检测和分析奠定了理论基础。
- 王振玲王栋朱化彬程金华李玉冰郝海生杜卫华沙里金
- 关键词：精子二维电泳
- 牛早期胚胎性别快速鉴别的研究被引量：9
- 2005年
- 根据聚合酶链式反应中聚合酶的扩增特性,对PCR反应的循环参数进行研究,取消了PCR反应中延伸这1温度梯度,对2温度梯度PCR方法进行了单重PCR和多重PCR扩增研究,并采用2温度梯度多重PCR方法分别对牛基因组、成纤维细胞、胚胎样品进行了性别鉴别研究,建立了稳定、简便、快速的用于牛早期胚胎性别鉴别的2温度梯度PCR方法。同时还对2温度梯度PCR的扩增能力进行了研究,结果表明:2温度梯度PCR方法能够扩增片段的可能长度为633 bp。
- 朱化彬王栋程金华郝海生王宗礼杨波王振玲
- 关键词：性别鉴别PCR胚胎
- 两温度梯度多重PCR鉴别牛早期胚胎性别的技术被引量：9
- 2006年
- 稳定、可靠和快速的牛胚胎性别鉴定方法在生产应用中具有重要意义。通过两温度梯度PCR方法对牛基因组、克隆胚胎、胚胎样品进行性别鉴别实验研究,建立了稳定、简便、快速的牛早期胚胎性别鉴别两温度梯度PCR方法,鉴定时间仅为57分钟。采用两温度梯度PCR方法对30枚奶牛胚胎进行了早期性别鉴别,并将鉴别的15枚胚胎(11枚为雌性,4枚为雄性)移植到同期处理的15头受体母牛体内。60天后妊娠检查,有7个受体成功受孕,5头受体怀孕晚期流产,流产犊牛全部为母犊。结果产下1公1母两头犊牛,流产个体与出生个体的性别与PCR鉴别结果完全相符。
- 王栋程金华朱化彬郝海生王宗礼杨波王振玲杜卫华刘永华张营霞
- 关键词：性别鉴别胚胎
