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2010年云南PRRSV分离株ORF5基因的遗传变异分析: 2013年; 为了了解云南猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传变异情况及其与猪繁殖与呼吸综合征的分子流行病学关系,对2010年分离到的10个云南PRRSV流行毒株进行了ORF5基因序列的测定与分析。结果显示云南分离株与中国大陆首次分离株CH-1a,北美代表株VR-2332和欧洲型代表株LV之间的核苷酸同源性分别为93.2%～94.2%,87.4%～89.6%和62.5%～64.0%;氨基酸同源性为90.0～91.5%,87.1～88.6%和51.7～57.7%。遗传进化分析显示,云南10株分离株属于美洲型,并分为两个基因亚型。与传统毒株相比,云南分离株ORF5基因及其推导的氨基酸的变异主要以点突变为主,但关键氨基酸位点未见明显改变,表明目前云南省所流行的PRRSV仍以经典毒株为主。研究结果为云南猪繁殖与呼吸综合征的控制提供了依据。; 高利波李文贵舒相华杨贵树杨金凤白卫兵尹革芬; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ORF5基因

山羊源伪狂犬病病毒的分离与鉴定被引量：7: 2016年; 为确诊一例发病山羊是否感染伪狂犬病病毒,采集发病羊体的肺脏和脑组织进行伪狂犬病病毒gE基因PCR检测,并将病料接种至PK-15细胞分离病毒,以及进行小鼠感染试验和gD基因分析。结果表明,PCR检测结果 PRV阳性,病料接种PK-15细胞24h后,细胞开始出现细胞病变;将病毒感染小鼠,36h后小鼠出现局部奇痒、死亡;gD基因序列分析发现,分离毒株与GenBank中的PRV gD基因序列同源性均在98%以上,氨基酸同源性在99%以上;在分离毒株gD基因的808bp^837bp位置上存在缺失与变异、高变重复区。本研究成功分离获得一株羊源伪狂犬病毒,为云南省羊伪狂犬病防控和基础研究提供资料。; 朱玲云张正学郑龙龙刘萍丹毕峻龙赵谦刘佳杨贵树尹革芬; 关键词：伪狂犬病病毒 PCR鉴定 PK-15细胞基因分析山羊

天然中草药提取物抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性研究被引量：16: 2013年; 为研究天然中草药对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的抗病毒活性,本研究以体外细胞培养体系为模型,在采用CCK-8法测定青黛(Indigo naturalis)、花椒(Zanthoxylum bungeanum)、卫矛(Euonymus ala-tus)和沉香(Aquilaria agallocha Roxb.)4种中草药提取物对细胞的半数毒性浓度(TC50)及最大无毒浓度(TC0)基础上,通过观察细胞病变效应(CPE),实时荧光定量RT-PCR方法检测病毒核蛋白基因(ORF7)mRNA表达量的变化,对天然中草药提取物抑制PRRSV增殖能力进行评价。实验结果分析显示:青黛、花椒、卫矛和沉香4种不同提取物的药物抗病毒选择指数(SI)分别为10.3,5.2,12.7,6。实时荧光检测病毒基因mRNA表达量变化结果表明:这4种天然中草药提取物在一定浓度范围内均能显著(P<0.05)抑制病毒NP蛋白基因(ORF7)的表达。本次研究结果证实,4种受试中草药提取物对PRRSV的增殖均具有显著(P<0.05)的抑制效果,以卫矛提取物的效果最佳。; 贺晶晶代飞燕李文贵毕峻龙白卫兵杨贵树尹革芬; 关键词：中草药提取物猪繁殖与呼吸综合征病毒抗病毒活性

中草药复方制剂对禽新城疫及禽流感H_5亚型免疫抗体水平的影响被引量：2: 2014年; [目的]探讨中草药复方制剂对禽新城疫及禽流感H5亚型免疫抗体水平的影响。[方法]通过测定中草药复方饲料添加剂对免疫禽新城疫及禽流感疫苗的鸡血清抗体水平,评价天然中草药饲料添加剂的使用价值,筛选最佳剂量。[结果]复方制剂I号和复方制剂Ⅱ号均能显著提高新城疫、禽流感的免疫抗体水平(P<0.05),其中复方制剂I号效果优于复方制剂Ⅱ号(P<0.05)。复方制剂I号能够有效延长新城疫、禽流感免疫抗体消长水平,其中中等剂量组(0.50 ml/kg)效果最佳。[结论]该研究可为中草药复方饲料添加剂的开发为提供一定的理论依据。; 杨斌朱玲云唐丽华郑龙龙段天才朱云安毕峻龙; 关键词：中草药复方制剂禽流感H5亚型抗体水平

蜡梅枝叶化学成分及其抗病毒活性被引量：14: 2012年; 利用各种色谱技术从蜡梅枝叶中共分离得到10个化合物,通过波谱学方法将其鉴定为(+)-Calycan-thine(1)、(-)-Folicanthine(2)、(-)-Chimonanthine(3)、异秦皮啶(4)、3,3'-双异秦皮啶(5)、Euoniside(6)、山奈酚-3-O-芸香糖苷(7)、3,4-二羟基苯乙腈(8)、Di-O-methylcrenatin(9)和Acanthoside B(10)。化合物4～10为首次从该植物中发现。采用细胞病变效应法测试了化合物1～5与8对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制活性,化合物2(IC50=58.9±10.2μM;TI=19.3)、3(IC50=68.9±3.1μM;TI=17.9)与8(IC50=80.5±16.9μM;TI>19.9)显示出了弱的抑制活性。; 史琳婧杨世仙毕峻龙尹革芬王跃虎; 关键词：蜡梅科蜡梅生物碱猪繁殖与呼吸综合征病毒

曲靖地区仔猪腹泻细菌性病原的分离鉴定与耐药性分析被引量：18: 2015年; 为了解曲靖地区仔猪出现腹泻的细菌性病因,对5个养殖场148份出现仔猪腹泻症状的样品进行细菌分离培养及耐药性分析,结果显示,检出致病性大肠杆菌(E.coli)114份,阳性率为77.03%;沙门氏菌(Salmonella)26份,阳性率为17.57%,混合感染率为17.57%。致病性大肠杆菌和沙门氏菌对多种抗生素产生了耐药性,其中114株致病性大肠杆菌中97株呈多重耐药性,占总菌数的85.09%,26株沙门氏菌中20株呈多重耐药性,占总菌数的76.92%。结果表明,致病性大肠杆菌是导致当地哺乳仔猪腹泻的主要细菌性病原,部分仔猪继发感染沙门氏菌,两种细菌对多种抗生素产生了耐药性,多重耐药现象较严重。; 朱玲云郑龙龙毕峻龙冯朝相杨贵树白卫兵; 关键词：仔猪腹泻大肠杆菌沙门氏菌耐药性

断奶仔猪腹泻病因分析被引量：22: 2015年; 为了解云南省断奶仔猪腹泻的致病性原因,通过对30个发生断奶仔猪腹泻猪场的210份粪便、60份饮用水,总计270份样品,进行病毒及致病性细菌分析。研究结果表明,致病性大肠杆菌严重污染饮用水,致病性大肠杆菌在饮用水中检出40株,阳性率为66.7%,粪便中检出100株,阳性率47.6%;致病性沙门氏菌在饮用水中检出10株,阳性率为16.7%,粪便中检出24株,阳性率为11.4%,均对亚胺培南敏感。在粪便中猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）、猪圆环病毒2型（porcine circovirous type 2,PCV2）、猪伪狂犬病病毒（pseudorabies virus,PRV）、猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）及猪轮状病毒（porcine rotavirus,PoRV）的PCR扩增阳性率为5.2%~13.0%,在饮用水中未检出。通过对云南省断奶仔猪腹泻进行病因分析,了解断奶仔猪腹泻的具体原因,本试验结果为从病因入手防制该病提供更合理、更切合实际情况的理论依据与试验参考。; 郑龙龙朱玲云陈关雄刘萍丹唐宁赵德育刘佳杨贵树白卫兵; 关键词：断奶仔猪腹泻病毒性腹泻细菌性腹泻肠毒素

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国家自然科学基金(31160509)