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基于UPLC-Q-TOF MS代谢组学技术筛选表征奶牛产后异食癖的候选生物标识物被引量：5: 2020年; 旨在筛选表征奶牛产后异食沙土的生物标志物。本试验共采集29份产后15~22 d血浆样品,根据奶牛产后有无异食沙土现象,结合血钙浓度进行分组,其中13头产后有异食现象的奶牛血浆样品为试验组,16头健康奶牛血浆样品为对照组,采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF MS)代谢组学技术探讨2组血浆代谢轮廓和代谢物的变化趋势。主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)结果显示,试验组代谢轮廓较对照组发生明显变化,正、负离子下共筛选出28种差异代谢物,其中21种代谢物水平显著降低(P<0.05),7种代谢物水平显著升高(P<0.05);ROC曲线进一步考察这些差异代谢物对分类的识别能力,结果显示仅有11种代谢物对2组血浆具有显著的区分能力。综上表明,乙酰肉碱、DL-苯丙氨酸、2-八烯酸、辛酸、癸酸、D-泛醇、NG,NG-二甲基-L-精氨酸(ADMA)、雄烯二酮、脯氨酸-酪氨酸、异亮氨酸-丝氨酸、精氨酸-缬氨酸可作为表征奶牛产后是否有异食现象的潜在生物标志物,为研究奶牛产后异食沙土的预防提供新的方法和思路。; 罗芳刘国林张萌陶金忠; 关键词：产后奶牛 MS 代谢组学生物标志物异食癖

荷斯坦奶牛产后期血浆差异蛋白质组学研究被引量：1: 2017年; 为了检测和分析荷斯坦奶牛分娩后不同时期血浆中的差异蛋白。采用二维凝胶电泳(2-DE)分离血浆蛋白,考马斯亮蓝染色,PDQuest8.0软件检测分析差异蛋白点,MADIL-TOF-TOF串联质谱鉴定差异蛋白点。结果发现3种差异蛋白,分别是结合珠蛋白、免疫球蛋白γ2链C区和3,5-二碘水杨酸络合的牛血清白蛋白。对3种蛋白在产后不同时期的趋势进行分析,可能分别与产后应激、免疫应答和物质运输有关。荷斯坦奶牛产后不同时期血浆中蛋白表达存在差异,对差异表达蛋白的研究有利于探索奶牛产后生理机制,可作为产后饲养、配种及防止产后感染等研究的基础。; 刘姗姗陶金忠赵国顺赵兴绪杨永新; 关键词：荷斯坦奶牛产后期血浆蛋白质组

‘荷斯坦奶牛’产后期乳汁差异蛋白质组学研究: 2016年; 【目的】为了比较‘荷斯坦奶牛’产后期乳汁中蛋白质组表达的差异.【方法】应用双向电泳(2-DE)技术构建荷斯坦奶牛分娩当天,分娩后7d,分娩后15d,分娩后28d和分娩后35d乳汁二维凝胶电泳图谱,凝胶经考马斯亮蓝染色后,以3倍以上的表达变化用PDQuest 8.0分析.【结果】在这5个不同的时期共发现了8种差异蛋白,经MADIL-TOF-TOF串联质谱法分析发现这8种蛋白分别是:α-S2酪蛋白前体、β-酪蛋白、κ-酪蛋白前体、免疫球蛋白重链前体、白蛋白、血清白蛋白前体、cGMP磷酸二酯酶的α亚基、角蛋白I型细胞骨架10.【结论】根据这几种蛋白质的已有文献研究和蛋白含量在不同时期的变化趋势,表明这些蛋白可能与初乳的被动免疫、物质运输和泌乳有关.; 刘姗姗陶金忠赵国顺赵兴绪杨永新; 关键词：荷斯坦奶牛产后期乳汁蛋白质组

荷斯坦奶牛妊娠早期血浆差异蛋白质组学研究: 2015年; 采用二维凝胶电泳(2-DE)结合MADIL-TOF-TOF串联质谱法对荷斯坦奶牛妊娠早期血浆进行蛋白质组学分析鉴定,发现了6种差异蛋白在妊娠后表达量上调,分别是凝集素1前体、转甲状腺素蛋白前体、3,5-二碘水杨酸络合的牛血清白蛋白的晶体结构的A链、白蛋白、未命名蛋白产物及结合珠蛋白-25同源物1前体。对这6种蛋白在不同时期含量的变化趋势及可能引起每种蛋白含量变化的原因和在妊娠过程中的功能进行了分析。; 刘姗姗陶金忠武小虎赵国顺杨永新赵兴绪; 关键词：荷斯坦奶牛妊娠血浆蛋白组

奶牛定时人工授精后第5天注射hCG对妊娠率的影响: 2020年; 在奶牛定时人工授精后早期肌肉注射hCG,以期提高奶牛妊娠率。随机选择489头人工授精后的健康荷斯坦奶牛,定时人工授精后第5天1次肌注2000 IU hCG作为试验组,定时人工授精后不做处理奶牛作为对照组。使用B超于人工授精后32 d进行妊娠检测。结果显示:注射hCG组牛妊娠率极显著高于对照组(P<0.01),且提高了37.29%;对照组返情率极显著高于hCG组(P<0.01)。综上说明奶牛定时人工授精后第5天肌注hCG能显著提高其妊娠率。; 张萌高俊国罗芳王俊奎陈丽尧和东迁张巧娥陶金忠; 关键词：奶牛 HCG 妊娠率

奶牛妊娠黄体蛋白组学研究: 2017年; 为了研究奶牛黄体的形成及退化过程的相关机理,并进一步探究更加准确的妊娠及相关生理过程的蛋白标记物,试验采用蛋白质组学经典的二维凝胶电泳(2-DE)技术检测和分析妊娠前后黄体组织间的差异蛋白,使用PDQuest8.0软件检测,取差异蛋白点进行分析,并经MALDI TOF/TOFMS/MS检测。结果表明:6种差异蛋白分别为26s蛋白酶体蛋白、纤维蛋白、DNA拓扑异构酶蛋白、核纤层蛋白、硫氧还原蛋白、微管蛋白。对这6种蛋白在组织间的表达差异进行分析,发现这些蛋白可能与黄体形成和黄体退化及黄体激素分泌有关。; 陈信陶金忠杨佐青马瑞华; 关键词：卵巢双向电泳蛋白组学

奶牛黄体囊肿的蛋白质组学研究被引量：1: 2017年; 为了研究奶牛黄体囊肿的发病机理及发病时的生物学标记物,利用蛋白质组学经典的双向电泳(2-DE)技术,检测和分析奶牛黄体囊肿组织和正常黄体组织间的差异蛋白,通过考马斯亮蓝染色后用PDQuest8.0软件检测并分析差异蛋白点。经MALDI TOF/TOF-MS/MS串联质谱鉴定,共发现6种差异表达的蛋白,分别为:α-1-酸性糖蛋白(AGP),胶质纤维酸性蛋白(GFAP),核磷蛋白(NPM),泛素羧基末端水解酶(UCH),牛血清白蛋白晶体结构A链(Chain A),丝氨酸蛋白酶抑制蛋白A3-5(serpin A3-5)。其中,AGP、GFAP、serpin A3-5、NPM和UCH在囊肿组织中高表达,Chain A只在正常组织中表达。通过分析这些蛋白在组织间的表达差异,发现其可能与黄体囊肿的发生和囊肿发生后激素分泌异常有关。黄体囊肿差异蛋白的发现为奶牛黄体囊肿临床诊断及发生机理的研究提供了科学依据。; 陈信陶金忠武乾明; 关键词：卵巢黄体囊肿双向电泳蛋白组学

奶牛产后血浆^1H-NMR代谢组学分析被引量：7: 2016年; 为了从代谢组角度系统揭示奶牛分娩后能量缺乏的生理机制,采用1 H-NMR代谢组学技术,结合多元统计学方法探讨了奶牛分娩后不同阶段血浆小分子代谢物的变化趋势及其对能量代谢通路的影响。结果表明:奶牛分娩后第7天与分娩第1天之间血浆代谢轮廓无明显差异;分娩后第14天与第1天之间血浆代谢轮廓出现明显差异,其差异标志物为不饱和脂肪酸、胆碱和氧化三甲胺;分娩后第28天与第1天之间血浆代谢轮廓也存在明显差异,其差异标志物为不饱和脂肪酸、胆碱、氧化三甲胺、三羧酸和葡萄糖;随着分娩后时间的延长,不饱和脂肪酸、胆碱和三羧酸表达逐渐上调,而氧化三甲胺和葡萄糖表达逐渐下调。可见,随着奶牛分娩后泌乳量的不断增加,逐渐呈现出能量负平衡状态,而机体应答性的上调了脂肪分解、脂肪酸氧化、胆碱氧化、蛋氨酸再甲基化和甲基代谢途径以缓解奶牛分娩后的能量负平衡状态。研究结果可为进一步阐明奶牛分娩后能量负平衡的生理机制提供科学依据。; 陶金忠郭延生; 关键词：奶牛围产期能量负平衡代谢组学

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国家自然科学基金(31160523)

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