国家自然科学基金(39970274)
- 作品数：14 被引量：251H指数：10
- 相关作者：温进坤韩梅李琦刘智敏郑斌更多>>
- 相关机构：河北医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河北省自然科学基金国家攀登计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 益气健脾中药对血管平滑肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响被引量：20
- 2001年
- 目的 :探讨益气健脾中药血清体外诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用及其分子机制。方法 :采用缺口末端标记 (terminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTPnickedlabeling ,TUNEL)分析、透射电镜、流式细胞仪分析、DNA电泳分析检测细胞凋亡 ;应用Northern印迹检测bcl 2、c myc和 p5 3基因表达活性。结果 :经中药血清处理的血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecell,VSMC) ,可出现典型的凋亡特征 ,DNA电泳呈梯状图谱 ;流式细胞仪分析显示G0 /G1期细胞阻滞现象 ,亚二倍体凋亡细胞增多 ,出现典型的凋亡峰 ,细胞凋亡率与中药血清浓度具有量效关系。杂交结果提示 ,30 %中药血清可抑制抗凋亡基因bcl 2的表达 ,上调促凋亡基因c myc和 p5 3mRNA水平。 结论 :益气健脾中药通过影响凋亡相关基因bcl 2、c myc和p5
- 柴锡庆温进坤韩梅
- 关键词：益气健脾血清药理学血管平滑肌细胞凋亡
- 血管再狭窄发生过程中SMα肌动蛋白和SMemb基因表达的变化及其影响机制研究被引量：25
- 2000年
- 为研究血管再狭窄发生过程中 VSMC表型转化的规律及机制 ,采用大鼠主动脉内皮剥脱后血管再狭窄动物模型和体外培养的 VSMC,通过 Northern印迹分析及 3H- Td R参入实验 ,动态观察血管再狭窄发生过程中 VSMC表型标志基因α肌动蛋白和 SMemb的表达变化及 b FGF、TNF-α和 IL - 1β对两种基因表达的影响及其与 VSMC增殖之间的关系 .结果表明 ,血管内皮剥脱后 3d,分化型标志基因α肌动蛋白表达活性开始降低 ,去分化型标志基因 SMemb表达明显上调 ,至第 7d,前者的下调与后者的上调均达到最大 ,此后 ,两者的表达活性趋于向正常恢复 .b FGF可明显下调 α肌动蛋白的表达和诱导 SMemb表达 ,对分化型和去分化型 VSMC均有促增殖作用 ,但对后者的作用大于前者 ,TNF- α和 IL- 1 β对 VSMC的促转化及促增殖作用较弱 .提示 b FGF等生长因子介导血管内皮损伤所诱发的 VSMC表型转化并促进其增殖 ,内皮损伤 7d后 ,在发生表型转化并进行增殖的 VSMC中 ,一部分细胞再分化 ,一部分细胞仍处于去分化状态并继续进行增殖并持续较长时间 .
- 李琦温进坤韩梅
- 关键词：球囊损伤血管再狭窄平滑肌细胞表型转化
- 滋补肝肾益气活血法治疗肾性高血压的实验研究被引量：22
- 2001年
- 目的 探讨滋补肝肾益气活血方药治疗高血压的分子机制。方法 采用 Northern印迹分析、RT- PCR检测中药对高血压大鼠动脉壁 i NOS、c- myc和 ET基因表达的影响 ,应用放免分析和比色法测定血浆 ET水平和 NO含量。结果 高血压大鼠经中药治疗 2 0 d后 ,血压显著下降(P<0 .0 5) ,血浆 ET水平明显降低 (P<0 .0 5) ,NO含量升高 (P<0 .0 5) ,二者分别与高血压成正、反相关关系 ;显著抑制高血压大鼠动脉壁 c- myc和ET基因表达活性 ,促进 i NOS基因表达。结论 滋补肝肾益气活血方药可在转录水平上调节 c- myc、i NOS和 ET基因的表达活性 ,通过调整
- 韩梅温进坤
- 关键词：肾性高血压诱导型一氧化氮合酶内皮素中医药疗法
- 黄芪、当归对血管内皮剥脱后内膜增生的影响及作用机制被引量：25
- 2003年
- 目的 研究黄芪和当归防治血管内皮剥脱后再狭窄与血管平滑肌细胞 (VSMC)表型转化之间的关系。方法 建立大鼠主动脉内皮剥脱模型 ,分别采用形态学和 Northern印迹分析技术 ,观察大鼠血管内皮剥脱后内膜增生情况及 VSMC表型标志基因 SMα-肌动蛋白、平滑肌胚胎型肌球蛋白重链 (SMemb)表达活性。结果 术后 7d模型组内膜明显增生 ,1 4～ 2 1 d内膜呈进行性弥漫性增厚。与模型组相比 ,两种中药治疗组的内膜增生程度均明显减轻 ;分化标志 SMα-肌动蛋白基因表达增高 ,去分化标志 SMemb表达降低。结论 黄芪和当归通过抑制 VSMC表型转化而减缓血管内膜增生。
- 李琦温进坤韩梅
- 关键词：当归内膜增生血管平滑肌细胞血管再狭窄
- 反义c-jun对血管平滑肌细胞表型标志基因表达的影响被引量：1
- 2001年
- 李琦韩梅温进坤
- 关键词：心血管疾病病理基因表达
- 反义c-jun表达质粒对血管平滑肌细胞表型转化标志的影响被引量：9
- 2001年
- 为研究c jun反义RNA对血管平滑肌细胞表型转化的影响 ,本文应用可表达c jun反义RNA的真核细胞表达载体转染大鼠血管平滑肌细胞 ,采用Northern印迹、Western印迹和氚标胸腺嘧啶核苷掺入实验 ,观察反义c jun对血管平滑肌细胞表型标志基因平滑肌α 肌动蛋白、平滑肌胚胎型肌球蛋白重链和骨桥蛋白表达和DNA合成的影响。结果发现 ,在血管平滑肌细胞中表达的c jun反义RNA可使血管平滑肌细胞去分化标志基因平滑肌胚胎型肌球蛋白重链和骨桥蛋白mRNA表达较对照分别下降 5 0 %和 95 % ,骨桥蛋白水平较对照下降 75 % ,同时血管平滑肌细胞的DNA合成受到显著抑制 ,实验组氚标胸腺嘧啶核苷掺入值较对照降低 37%。c jun反义RNA对血管平滑肌细胞分化标志基因平滑肌α 肌动蛋白的表达无明显影响。提示c jun基因表达产物在维持血管平滑肌细胞于去分化状态中起重要作用。
- 李琦温进坤韩梅
- 关键词：反义核苷酸表型血管平滑肌骨桥蛋白
- 血管平滑肌细胞表型调节机制的研究进展被引量：42
- 2003年
- 血管平滑肌细胞 (VSMC)的增殖和迁移是动脉粥样硬化斑块形成、高血压和血管再狭窄的共同病理特征 ,而VSMC表型转化是VSMC增殖和迁移的基础 ,研究VSMC表型调节的分子机制 ,对上述疾病的防治具有重要意义。本文对VSMC表型转化的影响因素。
- 李琦温进坤郑斌
- 关键词：血管平滑肌细胞转录因子信号转导
- 外源E2F和CArG顺式元件对血管平滑肌细胞表型相关基因表达的影响被引量：10
- 2001年
- 利用转录因子“诱骗”策略 ,阻断血管平滑肌细胞 (VSMC)表型特异基因和增殖相关基因的反式激活 ,揭示VSMC表型转化和增殖之间的关系 .电泳迁移率改变分析结果表明 ,相当于分化型VSMC特异表达基因共有顺式元件CArG和细胞增殖相关基因共有顺式元件E2F的双股寡核苷酸(ODNs)可分别与从分化型和去分化型VSMC中提取的核蛋白特异性结合 ,形成DNA 蛋白质复合物 .Northern杂交结果显示 ,导入VSMC中的CArGODN可使平滑肌α肌动蛋白 (α actin)表达活性降低 ,肌丝数量减少 ,明显抑制转染细胞的再分化过程 .去分化型VSMC被E2FODN转染后 ,增殖相关基因c myc表达受到抑制 ,细胞增殖速率减慢 ,去分化表型特征减弱 .结果提示 ,E2F和CArG调控元件分别对VSMC增殖和分化起重要调节作用 ,并证实VSMC表型转化与增殖是两个密切相关但不完全相同的细胞事件 .
- 韩梅温进坤
- 关键词：表型转化血管平滑肌细胞VSMC
- 粘着斑激酶在一氧化氮诱导血管平滑肌细胞凋亡中的作用被引量：6
- 2002年
- 为研究一氧化氮对血管平滑肌细胞凋亡的影响及粘着斑激酶在一氧化氮诱导血管平滑肌细胞凋亡中的作用 ,应用脂多糖诱导血管平滑肌细胞合成内源性一氧化氮或加入可释放外源性一氧化氮的硝普钠 ,进行流式细胞术、DNA凝胶电泳及Northernblot和Westernblot分析。结果发现 ,无论是血管平滑肌细胞合成和释放的内源性一氧化氮还是体外补充的外源性一氧化氮均可显著诱导血管平滑肌细胞凋亡 ,且其诱导血管平滑肌细胞凋亡的强度与培养基中的NO-2 含量呈正相关 ;证实在一氧化氮诱导血管平滑肌细胞凋亡的同时 ,伴随Bcl 2和粘着斑激酶基因表达活性的明显下降。提示粘着斑激酶可能参与一氧化氮诱导血管平滑肌细胞凋亡的信号转导过程 ,一氧化氮诱导血管平滑肌细胞凋亡可能与抑制Bcl
- 杨长春温进坤韩梅
- 关键词：粘着斑激酶一氧化氮细胞凋亡NORTHERNBLOTWESTERNBLOT血管平滑肌细胞
- 基质金属蛋白酶与血管壁细胞外基质重建被引量：21
- 2002年
- 细胞外基质(ECM)不仅维持血管壁的完整性,而且还为血管细胞传递增殖、迁移、分化和凋亡的调控信号;基质金属蛋白酶(MMP)及其内源性抑制剂(TIMP)通过调节ECM合成与降解之间的动态平衡,使ECM维持正常的结构与功能。在高血压、动脉粥样硬化和血管再狭窄的发生与发展过程中,MMP和TIMP的合成与分泌出现异常,由此所引起的ECM合成与降解失调使ECM迅速发生重建。
- 温进坤韩梅
- 关键词：基质金属蛋白酶血管壁心血管疾病
