国家自然科学基金(30800283)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
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- 丹参酮ⅡA抑制电离辐射诱导胶质BV-2细胞激活的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨丹参酮ⅡA能否抑制电离辐射诱导小胶质细胞激活及其机制.方法 用1.0μg/ml丹参酮ⅡA处理小胶质细胞12 h,体外接受137Cs γ射线照射2、4、8、16和32 Gy后,用实时PCR检测致炎因子的变化,Western blot检测NF-κB p65表达的变化,免疫荧光染色及共聚焦显微镜检测γ-H2AX和p65的表达变化.结果 16和32 Gy照射后小胶质细胞激活,形态学上从静息状态下的小胞体多突起转变为放疗后胞体变圆和突起皱缩,并释放致炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6、IFN-γ和COX-2与对照组相比,分别上调（5.0±0.60）、（2.1±0.20）、（2.4±0.25）、（1.6±0.30）和（3.6±0.50）倍（P＜0.05）.丹参酮ⅡA能明显减少致炎细胞因子IL-1β、IL-6、IFN-γ和COX-2的释放,与对照组相比,分别为（2.3±0.10）、（1.8±0.20）、（0.3±0.30）、（0.2±0.10）（t=5.56,P＜0.05）.Western blot分析提示,接受8和16 Gy电离辐射后,NF-κB的亚单位p65在细胞核的表达显著增加,而使用丹参酮ⅡA后可以减低电离辐射后p65在细胞核的表达;免疫荧光染色提示在未照射组p65表达于细胞质,电离辐射后p65转位至细胞核,而使用丹参酮ⅡA后可以抑制电离辐射后p65的核转位,使其表达于细胞质.结论 电离辐射后迅速引起一系列的分子内信号传导,通过DNA双链断裂（DSB）触发信号传导激活NF-κB信号通路;丹参酮ⅡA可以抑制电离辐射后NF-κB信号通路下调致炎因子表达,从而抑制小胶质细胞激活.
- 董晓荣董继华张瑞光范丽刘莉张涛伍钢
- 关键词：电离辐射DNA双链断裂炎性反应
- Corilagin对小鼠小胶质细胞株照射后炎性反应因子表达的抑制作用
- 2010年
- 目的 研究抗炎药物Corilagin抑制放射引起小胶质细胞（BV-2）炎性反应的作用及其防护的分子机制.方法 细胞抑制实验（MTT）检测Corilagin对BV-2细胞的抑制率;Corilagin预处理小胶质细胞,12 h后,以0和32 Gy 2个放射剂量照射BV-2细胞,Real-time PCR检测小胶质细胞照射后不同时间点炎性反应因子IL-1β、TNF-α表达水平;硝酸还原酶法检测细胞上清液中一氧化氮（NO）的含量;Western blot检测各组细胞核转录因子NF-κB p65蛋白表达;激光共聚焦显微镜观察各组细胞标志物Iba-1的表达、NF-κB p65核转位及Nemo的表达.结果 1～10μg/ml浓度范围内Corilagin对BV-2细胞增殖几乎无影响;照射后小胶质细胞表面标志物Iba-1表达明显,提示小胶质细胞激活,且炎性反应因子NO、TNF-α、IL-1β表达上调,而Corilagin（5μg/ml）可以显著抑制上述炎性反应因子的表达（tIL-1β=6.341,tTNF-α=3.411,tNO=3.134,P＜0.05）;Corilagin可抑制NF-κB活化蛋白Nemo,并显著抑制NF-κB p65的转位.结论 Corilagin可能通过NF-κB信号转导途径抑制照射后小胶质细胞的活化,从而下调炎性反应因子表达,保护神经元.
- 罗鸣伍钢范丽张瑞光任精华董继华董晓荣
- 关键词：CORILAGIN小胶质细胞NF-ΚB放射性脑损伤
- 电离辐射抑制海马区神经发生与放射性脑损伤认知损害的关系被引量：8
- 2013年
- 目的 研究放疗后海马区神经发生与小鼠放射性脑损伤认知损害的关系.方法 10 d龄C57BL/6J小鼠24只给予10 Gy 6MV X射线全脑照射,Morris水迷宫实验检测放射性脑损伤模型的建立.在照射后不同时间点（0.5、3、6、12、24、48、72 h,1、2、4、8、16、24周）,取脑组织标本进行HE染色,观察海马区神经细胞的病理变化.免疫组织化学染色双皮质蛋白（DCX）、增殖细胞核抗原（PCNA）标记海马区神经发生水平,ED1标记小胶质细胞激活情况,TUNEL标记海马区神经细胞凋亡情况.采用Real-time PCR法检测脑组织TNF-α、IL-1β表达水平的变化；酶联免疫吸附法（ELISA）检测照射后不同时间点血浆TNF-α水平的变化.结果 照射后急性期表现为间质水肿,炎性细胞浸润,海马区齿状回神经细胞逐渐出现变性、坏死、凋亡,慢性期间质水肿消退,炎性细胞减少,海马齿状回出现细胞再生呈极性分布.受照后各时间点,DCX阳性细胞和PCNA阳性细胞较对照组均有不同程度减少（F =4.9 ～12.5,5.2～15.7,P＜0.05）,受照后ED1阳性细胞较对照组增多（F=20.8,P＜0.05）.TUNEL标记凋亡神经元在放疗后6h可见,于48 h达到峰值（F=15.1,P＜0.05）；照射后0.5h,γ-H2AX焦点形成达到高峰（F=18.4,P＜0.05）,后逐渐减少.照射后脑组织TNF-α和IL-1β表达较对照组均有所增加（t=16.3、12.7,P＜0.05）；血浆TNF-α照射后3h开始升高,至1周达到峰值（F=10.5,P＜0.05）,随后逐渐降低.Morris水迷宫实验照射组和对照组相比,照后1、2、3d两者差异无统计学意义,但随着时间的延长,4、5、6d照射组躲避潜伏期较对照组延长（F=7.01、8.17、4.22,P＜0.05）.结论 10 Gy全脑照射后,建立放射性脑损伤模型,发现海马区神经发生受到抑制和小胶质细胞激活可能是小鼠放射性脑损伤认知损害产生的原因之一.
- 黄国栋罗鸣屈晓飞程彦磊蔡茜董晓荣伍钢
- 关键词：放射性脑损伤海马神经发生小胶质细胞炎性反应
- γ-H2AX分析电离辐射诱发小鼠神经元DNA双链断裂及修复
- 2009年
- 目的观察临床剂量的电离辐射后小鼠神经元DNA双链的断裂及修复，探讨γ-H2AX是否能作为衡量体内正常脑组织神经元DNA双链断裂（DSB）形成和修复的指标。方法电离辐射诱导DSB形成试验，C57BL／6小鼠行0．1、0．5和1．0Gy全身照射后10min，收集脑组织进行分析；DSB修复试验，修复功能正常小鼠（C57BL／6）和修复缺陷鼠（BALB／c，A—T和SCID）在全身照射2Gy后0．5、2．5、5、24和48h收集脑组织进行分析。未照射的小鼠作为对照组。γ-H2AX和NeuN免疫荧光双重染色和免疫组织化学染色分析脑组织神经元DSB形成和修复。结果DSB形成试验，在对照组脑组织皮质区神经元的细胞核内仅有数目很少的γ-H2AX焦点，而受照射后细胞核内γ-H2AX焦点数目显著增加，并显示出明显的剂量相关。通过分析不同放射敏感性的小鼠电离辐射后脑组织皮质区神经元的DSB修复动力学，发现C57BL／6小鼠细胞核内γ-H2AX焦点随时间的延长迅速减少，在照射后24和48h仅有很低水平DSB未修复；而免疫缺陷SCID鼠在照射后所有的时间点都显示出γ-H2AX焦点的明显增加，A—T小鼠表现出较低的修复缺陷，主要表现在较晚的时间点（≥5h）γ-H2AX焦点的中度增加；放射敏感的BALB／c小鼠与C57BL／6小鼠相比γ-H2AX焦点数量轻度增加。结论γ-H2AX焦点分析可以作为一项精确的量化指标，在体内衡量临床相关剂量电离辐射诱导的DSB形成和修复。
- 董晓荣Ruebe ClaudiaRuebe Christian伍钢
- 关键词：Γ-H2AXDNA双链断裂
- 参芪扶正注射液对放射性脑损伤保护的分子机制探讨被引量：6
- 2015年
- 目的 研究参芪扶正注射液对于放疗引起脑损伤保护的分子机制.方法 将6～8周龄C57BL/6J小鼠按随机数字表法随机分成3组：空白对照组：不做任何处理;单纯照射组：全脑照射20 Gy;照射加药组：全脑20 Gy照射后参芪扶正注射液（20 mg/kg）治疗4周;水迷宫检测参芪扶正注射液对放射性脑损伤后小鼠认知功能的影响;Real-time PCR检测急性脑损伤后炎性因子TNF-α与IL-1β表达情况;免疫荧光检测急性放射性脑损伤后海马区的小胶质细胞的激活水平;免疫荧光检测各组NF-κB p65的胞质胞核表达水平.结果 Morris水迷宫显示,参芪扶正注射液可以改善小鼠放射性脑损伤后的认知功能障碍（t=6.34、6.70,P＜0.05）;PCR显示照射后TNF-α在3h表达最高,随后下降,在4周又达到较高水平,参芪扶正注射液治疗下调TNF-α表达水平（t=11.34、9.70、6.07,P＜0.05）;IL-1β在照射后表达水平逐渐升高,在72 h达到较高水平,其后开始下降,而参芪扶正注射液可以降低照射后IL-1β表达水平（t=12.27、5.70、7.52,P＜0.05）;免疫荧光显示参芪扶正注射液能够抑制海马区小胶质细胞激活（t=12.35、8.64、7.82,P＜0.05）;小胶质细胞p65免疫荧光显示参芪扶正注射液照射后NF-κB p65胞质、胞核的转位.结论 参芪扶正注射液可能通过抑制NF-κB p65的胞质、胞核转位,抑制小胶质细胞的激活,从而下调炎性因子的表达,起到治疗放射性脑损伤的作用.
- 张健张瑞光蔡茜陈玲娟董继华伍钢董晓荣
- 关键词：参芪扶正注射液急性放射性脑损伤炎性因子小胶质细胞激活
