国家自然科学基金(81071403)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：程文余平张宁洁张丽娜陈凡更多>>
- 相关机构：中南大学长治医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 沙眼衣原体感染诱导小鼠生殖道局部促炎性细胞因子的表达情况被引量：2
- 2013年
- 建立小鼠生殖道沙眼衣原体感染模型,观察小鼠生殖道局部促炎性细胞因子的表达。将小鼠生物型沙眼衣原体C. muridarum 1＆#215;104 IFU阴道接种于C57B6背景雌性小鼠,取感染后阴道拭子做沙眼衣原体培养,计算IFU,监测小鼠感染和病原体清除情况；80 d后处死小鼠,检测子宫输卵管病理改变；ELISA检测感染过程中小鼠生殖道促炎性细胞因子IL-1α、IL-6、MIP-2和TNF-α产生情况。小鼠感染在第3至第15天维持较高水平,然后病原体被逐渐清除,整个病程约3~5周；病理检测显示子宫输卵有严重炎症、管腔扩张积水,狭窄等；于感染后第3天检测到局部IL-1α、IL-6、MIP-2分泌,第7天达高峰,然后逐渐下降至正常水平（ IL-6于11 d恢复正常,IL-1α和 MIP-2于15 d恢复正常）。 TNF-α仅在第7天检测到高水平表达。相对于TNF-α和IL-6,IL-1α和MIP-2维持时间较长。成功建立沙眼衣原体感染小鼠生殖道模型,沙眼衣原体急性感染可诱导小鼠生殖道局部分泌IL-1α、IL-6、MIP-2和TNF-α。
- 陈凡张宁洁余平程文
- 关键词：沙眼衣原体生殖道感染促炎性细胞因子
- 沙眼衣原体初次和再次感染小鼠生殖道的初步研究(英文)被引量：1
- 2013年
- 目的观察小鼠初次和再次生殖道感染沙眼衣原体后对病原体的清除情况,抗体产生规律及病理表现。方法将小鼠生物型沙眼衣原体C.muridarum1×104IFU阴道接种于C57B6背景雌性小鼠,分别取初次和再次感染后阴道拭子做沙眼衣原体培养,计算IFU,监测小鼠清除病原体情况;同时取小鼠尾静脉血,监测初次和再次感染后抗体产生情况;处死小鼠,检测子宫输卵管病理改变。结果初次感染,小鼠生殖道感染病原体多,病程长,再次感染病原体明显减少,病程明显缩短;小鼠于初次感染2周后检测到抗体,之后迅速升高并维持在较高水平,再次感染后抗体维持高水平无明显改变;小鼠子宫输卵有明显病理改变,表现为炎症、官腔扩张积水,狭窄等。结论成功建立沙眼衣原体初次再次感染小鼠生殖道模型,再次感染抗体水平无明显升高,但能有效控制感染,清除病原体,对炎症反应无明显改善。
- 霍治余平程文
- 关键词：沙眼衣原体生殖道感染小鼠模型
- 靶向白介素-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系的构建
- 2013年
- 目的:构建针对IL-1α基因的shRNA表达载体,筛选能够抑制Hela229细胞内源性IL-1α表达的shRNA,建立无内源性IL-1α表达的Hela229稳定细胞系。方法:根据shRNA的设计原则,以IL-1αcDNA oligo为模板设计一段21 bp核苷酸目标序列,构建成siRNA的DNA模板并克隆到shRNA表达载体pRNAT-U6.1/Neo中,获得靶向抑制IL-1α基因的重组shRNA质粒,转染Hela229细胞,经G418筛选后获得单克隆稳定细胞株,用ELISA方法在蛋白水平上检测IL-1α基因的沉默效果。结果:经酶切鉴定和测序分析确定IL-1α-shRNA重组质粒构建正确,ELISA筛选出能够显著抑制内源性IL-1α表达的shRNA,获得沉默内源性IL-1α表达的单克隆稳定的Hela229细胞株。结论:靶向IL-1α基因的重组shRNA表达质粒可显著抑制Hela229细胞内源性IL-1α的表达,成功构建靶向IL-1α基因沉默的Hela229稳定细胞系。
- 张宁洁张丽娜李伟林琳高劲松程文余平
- 关键词：IL-1ΑHELA229细胞SHRNA
- ELISA检测IL-1α的实验优化研究被引量：1
- 2012年
- 目的:研究酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素1(IL-1α)的最佳试验条件,用优化配制的TMB/HRP显色体系最大程度降低成本,可适用于多数ELISA测定。方法:以前期优化方案为基础,进一步对抗体包被时间、包被温度、显色液配制等条件的优化,检测IL-1α标准品OD值并进行结果比较。结果:抗体包被于室温24h,最优显色体系为按四甲基联苯胺(TMB)终浓度0.1mg/mL和0.03%H2O2配制,可获得最佳IL-1α定量结果。结论:用优化后的ELISA方法测定IL-1α的敏感性、重复性及标准曲线拟合度更佳,具有良好的应用前景。
- 张丽娜余平程文
- 关键词：IL-1Α试验条件
