国家高技术研究发展计划(2006AA02A208)
- 作品数：3 被引量：4H指数：1
- 相关作者：邹全明毛旭虎丁红雷张怡潘竞更多>>
- 相关机构：第三军医大学西南大学江苏出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 幽门螺杆菌cagT蛋白的表达、纯化及免疫原性研究被引量：4
- 2010年
- 为了解析cagT蛋白的结构,进而了解cagT基因在幽门螺杆菌致病中的作用,应用PCR技术从幽门螺杆菌26695菌株基因组中扩增cagT基因,T/A法克隆,连接至pET-28a(+)载体,转化宿主细胞E.coliBL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法纯化目的蛋白,免疫家兔制备抗体并鉴定其抗原性.成功克隆cagT基因,重组cagT基因片段的测序结果与GenBank上公布的序列相同.重组cagT蛋白以可溶和包涵体两种形式表达,免疫家兔所得的抗体滴度为1∶32.结果构建了高效表达cagT蛋白的重组载体pET-28a(+)-cagT,表达的蛋白具有良好的免疫原性,为后续的结构和功能研究奠定了基础.
- 丁红雷潘竞张卫军张怡罗萍解庆华毛旭虎邹全明
- 关键词：幽门螺杆菌基因克隆
- cagT——幽门螺杆菌cag致病岛的“底座”
- 2009年
- 毒素相关基因致病岛(cagPAI)是幽门螺杆菌的一个IV型分泌系统,由28～30个蛋白质组成。cagT是cagPAI的一个重要结构蛋白,位于cagPAI针尖状结构的基底部,作为此IV型分泌系统的"底座",与cagY蛋白一起构成了cagPAI的结构框架。将cagT基因敲除,则cagPAI结构消失,阻断了效应分子cagA进入宿主上皮细胞和IL-8的分泌。cagT还可与其他cagPAI蛋白质相互作用,协同转运cagA进入宿主细胞,引起宿主细胞的损伤。
- 丁红雷陈思琪毛旭虎邹全明
- 关键词：幽门螺杆菌结构蛋白
- 空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因的克隆表达
- 2011年
- 目的克隆空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建其原核表达载体,诱导表达及纯化蛋白,为基因工程疫苗的研制打下基础。方法扩增空肠弯曲菌penner o:19 cjaA基因,构建pGEM-T-cjaA克隆载体,以EcoRI和XhoI为酶切位点构建pGEX-4T-1-cjaA原核表达载体。表达载体转化E.coli BL21后诱导表达,SDS-PAGE鉴定表达产物,用Glutathione Sepharose4B纯化重组蛋白。结果成功构建pGEX-4T-1-cjaA表达载体,并获得浓度为10μg/μl的rGST-CjaA重组蛋白。结论成功构建pGEM-T-cjaA克隆载体及pGEX-4T-1-cjaA表达载体,获得重组蛋白rGST-CjaA,为研究空肠弯曲菌疫苗打下基础。
- 邢丛丛李震中白欣立徐飞简朔李鑫赵子春高爱民薛峰
- 关键词：空肠弯曲菌原核表达蛋白纯化
