国家自然科学基金(30670794)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：钟延丰王盛兰郑丹枫张燕牛群丽更多>>
- 相关机构：北京大学解放军白求恩国际和平医院北京大学第三医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- Schwann细胞髓鞘特异性基因异常表达与脱髓鞘性周围神经疾病病理改变的相关性研究
- 目的对慢性脱髓鞘性周围神经疾病病人的神经活检标本,分别采集形成髓鞘施万细胞(MSC)和非形成髓鞘施万细胞(nMSC),进行髓鞘特异性基因(MAG、MBP、PMP22)的检测,对照光镜及电镜观察,探讨其基因表达改变与形态学...
- 郑丹枫钟延丰张燕王盛兰王薇牛群丽王雷明檀艳丽
- 关键词：SCHWANN细胞激光捕获显微切割荧光定量PCR
- 文献传递
- TNF-α和IFN-γ影响许旺细胞生长及髓鞘相关糖蛋白mRNA表达水平的研究
- 2009年
- 目的研究肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和干扰素-γ(IFN-γ)对体外培养的许旺细胞(SCs)生长和髓鞘相关糖蛋白(MAG)mRNA表达水平的影响。方法建立许旺细胞与神经细胞(NCs)联合培养模型,绘制许旺细胞生长曲线,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TNF-α和INF-γ对MAGmRNA表达水平的影响。结果许旺细胞培养液中加入TNF-α和IFN-γ后,许旺细咆增殖数目明显增加且高于单纯许旺细胞培养组(q=7.476,P=0.000;q=6.631,P=0.000);而TNF-α组与IFN-γ组之间差异无统计学意义(q=0.846,P=0.411)。无神经细胞存在时,许旺细胞不表达MAG mRNA;经神经细胞诱导后,许旺细胞MAC mRNA表达阳性,且具有时间性;加入TNF-α和IFN-γ后,许旺细胞MAG mRNA表达水平明显升高,且高于单纯许旺细胞与神经细胞共培养组(q=8.128,P=0.000;q=6.614,P=0.000),而加人TNF-α和IFN-γ的许旺细胞与神经细胞共培养组之间差异无统计学意义(q=1.515,P=0.156)。结论 TNF-α和IFN-γ具有促进许旺细胞增殖作用,且可提高髓鞘特异性基因MAG mRNA表达水平。提示,这两种炎性干扰因子可通过影响许旺细胞及MAC mRNA表达水平而间接影响髓鞘修复,为研究炎性脱髓鞘性神经疾病慢性期髓鞘修复障碍的发病机制提供了新的思路。
- 郭笑磊钟延丰胡洪涛谢志刚由江峰王盛兰王薇
- 关键词：许旺细胞髓磷脂相关糖蛋白肿瘤坏死因子Α逆转录聚合酶链反应
- 胰岛素样生长因子-1对共培养的神经细胞和施万细胞超微结构的影响被引量：2
- 2016年
- 目的分析胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)对体外培养的神经细胞和施万细胞超微结构的影响。方法建立VSC4.1大鼠神经细胞与RSC96大鼠施万细胞共培养模型:将VSC4.1神经细胞与RSC96施万细胞共同培养,通过改善培养条件,使之共同生长。经相差显微镜观察,确定共培养的两种细胞可发生相互作用。透射电镜观察单独培养的神经细胞、施万细胞及共培养时细胞超微结构的变化。观察IGF-1的影响:实验分为共培养对照组和IGF-1组(20 ng/ml)。培养5天后,收集细胞进行扫描电镜和透射电镜观察。结果透射电镜观察单独培养的神经细胞及施万细胞均可见不同的分化状态,其超微结构各异。透射电镜结果:与对照组相比,IGF-1组中细胞表面绒毛状或指状突起明显增多且联系紧密。扫描电镜结果:对照组与IGF-1组中均可见RSC96细胞包绕轴突形成髓鞘(可称之为成髓的施万细胞)。对照组中所有的细胞表面均比较平滑,绒毛样突起不明显。IGF-1组的细胞表面不再光滑,神经细胞和未成髓的施万细胞表面呈明显的绒毛样突起,而包裹轴突的成髓施万细胞表面主要呈片层状突起。结论 IGF-1可引起VSC4.1神经细胞和RSC96施万细胞超微结构及表面形态的改变。这或许是引起其功能改变的外在表现形式。
- 牛群丽钟延丰王盛兰郑丹枫刘爽
- 关键词：IGF-1共培养超微结构
- 骨骼肌活组织检查病理诊断技术的改进及应用被引量：6
- 2009年
- 目的:对300例骨骼肌活组织检查(活检)标本进行组织学切片和染色,总结分析技术方法的操作过程和改进,重点探讨各种肌酶及非酶组织化学染色技术在神经肌肉病诊断中的应用选择和价值。方法:将标本经异戊烷-液氮速冻后进行冰冻切片,应用HE及Gomori三色(GMR)、糖原(PAS)、脂肪(油红O)等特殊染色,肌球蛋白三磷酸腺苷酶(ATP酶)、还原型辅酶Ⅰ四唑氮还原酶(NADH-TR)等酶组织化学染色,并对各种染色技术进行调整和改进。结果:标本经异戊烷-液氮速冻及恒冷切片,可以有效避免产生冰晶。GMR染色主要显示线粒体及肌纤维变性坏死的病变,油红O染色显示肌纤维内有无脂质增多,PAS染色主要显示糖原和糖蛋白。对于肌肉组织,应用冰冻切片优于石蜡切片。NADH-TR及ATP酶染色可以区分两型肌纤维,并可观察肌纤维内部结构及线粒体酶的变化等。结论:通过骨骼肌酶与非酶组织化学染色技术,可以清晰地显示出两型肌纤维的分布情况及各种特征性的病理改变,几种方法可互为补充。
- 张燕韩志慧钟延丰王盛兰李玲玲郑丹枫
- 关键词：活组织检查冷冻超薄切片术免疫组织化学
- 髓鞘特异蛋白PMP22和MBP在腓肠神经活检标本中表达差异及其意义被引量：1
- 2010年
- 目的探讨周围髓鞘蛋白22(peripheral myelin protein 22,PMP22)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic pro-tein,MBP)在周围神经活检标本中的表达差异及其诊断意义。方法收集35例成人腓肠神经活检标本,进行抗PMP22、MBP免疫组织化学染色,对其灰度值做定量分析,并与相应的光镜和电镜下组织学形态进行比较分析。结果 PMP22和MBP的表达部位并不完全相同;PMP22表达水平与有髓纤维髓鞘的残存数目、完整程度及无髓纤维-Schwann细胞单位的数量、功能状态等多个因素相关;MBP表达水平主要与残存的有髓纤维的数量和髓鞘脱失的程度相关;两者的表达具有一定的相关性,但PMP22更多反映Schwann细胞状态,而MBP反映有髓纤维髓鞘的状态。结论周围神经活检中PMP22和MBP的检测有助于判断受损髓鞘的神经纤维分布以及Schwann细胞的功能状态,可考虑作为周围神经活检诊断的常规检测。
- 唐璐张俊孙阿萍张燕王盛兰樊东升钟延丰
- 关键词：SCHWANN细胞腓肠神经活检
- 永生化施万细胞和神经细胞建立体外共培养模型及神经细胞对髓鞘特异性基因表达的影响被引量：1
- 2011年
- 目的通过体外共培养永生化施万细胞株RSC96细胞和神经细胞株VSC4.1细胞,建立施万-神经细胞共培养模型,观察髓鞘化过程中神经细胞对细胞增殖和髓鞘特异性基因MBP、PMP22表达的影响。方法建立施万细胞和神经细胞共培养模型:本研究选用RSC96和VSC4.1细胞进行共同培养。实验分为3组:单独培养的RSC96细胞组(RSC96组)、VSC4.1细胞组(VSC4.1组)、共培养组。免疫荧光染色对细胞进行鉴定。经光镜及电子显微镜观察,确定共培养的两种细胞可发生相互作用。利用MTT法检测细胞增殖情况。RT-PCR方法检测髓鞘特异性基因MBP、PMP22的表达。结果 RSC96细胞包绕VSC4.1细胞的轴突形成髓鞘。MTT示:RSC96细胞增殖速度明显快于VSC4.1细胞。但当两种细胞共培养时,细胞的增殖速度与单独的RSC96细胞相比,明显下降。在单独培养的RSC96细胞中,PMP22基因的表达有先增高后降低的现象。在共培养模型中,PMP22基因的表达是逐渐增高的。在前2d的表达量低于单独培养的RSC96细胞。单独培养的RSC96细胞及共培养组细胞在前3d均无MBP的表达。结论永生化施万细胞株RSC96细胞和神经细胞株VSC4.1细胞可以建立施万-神经细胞共培养模型。神经细胞可以调控施万细胞的增殖速度与髓鞘特异性基因的表达模式。
- 牛群丽钟延丰由江峰王盛兰郑丹枫张燕
- 关键词：共培养
- 腓骨肌萎缩症1A型基因重复的分子遗传学研究
- 目的探讨腓骨肌萎缩症(Charcot-Marie-Tooth)1A型(CMT1A)基因重复的分子遗传学特点。方法选用位于17p11.2-p12的短串联重复序列(STR)D17S2217、D17S2218、D17S2220...
- 王雷明钟延丰刘小璇
- 文献传递
