国家自然科学基金(81071458)
- 作品数:6 被引量:18H指数:3
- 相关作者:卢世璧郭全义汪爱媛彭江张莉更多>>
- 相关机构:中国人民解放军总医院山西医科大学佳木斯大学附属第一医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 膝关节骨软骨损伤的治疗策略被引量:5
- 2014年
- 目的综述膝关节骨软骨损伤的治疗现状。方法广泛查阅近年国内外与膝关节骨软骨损伤治疗相关的文献,并进行总结分析。结果骨软骨损伤同时损害关节软骨和底层的软骨下骨,不同病因引起的骨软骨损伤病变的治疗方法不同,主要包括临床传统治疗方法和组织工程策略。目前临床治疗效果仍不确切,采用组织工程技术可再生骨、软骨及骨-软骨界面,有效恢复软骨及软骨下骨的正常功能和力学特性。结论骨软骨损伤的治疗仍是骨科巨大挑战,其治疗策略应将软骨及软骨下骨作为不可分割的复合功能单元综合研究,为骨软骨损伤的治疗提供最佳解决方案。
- 王永成袁雪凌汪爱媛彭江卢世璧
- 关键词:骨软骨损伤关节软骨软骨下骨
- 细胞因子和生长因子在人脐带Wharton胶间质干细胞的表达谱被引量:1
- 2013年
- 目的观察细胞因子和生长因子在人脐带Wharton胶间质干细胞(WMSCs)的表达,了解其生物学特性,为其临床应用提供实验依据。方法取人足月妊娠新生儿脐带,分离MSCs,应用成纤维细胞集落形成实验验证其干细胞特性,流式细胞术鉴定其表面分了特性,蛋白芯片方法观察细胞因子和生长因子的表达。结果所检测的79种因子除白介素(IL)-13表达痕量外,其他均表达于WMSCs,表达从多到少(OD值〉0.800)依次为IL-8、生长相关癌基因(GRO)、IL-6、IL-1β、IL-1α和GRO—α;它表达6种免疫抑制功能的因子和肿瘤生长抑制因子,这对减少MSCs用于异体移植时的免疫排斥及瘤变的可能性起一定作用,而其表达的金属蛋白酶抑制因子TIMP-1、TIMP-2将对其应用于作内移植时起到保护自身的作用;多种神经生长因子(脑源性神经生长因子、神经生长素-3、神经生长素-4、胶质细胞源性神经生长因子)的表达表明WMSCs易于血神经细胞诱导分化。结论 人脐带WMSCs踢十扶得,表达的细胞因子有利于其应用于异体移植,减少免疫排斥及恶变,并保护其自身在体内分化生长.是一个很有前景的新型种子细胞,可应用于再生医学及构建组织工程组织或器官。
- 许文静侯克东袁玫张莉彭江刘舒云郭全义卢世璧
- 关键词:脐带细胞因子类
- 自体脂肪间充质干细胞复合人脐带Wharton胶支架修复兔膝关节软骨缺损被引量:6
- 2012年
- 背景:脐带Wharton胶富含透明质酸,糖胺多糖及胶原等,成分与天然软骨细胞外基质类似,因此由人脐带提取的Wharton胶很可能是一种较为理想的软骨组织工程支架材料。目的:评价自体脂肪间充质干细胞复合人脐带Wharton胶支架修复兔膝关节软骨缺损的效果。方法:将终浓度为1010L-1、成软骨方向诱导后的兔自体脂肪间充质干细胞与人脐带Wharton胶支架复合,继续培养1周构建组织工程软骨,对兔膝关节全层软骨缺损进行修复(实验组),并与单纯支架修复的对照组及空白组进行比较。术后3个月对修复组织行大体观察、组织学检测、糖胺多糖、总胶原定量检测及生物力学测定。结果与结论:实验组的缺损多为透明软骨修复,对照组以纤维组织修复为主,空白组无明显组织修复。提示脂肪间充质干细胞作为软骨组织工程种子细胞具有可行性;实验构建的组织工程软骨能有效的修复关节软骨缺损,人脐带Wharton胶可作为软骨组织工程良好的支架材料。
- 韩爽卢世璧刘强张莉黄靖香汪爱媛刘舒云赵斌许文静郭全义
- 关键词:脂肪间充质干细胞软骨缺损
- 兔骨软骨缺损自发性修复模型中软骨下骨重塑与软骨再生的关系被引量:2
- 2014年
- 目的探讨兔骨软骨缺损自发性修复模型中软骨下骨重塑与关节软骨再生之间的关系。方法取6月龄健康新西兰大白兔24只,于单侧股骨髁间关节面制造直径4mm、深3mm的骨软骨缺损,不作任何处理,于术后1、4、12、24周分别处死实验动物取材,行大体、组织学及免疫组织化学染色观察,根据国际软骨修复协会(ICRS)组织学评分标准进行评分,micro-CT扫描重建分析软骨下骨组织形态计量学参数,评估软骨修复效果以及与软骨下骨重塑的相关性。结果骨软骨损伤可自发性修复,随时间推移,缺损区逐渐被修复组织填充平整,缺损区内软骨下骨板逐渐向上迁移,骨矿物质密度、骨体积分数、组织矿化密度、骨小梁数量、骨小梁厚度均逐渐增加,而骨小梁间隙宽度逐渐下降,除骨小梁厚度4、12周间比较差异无统计学意义(P〉0.05)外,其余各指标各时间点间比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。组织学表现为纤维性修复为主,透明软骨少见;随时间推移,术后标本ICRS组织学评分逐渐增加,除4、12周间比较差异无统计学意义(P〉0.05)外,其余各时间点间比较差异均有统计学意义(P〈0.05)。软骨下骨组织形态计量学参数中,除骨小梁间隙宽度与ICRS组织学评分成负相关(r=0.584,P=0.039)外,其余各参数均与其成正相关(r=0.680~0.891)。结论兔骨软骨缺损自发性修复模型中,软骨下骨重塑与软骨再生既密切相关又独立发生,软骨下骨的快速重塑可能对关节软骨修复效果有负面影响。
- 王永成孟昊业袁雪凌彭江郭全义卢世璧汪爱媛
- 关键词:骨软骨损伤关节软骨软骨下骨
- 体外模拟压应力三维动态培养构建组织工程软骨的实验研究被引量:2
- 2014年
- 目的通过体外模拟压应力刺激兔软骨细胞复合脱细胞软骨细胞外基质(extracellular matrix,ECM)源性三维多孔支架培养组织工程软骨,探讨生物反应器中三维动态培养对软骨生长的促进效应。方法取健康成年新西兰大白兔四肢关节软骨分离培养软骨细胞,将第2代细胞复合于脱细胞软骨ECM源性三维多孔支架,静态预培养5 d后随机分为2组,A组继续静态培养,B组于生物反应器中进行动态压应力加载(频率1 Hz,15%压缩应变)培养。3周后采用活-死细胞染色试剂盒检测细胞活性,扫描电镜观察细胞在支架上的生长及分布,定量检测支架中细胞的糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)、胶原蛋白及DNA含量,进行力学分析检测弹性模量。结果激光共聚焦显微镜观察示,B组支架内细胞生长良好且分布均匀;A组细胞生长较差,中心区域失染。扫描电镜观察示,B组软骨细胞在支架上黏附、增殖、生长良好;A组软骨细胞明显减少,且分布散乱。生化成分分析示,B组胶原蛋白、GAG及DNA含量分别为(675.85±27.93)μg/mg、(621.72±26.75)μg/mg、(16.98±3.23)μg/样本,A组分别为(438.72±6.35)μg/mg、(301.63±30.51)μg/mg、(10.18±4.39)μg/样本,B组各成分含量均明显高于A组(t=18.512,P=0.000;t=17.640,P=0.000;t=2.790,P=0.024)。力学性能测试示,B组弹性模量(0.67±0.09)MPa显著高于A组(0.49±0.16)MPa和空白支架(0.43±0.12)MPa差异有统计学意义(P<0.05)。结论生物反应器模拟压应力三维动态培养优于普通静态三维培养,可提供有利于软骨细胞在ECM支架中生长的最佳环境,是体外构建组织工程软骨的良好方法。
- 王永成孟昊业袁雪凌彭江郭全义卢世璧汪爱媛
- 关键词:组织工程软骨生物反应器
- 软骨细胞外基质对脐带Wharton胶间充质干细胞生物学性状的作用被引量:3
- 2013年
- [目的]探讨软骨细胞外基质微环境对源于人脐带Wharton胶的间充质干细胞增殖的影响,观察该微环境促进干细胞向软骨细胞方向分化的潜能。[方法]①取3%(w/v)猪关节软骨细胞外基质和2.4%(w/v)海藻酸盐为原料,按体积比1∶1的比例充分混合,将其用带16 G针头的1 ml注射器匀速滴入氯化钙溶液制作软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球,通过扫描电镜观察该微球内部结构。②将人脐带Wharton胶中间质干细胞(WJMSCs)混于软骨细胞外基质/海藻酸混合液,滴入氯化钙溶液形成复合干细胞的混合凝胶微球进行培养,设为实验组;同理WJMSCs混合于单纯藻酸盐凝胶并形成微球作为对照组。③通过扫描电镜和FDA-PI染色观察上述两组微球内细胞的生长粘附情况,体外培养4周,经组织学和DNA测定观察干细胞的表型及增殖情况。[结果]①构建的软骨细胞外基质/海藻酸盐混合凝胶微球呈半透明乳白色,内部具有较多不规则的孔隙结构,具有三维立体培养细胞的环境特点。②比较实验组和对照组不同细胞培养时间段细胞增殖量,发现实验组细胞增殖率高于对照组,第28 d时两组细胞DNA含量的差异有统计学意义,(P﹤0.05)。③实验组中细胞呈圆形或椭圆形,形成明显的软骨陷窝样的结构,有大量细胞外基质分泌,对照组中细胞呈圆形,陷窝样的结构不明显。④组织学染色观察发现:实验组中培养的干细胞明显有向软骨细胞方向分化的趋势。[结论]软骨细胞外基质微环境不仅利于人脐带Wharton胶中间质干细胞的增殖,而且具有将WJMSCs向软骨细胞方向诱导分化的潜能。
- 赵鹏刘舒云卢世璧杨建华袁玫张莉黄靖香赵斌眭翔许文静郭全义
- 关键词:藻酸盐软骨组织工程