国家自然科学基金(3060067730500483)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：王巍张立于萍关林波董丽群更多>>
- 相关机构：四川大学华西医院四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 噬菌体展示技术筛选MRC-5细胞上人巨细胞病毒的结合位点
- 2010年
- 目的以人巨细胞病毒(HCMV)感染的人胚肺成纤维细胞(MRC-5)为靶细胞,寻找参与HCMV识别并结合细胞的多肽区域,研究HCMV膜蛋白中哪些功能域参与细胞识别以及膜融合过程。方法以HCMV感染阳性的MRC-5细胞为液相筛选物,从随机七肽噬菌体展示库中筛选出能够与感染阳性MRC-5细胞特异性结合而与正常细胞不结合的噬菌体配体。通过ELISA分析亲和力、DNA测序、序列对比及理化性质分析多肽。结果初步发现EVNMSDS、NVSVFET和GQQPTTV3个肽段可能参与HCMV与宿主细胞的识别过程。同时通过同源比对分析还发现,这3个七肽与HCMVgB和gH蛋白存在共有序列。结论应用PHD7噬菌体随机肽库和生物信息学方法筛选出3个可能参与HCMV识别宿主细胞并进行膜融合的功能域,为进一步研究HCMV感染宿主细胞的具体机制提供新的思路以及为抗HCMV感染提供新的策略。
- 王巍张立于萍
- 关键词：噬菌体展示HCMV
- 原代人脐静脉内皮细胞的分离培养及其对人巨细胞病毒的易感性研究被引量：5
- 2010年
- 目的通过检测原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对人巨细胞病毒(HCMV)的易感性,探讨胎儿宫内感染HCMV的可能途径。方法无菌条件下取30例健康产妇正常娩出的胎盘端游离脐带,向脐静脉灌注0.1%胶原酶Ⅱ37℃消化15 min,通过对细胞的形态学观察和免疫荧光染色方法对细胞进行纯度鉴定;用HCMV病毒株体外感染HUVEC,通过对HCMV基因及蛋白检测确定HUVEC对HCMV的易感性。结果 0.1%胶原酶Ⅱ、15 min的消化方法对HUVEC有较好的分离效果,免疫荧光染色结果表明HUVEC细胞内有Ⅷ因子相关抗原表达;HCMV体外感染HUVEC 72 h后形态学有明显改变,病毒基因及蛋白均有阳性表达。结论原代HUEVC对HCMV易感,通过脐静脉的血液传播可能是胎儿宫内感染HCMV的重要途径之一。
- 董丽群周淑关林波王巍张立于萍
- 关键词：HCMV
