国家自然科学基金(81071439)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 青少年特发性脊柱侧凸骨髓间充质干细胞分离培养及体外诱导分化为脂肪细胞被引量：1
- 2012年
- 目的建立青少年特发性脊柱侧凸(adolescent idiopathic scoliosis,AIS)来源的骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)分离、培养、传代的方法,并观察其体外成脂诱导潜能,为后续的AIS来源MSCs诱导分化过程中基因表达差异的比较研究作准备。方法采用密度梯度离心法分离出MSCs后培养并传代,利用流式细胞仪检测MSCs细胞表面标记物,用含1μmol/L地塞米松、10 mg/L重组人胰岛素、0.5 mmol/L 1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、100μmol/L吲哚美辛的诱导培养基对传至第3代的MSCs进行成脂诱导,诱导至第14天行油红O染色鉴定。结果 AIS来源骨髓标本分离培养的细胞经流式细胞术鉴定均显示CD29、CD44、CD105为阳性,CD34、CD45为阴性,符合MSCs的表型特征;MSCs经成脂诱导后均可分化为脂肪细胞,油红O染色阳性,可见胞质内呈橘红色的大小不一脂滴。结论密度梯度离心法可成功分离出高纯度的AIS来源的MSCs,其在体外具有良好的成脂潜能。本研究结果可为后续的MSCs诱导分化过程中基因表达差异研究打下基础。
- 林翔杨军林邹学农苏培强黄紫房谢超凡王其飞
- 关键词：青少年特发性脊柱侧凸成脂分化
- 1例基因芯片筛选青少年特发性脊柱侧凸骨髓间充质干细胞成脂分化相关差异表达基因被引量：3
- 2013年
- [目的]应用基因芯片技术筛选青少年特发性脊柱侧凸(AIS)骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成脂分化相关的差异表达基因。[方法]收集AIS及同性别年龄正常对照骨髓标本,密度梯度离心法分离MSCs并培养传代,取第3代MSCs进行成脂诱导2周后,提取各标本的总RNA,反转录成cDNA,并以两种荧光Cy5和Cy3标记后作为探针与人类全基因组表达谱基因芯片杂交,扫描芯片荧光信号图像后用基因图像分析软件进行数字化处理和分析。[结果]筛选出显著表达差异基因1 380条,其中表达上调基因874条,表达下调基因506条。[结论]AIS来源MSCs成脂分化相关差异表达的1 380条基因可能参与了AIS的发生和发展。
- 林翔杨军林苏培强邹学农谢超凡王其飞黄紫房
- 关键词：青少年特发性脊柱侧凸骨髓间充质干细胞成脂分化基因芯片
- Thrsp蛋白在青少年特发性脊柱侧弯患者MSCs成脂分化过程中的差异性表达和作用被引量：2
- 2015年
- [目的]比较青少年特发性脊柱侧凸（AIS）患者与正常人骨髓间充质干细胞的成脂分化过程中基因表达的差异。[方法]收集本院脊柱侧弯中心2011年12月～2012年12月收治的AIS患者20例的骨髓血,同时采集10例年龄段性别接近的志愿者骨髓血作为对照组。采用密度梯度离心法提取MSC细胞,培养至P3流式细胞仪定性。诱导成脂分化14 d后提取全RNA进行Affymetrix 3＇IVT表达谱芯片检测。对主要检查结果进行RT-PCR验证,并且对结果中特异性高表达的Thrsp蛋白的表达情况进行Western blot检验。[结果]受试者骨髓血均成功采集分离,密度梯度离心分离MSCs并培养至P3,流式细胞仪验证其性质,成脂分化培养14 d后苏木红染色定性为脂肪细胞,提取全RNA电泳条带清晰,表达谱芯片检测结果显示AIS患者MSC在成脂分化过程中有111条基因表达上调,189条基因表达下调。Western blot检验结果显示Thrsp蛋白在脂肪细胞中高度表达。[结论]AIS来源MSCs成脂分化相关差异表达的300条基因可能参与了AIS的发生和发展,Thrsp基因可能是导致MSCs分化差异性的关键因素。
- 王其飞杨军林范恒伟黄紫房林翔谢超凡李佛保
- 关键词：青少年特发性脊柱侧凸成脂分化
- 应用基因芯片技术研究青少年特发性脊柱侧弯发病机制被引量：2
- 2017年
- [目的]应用基因芯片技术研究青少年特发性脊柱侧弯(AIS)来源的骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)成脂分化过程中差异表达基因,探究AIS的发病机制。[方法]分离培养AIS患儿及正常对照者BM-MSCs培养至第五代(P5),成脂诱导2周后利用基因芯片技术筛选差异表达基因,并利用RT-PCR技术验证芯片结果。[结果]在AIS及正常来源的BM-MSC成脂分化中共新发现229个基因存在显著差异表达。这些差异表达基因具有细胞粘附、转录调节及信号转导等多种功能。共新发现6条具有显著统计学意义的相关分子通路。[结论]AIS患儿BM-MSCs在成脂分化过程中的基因表达模式与正常对照相比存在明显差异。本研究新发现的差异表达基因及通路可能与AIS的发病相关,对其病因学研究具有重要意义,值得深入研究。
- 范恒伟郎传东王其飞黄紫房隋文渊李佛保杨军林
- 关键词：青少年特发性脊柱侧弯基因表达基因芯片成脂分化
- 椎体去旋转矫形技术对青少年特发性脊柱侧凸胸椎后凸减少的影响
- 2013年
- 青少年特发性脊柱侧凸（adolescentidiopathicscoliosis，AIS）是一种包括冠状面侧凸、矢状面后凸或前凸以及轴状面旋转的三维脊柱畸形，其中椎体轴向旋转是脊柱侧凸的重要组成部分．常继发胸廓扭转、凸侧背部肋骨隆起即“剃刀背”畸形．甚至心肺受压迫影响呼吸循环功能。椎体旋转畸形的矫正有助提高冠状面侧凸矫正率、减轻“剃刀背”及改善患儿的外观畸形’。
- 林翔杨军林
- 关键词：青少年特发性脊柱侧凸胸椎后凸矫形技术脊柱畸形呼吸循环功能冠状面
