国家重点基础研究发展计划(2011CB944404)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：张晓静陈巍杜崇涛杨勇军杜润蕾更多>>
- 相关机构：吉林大学武汉大学更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划长江学者和创新团队发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 金黄色葡萄球菌OatA基因敲除菌株及其回补菌株的构建被引量：4
- 2015年
- 目的:构建金黄色葡萄球菌(金葡菌)Oat A基因敲除菌株及其回补菌株。方法:以p BT2为载体,构建金葡菌Oat A基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经金葡菌RN4220修饰后电转入金葡菌USA300,利用p BT2载体对温度敏感的特点,在42℃多次传代,筛选出金葡菌Oat A基因敲除菌株。以p LI50为载体,构建p LI50-Oat A全基因回补质粒,电转入金葡菌RN4220,再次抽提后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因回补菌株p Oat A。结果:成功构建基因敲除质粒p BT2-△Oat A,经RN4220修饰电转入USA300,经PCR及测序鉴定,获得了金葡菌Oat A敲除菌株△Oat A。经PCR及酶切鉴定,确认p LI50-Oat A回补质粒构建成功,通过金葡菌RN4220修饰后电转入敲除菌株△Oat A,获得基因敲除回补菌株p Oat A。结论:成功构建金黄色葡萄球菌Oat A基因敲除菌株及其回补菌株,为进一步研究金葡菌Oat A的功能及其作用机制奠定基础。
- 张晓静冯世源杜崇涛杨勇军陈巍
- 关键词：金黄色葡萄球菌OAT同源重组基因敲除
- 人大肠癌细胞系HCT116中Sirt 1基因敲除细胞株的构建
- 2012年
- 目的利用AAV介导的体细胞基因敲除技术,在人大肠癌细胞系HCT116中对靶基因Sirt 1进行敲除,达到基因沉默的目的。方法构建Sirt1打靶载体,通过病毒包装、感染、药物筛选、PCR鉴定、Western blotting鉴定等步骤获得Sirt 1基因敲除的细胞株。结果经过筛选和鉴定后获得两个Sirt1-/-阳性克隆,成功构建HCT116 Sirt1-/-细胞系。结论通过体细胞敲除技术,我们成功地获得Sirt1敲除肠癌细胞株。
- 贾一帆张慧慧王卫星杜润蕾
- 关键词：同源重组SIRT
