天津市高等学校科技发展基金计划项目(20070202)
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 相关作者：杨新宇郇林春张奇杨树源赵旺淼更多>>
- 相关机构：天津医科大学总医院天津市人民医院中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：天津市高等学校科技发展基金计划项目天津市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Hes1在成年小鼠脑中表达的免疫组织化学分析被引量：8
- 2010年
- 背景:近年来的研究显示,在胚胎神经系统发育过程中,Hes1的表达调控对保持神经干细胞的数量、调控其分化至关重要。此外,成年个体内处于静止期的纤维母细胞重新获得分裂增殖的能力需要Hes1表达的上调。这表明Hes1在成体中也与某些潜在干细胞的增殖具有密切的关系。因此研究Hes1在成体神经干细胞中的表达及其与成体神经细胞生成的关系也就被提上日程。但Hes1在成年个体神经系统的表达至今未明。目的:观察和分析小鼠脑中不同部位Hes1的表达及Hes1阳性细胞的细胞类型。方法:12只成年雄性C57BL/6小鼠随机数字表法分为单染组和双染组,每组6只。单染组直接取材,采用免疫组织化学技术检测Hes1在小鼠脑中各部位的表达。双染组小鼠以200mg/kg Brdu的剂量每天腹腔注射1次,连续注射3d,第4天取材,采用双标记物染色观察分析海马区Hes1阳性细胞的细胞类型。结果与结论:在所有观察的解剖部位中,Hes1表达于所有存在神经细胞的部位,Brdu阳性细胞几乎全部表达Hes1,NeuN阳性细胞全部表达Hes1,而神经胶质原纤维酸性蛋白阳性细胞则完全不表达Hes1。由此可知,Hes1表达于神经细胞和神经干细胞中,胶质细胞不表达Hes1。
- 郇林春杨新宇赵旺淼赵岩赵杰张奇杨树源
- 关键词：海马HES1神经干细胞免疫组织化学小鼠
- 成年小鼠脑创伤后海马组织中Hes1的表达被引量：1
- 2010年
- 目的:观察和分析创伤性脑损伤后成年小鼠海马组织中Hes1的表达情况。方法:雄性C57BL/6小鼠66只,随机分为假手术(NC)组33只和创伤性脑创伤(TBI)组33只,通过单侧液压性损伤(FPI)的方法建立小鼠创伤性脑创伤模型。分别在成模后6h、1d、3d和7d通过颈椎脱臼处死小鼠,2组每个时间点各选取小鼠6只,采用实时荧光定量PCR检测海马中Hes1 mRNA的表达;创伤后3d,每组分别选取小鼠6只和3只分别用Western blot法和荧光免疫组织化学染色方法检测Hes1蛋白的表达情况。实时荧光定量PCR和Western blot均以GAPDH作为内参照。结果:TBI组所有标本中均检测到Hes1的表达。TBI组与相应的NC组海马组织中Hes1 mRNA的表达情况各时点比较差异均有统计学意义(P<0.05);TBI组创伤后3d海马的蛋白表达量与NC组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Hes1蛋白在NC组小鼠伤侧海马组织的细胞中广泛表达,而TBI组创伤后3d Hes1蛋白的表达量明显降低。结论:Hes1可能参与了神经发生过程,并在随后的损伤修复中起重要的作用。
- 张奇郇林春赵旺淼赵杰杨树源杨新宇
- 关键词：海马荧光免疫测定
- 重组腺病毒Ad5-mHes1的构建及其在小鼠海马组织中的表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建含小鼠Hes1基因的重组腺病毒（rAd）并观察其在小鼠海马组织中的表达情况．为进一步研究Hes1基因在成年小鼠神经再生中的作用奠定基础。方法利用限制酶对pEGFP—miles1质粒和pDC316质粒进行酶切，将获得的miles1目的基因片段和pDC316质粒酶切产物回收,在T4DNA连接酶作用下连接，形成pDC316-mHes1穿梭质粒，并用PCR法及EcoRI＋HindⅢ双酶切法对pDC316-miles1进行鉴定。利用AdMax包装系统，穿梭质粒pDC316-mHes1与骨架质粒pBHGlox_E1,3Cre共转染293细胞，同源重组产生复制缺陷型腺病毒Ad5-mHes1，其报告病毒是包含高强度绿色荧光蛋白（EGFP）的腺病毒Ad5-EGFP。向成年C57BL／6小鼠海马中立体定向注射Ad5-miles1及Ad5-EGFP，Western blotting检测注射后7d Hes1蛋白在海马中的表达情况，荧光显微镜观察EGFP在海马中的表达情况。结果用PCR法及EcoR I＋HindⅢ双酶切法对pDC316-miles1鉴定的实验结果与预期结果相符，经测序后其序列与miles1 CDS序列一致。注射后7d．Hesl蛋白在PBS注射组和Ad5-mHes1注射组海马组织中均有表达，其Hesl蛋白与GAPDH的比值分别为0．363±0．053和0．705±0．128，差异有统计学意义（P〈0．05）。荧光显微镜下在海马齿状回颗粒细胞层中观察到Ad5-EGFP表达的绿色荧光。结论本研究成功构建了Ad5-miles1表达载体系统，并在C57BL／6成年小鼠海马组织中表达了Hes1基因。
- 颜荣赵杰张奇张琳郇林春赵旺森杨树原张建宁杨新宇
- 关键词：重组腺病毒质粒海马齿状回
- 小干扰RNA在哺乳动物脑组织中的递送
- 2010年
- 背景:作为一种能够下调基因表达的新的基因治疗方法,RNA干扰在神经科学疾病的治疗中有很大的潜能。通过引入与内源靶基因具有相同序列的小干扰RNA,可以人为地诱导序列特异性的mRNA降解,达到阻止该基因表达的目的。目的:针对RNA干扰在神经科学疾病治疗方面的应用,探讨小干扰RNA在哺乳动物脑组织中的递送情况。方法:以"siRNA,delivery,brain"和"siRNA,delivery,vivo"为检索词,计算机检索PubMedhome,按纳入和排除标准对文献进行筛选和质量评价,共纳入27篇文章。从小干扰RNA合成、脑组织中的递送及其抑制效率和不良反应3方面进行总结。结果与结论:近来RNA干扰研究中,高精度预测小干扰RNA的方法能合成出高特异性的小干扰RNA;小干扰RNA在脑组织中的递送主要采用局部注射的方式,并且在递送载体的帮助下,抑制效率在不断地提高;随着RNA干扰技术研究的深入,其不良反应也逐渐受到人们重视。总之,作为一种新的治疗策略,RNA干扰在神经科学疾病的治疗中有着很大的潜能,并可能给药物研发带来新的变革。
- 张奇张琳颜荣杨新宇
- 关键词：小干扰RNARNA干扰脑组织
- Hes1蛋白在神经细胞生成中的作用被引量：8
- 2008年
- Hes1蛋白被广泛地表达于哺乳动物体内,并在生物进化过程中高度保守。其表达受Notch、Hedgehog信号系统等多种机制的调控,而且研究发现,Hes1蛋白表达量的高低与其功能有密切的关系。在神经系统发育过程中,Hes1蛋白功能的缺失可造成胚胎的无脑畸形,而其过高表达则可抑制神经祖细胞的增殖和分化,使神经祖细胞保持在未分化状态。由此可见,Hes1蛋白表达量的精确调控在神经细胞生成、神经系统发育过程中具有重要作用。
- 郇林春赵旺淼杨新宇杨树源
- 关键词：NEUROGENESISNOTCHBHLH神经干细胞
