福建省科技计划重点项目(2012D061)
- 作品数:3 被引量:14H指数:2
- 相关作者:刘荣福高加胜杨宇峰付国张杰更多>>
- 相关机构:厦门大学九江市第一人民医院福建医科大学更多>>
- 发文基金:福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 氯化壳聚糖水凝胶促进脂肪间充质干细胞治疗小鼠肾缺血再灌注损伤的作用被引量:1
- 2016年
- 目的:探讨温敏性氯化壳聚糖(CSCI)水凝胶作为可注射性支架携带脂肪间充质干细胞( ADMSCs)移植治疗缺血再灌注引起的急性肾损伤的疗效及安全性。方法构建急性肾损伤大鼠模型后,将所有大鼠随机分为ADMSCs/PBS组、ADMSCs/CSCI水凝胶组、PBS组和CSCI水凝胶组4个实验组。采用Live/Dead染色检测CSCI水凝胶与ADMSCs的细胞相容性;采用二氢乙啶( DHE)染色检测体内活性氧( ROS)的水平;活体生物发光成像仪( BLI)检测荧光素酶-单体红色荧光蛋白( fluc-mrfp)标记的ADMSCs在大鼠肾脏内的滞留和存活情况。采用HE染色检测CSCI水凝胶与肾脏组织的生物相容性和可降解性。通过检测血清肌酐和尿素氮的水平评价肾功能的改善情况。结果 Live/Dead染色证实,CSCI水凝胶和ADMSCs复合后有良好的细胞相容性。 CSCI水凝胶可以通过降低ROS水平,明显改善急性肾损伤肾脏组织的微环境;PBS 注射组的DHE 染色阳性率达68.8%±8.5%,CSCI水凝胶DHE染色阳性率达38.5%±5.8%( P<0.05)。 CSCI水凝胶可以改善移植的ADMSCs在肾脏内的滞留率和存活率;ADMSCs/CSCI水凝胶组,BLI荧光信号一直持续到第14天,第21天消失,BLI信号ROI值从第1天的38.0×10^5 p/( s· cm^2· sr)下降到第14天的8.5×10^5 p/( s·cm^2· sr)。而ADMSCs/PBS组,BLI荧光信号只持续到第7天,第14天已消失,BLI 信号ROI值从第1天的17.0×10^5 p/( s· cm^2· sr)下降到第7天的3.3×10^5 p/( s· cm^2· sr)。在第3、28天, ADMSCs/CSCI水凝胶组、ADMSCs/PBS组和CSCI水凝胶组修复损伤的能力明显强于PBS注射组( P<0.05)。其中,在第3、28天,ADMSCs/CSCI水凝胶组的组织损伤评分又明显低于ADMSCs/PBS组和CSCI水凝胶组(P<0.05)。以血肌酐和尿素氮水平评估肾功能。在第1、3、14、28天4个时间点中,ADMSCs/CSCIz水凝胶�
- 刘荣福高加胜张杰杨宇峰
- 关键词:脂肪间充质干细胞急性肾损伤细胞移植
- 可分化为肾小管上皮细胞的脂肪间充质干细胞对大鼠急性肾损伤的修复作用研究被引量:9
- 2014年
- 目的 探讨可分化为肾小管上皮细胞的脂肪间充质干细胞(ADMSC)对大鼠缺血再灌注诱导的急性肾损伤(AKI)的治疗作用. 方法 2011年6月至2012年3月选取雄性SD大鼠8只,体质量60~80 g.取大鼠腹股沟区脂肪组织获取原代MDMSC.将慢病毒转染至培养第2代的ADMSC.再选取雄性SD大鼠40只,体质量180~ 220 g.使用无损伤性动脉夹夹闭双侧肾蒂40 min,构建缺血再灌注诱导的AKI模型.将大鼠分为移植组和对照组,每组20只.移植组将2×106个慢病毒转染的ADMSC重悬于100 μl PBS后,分别注射到左肾实质的上、中、下极;对照组注射100 μl PBS.于移植细胞后第3、28天,分别取两组各5只大鼠的左肾标本行HE染色,观察肾组织的损伤情况;TUNEL染色法和PCNA染色法检测肾细胞的凋亡和增殖情况.于建模后第1、3、14、28天检测大鼠的血肌酐(SCr)和尿素氮(BUN). 结果 移植细胞后第3天,HE染色检查示移植组的肾小管损伤评分为2.0分,低于对照组的3.4分,差异有统计学意义(P<0.05).TUNEL和PCNA染色法检测移植组细胞凋亡平均数为30个,对照组为55个;移植组细胞增殖平均数为35个,对照组为10个,差异均有统计学意义(P<0.05).移植细胞后第1、3、14、28天移植组SCr分别为40、32、26、26 μmol/L,对照组分别为70、58、38、37 μmol/L;移植组BUN分别为15、13、10、7 mmol/L,对照组分别为24、20、13、10mmol/L,差异均有统计学意义(P<0.05). 结论 ADMSC对大鼠的AKI具有明显的修复作用.
- 刘荣福高加胜付国
- 关键词:脂肪间充质干细胞急性肾损伤
- 脂肪间充质干细胞分化为肾小管上皮细胞的实验研究被引量:5
- 2013年
- 目的探讨脂肪间充质干细胞(adipose-derivedmesenchymalstemcells,ADMCSs)是否能分化为肾小管上皮细胞,用于急性肾损伤(acutekidneyinjury,AKI)的治疗。方法体外分离和培养ADMSCs,用一种携带有荧光素酶和红色荧光蛋白(flue-mrfp)报告基因的慢病毒转染ADMSCs;构建sD大鼠缺血再灌注诱导的AKI模型,将病毒转染ADMSCs直接从肾实质注射移植2×10^6细胞量。使用生物发光成像仪(bioluminescenceimaging,BLI)示踪移植后的ADMSCs在大鼠体内的分布;免疫荧光染色法检测ADMSCs在体内的分化。结果ADMSCs高表达CD29、CD90,不表达CD31、CD45、CD34;慢病毒转染后的ADMSCs稳定表达fluc和mrfp报告基因。体内ADMSCs移植后,BLI可以检测到荧光信号一直持续到第14天;免疫荧光结果进一步证实移植的ADMSCs可能分化为肾小管上皮细胞。结论ADMSCs在体内可以分化为肾小管上皮细胞,为进一步研究ADMSCs治疗AKI提供实验基础。
- 刘荣福高加胜杨宇峰
- 关键词:干细胞肾小管上皮细胞