山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2000-33A)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 内源性一氧化氮在5-氟尿嘧啶诱导人肝癌细胞凋亡过程中的作用被引量：3
- 2001年
- 目的:观察内源性NO在5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)诱导人肝癌细胞凋亡中的作用,为进一步研究5-FU的作用机理和提高5-FU的临床疗效寻找辅剂。方法:人肝癌细胞Bel-7402按常规条件培养于含10%小牛血清且无L-精氨酸(L-Arg)的DMEM培养液中。在5-FU作用下,采用免疫组化法观察诱生型一氧化氮合酶的表达情况,并在其底物L-Arg存在的前提下,采用酶法测定硝酸盐/亚硝酸盐量,反映NO的生成,并证明它的作用。用电镜观察凋亡细胞的形态,流式细胞仪进行凋亡细胞的定量。用L-Arg的竞争性拮抗剂L-NAME(Nω-nitro-L-Argininemethylester)对研究结果进行验证。应用高清晰度病理彩色图文分析系统对免疫组化结果进行光密度定量分析。采用方差分析和t检验进行统计学分析。结果:在5-FU的作用下,诱生型一氧化氮合酶表达增强(5-FU组0.16870±0.01968,对照组0.10490±0.01266,P<0.05),在其底物L-Arg存在的前提下,内源性NO的浓度为(73.0±10.2)μmol/L,有显著性提高(P<0.05);人肝癌Bel-7402细胞株的凋亡率明显增高(17.85±0.78)%,细胞坏死率和残渣率减少犤分别为(32.99±0.83)%,(3.18±1.01)%犦,与5-FU组相比P<0.05,有统计学意义。L-NAME能够拮抗内源性NO的作用。结论:内源性NO参与5-FU诱导肝癌细胞凋亡。
- 姜军梅刘吉勇朱菊人王义渠杨崇美叶远红
- 关键词：肝肿瘤5-氟尿嘧啶一氧化氮一氧化氮合酶
