广东省自然科学基金(S2011040001653)
- 作品数：7 被引量：34H指数：3
- 相关作者：周玲艳庄楚雄周海李静姜大刚更多>>
- 相关机构：仲恺农业工程学院华南农业大学遵义医学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水稻Osε-cop1基因表达模式及功能的初步分析被引量：1
- 2013年
- ε-COP是真核生物中COP I有被小泡的一个亚基,其在植物中的生物学功能还未见报道。本研究对水稻中编码ε-COP亚基的基因进行了生物信息学分析,对其中的Osε-cop1基因进行了时空表达分析,构建了Osε-cop1的RNA干涉载体并转化水稻,对转化植株的表达特性和表型性状进行了分析。生物信息学分析结果表明,编码ε-COP的两个基因有很高的序列一致性,其中的Osε-COP1蛋白与玉米、拟南芥和大豆同源蛋白也具有较高的序列一致性,分别为83%、68%和62%;时空表达分析结果表明,Osε-cop1在穗部特异表达,且在减数分裂期幼穗中表达量最高。RNA干涉的研究结果表明,Osε-cop1的表达下调造成植株穗顶部死亡,暗示该基因对水稻穗的发育具有重要作用。本研究初步揭示了Osε-cop1在水稻中的功能,为进一步研究COPI有被小泡在植物中的功能奠定了基础。
- 杨加伟周玲艳余守和庄楚雄
- 关键词：水稻RNA干涉功能分析
- 水稻Osε-cop1基因的原核表达及多克隆抗体制备被引量：4
- 2013年
- ε-COP蛋白是真核生物分泌途径中COPⅠ有被小泡的一个亚基。本研究利用PCR技术扩增水稻ε-cop基因(Osε-cop1)的ORF(开放阅读框),并克隆到原核表达载体pET-23d上,将表达载体pET-Osε-cop1转入大肠杆菌BL21(DE3),以1.0mmol/L的IPTG(isopropyl β-D-thiogalactoside)诱导表达重组蛋白,然后以重组蛋白作为抗原免疫家兔,制备多克隆抗体。SDS-PAGE电泳分析结果表明,成功诱导表达了分子量约为35kD的重组蛋白,Western blot检测表明,免疫家兔的抗血清与水稻幼穗总蛋白杂交信号较好。Osε-COP1抗体的制备有助于研究该基因及COPI小泡在水稻中的功能。
- 杨加伟周玲艳庄楚雄
- 关键词：原核表达抗体
- 水稻蜡质合成相关基因OsGL1-5的表达模式及逆境响应特征分析被引量：5
- 2013年
- 通过生物信息学方法对水稻蜡质合成相关基因OsGL1-5启动子序列特点进行分析;并以水稻中花11不同组织和发育时期的穗子为材料,通过半定量RT-PCR及mRNA原位杂交技术分析OsGL1-5的时空表达特征;同时,分别以200mmol·L-1NaCl、100μmol·L-1ABA和1.0%H2O2处理水稻幼苗,通过半定量RT-PCR分析逆境胁迫下OsGL1-5的表达模式。生物信息学分析表明,OsGL1-5启动子中包括大量与干旱、冷、盐等多种逆境胁迫相关的调控序列。时空表达特征分析表明,OsGL1-5主要在不同发育时期的穗子中表达,且表达部位集中在稃片的毛状体和花药绒毡层中,叶中表达量相对较低,而茎和根中没有检测到表达。NaCl、ABA以及H2O2等逆境胁迫下,OsGL1-5表达量在不同处理时间有所增加。
- 周玲艳倪尔冬朱丽雅梁红庄楚雄
- 关键词：水稻逆境
- 水稻OsCER4基因启动子序列及表达分析
- 2015年
- 通过生物信息学方法对水稻(Oryza sativa L.)蜡质合成相关基因OsCER4启动子序列和表达特性进行了分析;通过构建OsCER4启动子驱动的GUS融合表达载体,分析了OsCER4基因的时空表达;并分别以200 mmol/L Na Cl、100μmol/L ABA和1.0%H2O2处理水稻幼苗,通过半定量RT-PCR分析逆境胁迫下OsCER4的表达模式。启动子序列分析表明,OsCER4启动子中包括大量根、茎、叶肉等特异表达位点以及与干旱、冷、盐等多种逆境胁迫相关的调控序列。表达特征分析表明,OsCER4基因在愈伤组织、根、茎、叶中均有表达,在颖壳和子房中也有表达。Na Cl和PEG等逆境胁迫下,OsCER4基因表达量在不同处理时间有所增加,H2O2胁迫下,OsCER4基因表达量有所下降。
- 林晓林罗苑红梁丽凤冯君成周玲艳
- 关键词：SATIVA启动子逆境
- 水稻蜡质合成相关基因OsCER4自身启动子驱动的反义RNA转化植株获得被引量：2
- 2013年
- 水稻OsCER4基因编码脂肪醛脱羧酶,与拟南芥CER1基因高度同源,是否参与植物表面蜡质合成尚不清楚,为了探讨其功能,扩增了OsCER4基因起始密码子ATG上游约2 kb的序列作为该基因的启动子,以常规技术将启动子和OsCER4基因反义片段克隆到pCAMBIA双元载体1380中,采用农杆菌介导法转化粳稻品种中花11,并进行了转化苗OsCER4蛋白的表达量变化分析.结果表明,成功构建了由OsCER4自身启动子驱动的反义RNA载体,并通过农杆菌介导法成功转入水稻中花11中,多数OsCER4基因反义转化植株为阳性转化植株,后代分离比符合3∶1,反义RNA转化植株在蛋白水平上的表达量下降.
- 周玲艳姜大刚李静周海庄楚雄
- 关键词：水稻反义RNA
- 逆境处理下水稻叶角质层蜡质积累及其与蜡质合成相关基因OsGL1表达的关系被引量：23
- 2012年
- 植物角质层蜡质在抵抗各种生物和非生物胁迫中起着非常重要的作用。本试验以水稻(Oryza sativa L.)幼苗为材料,分别以200mmol L-1 NaCl、12%PEG、1.0%H2O2、40℃高温和8℃低温为逆境,研究叶角质层蜡质的积累情况以及其与水稻蜡质合成相关基因OsGL1表达的关系。扫描电镜观察以及叶角质层蜡质总量测定结果表明,12%PEG、1.0%H2O2和8℃低温处理下水稻幼苗叶角质层蜡质的积累明显增加,而200mmol L-1 NaCl和40℃高温处理下叶角质层蜡质覆盖量略有下降。RT-PCR分析显示,逆境处理下水稻蜡质合成相关基因OsGL1的表达量变化与水稻幼苗叶角质层蜡质的积累存在相关性。
- 周玲艳姜大刚李静周海曹伟炜庄楚雄
- 关键词：水稻角质层蜡质
- 水稻蜡质基因OsCER4的原核表达及多克隆抗体制备被引量：3
- 2012年
- 利用PCR方法扩增水稻(Oryza sativa L.)蜡质基因OsCER4的开放阅读框(Open reading frame,ORF),并克隆到原核表达载体pET-23d上,将表达载体OsCER4-pET转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)菌株,以1.2 mmol/L的异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(Isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达融合蛋白,然后以融合蛋白作为抗原免疫家兔,制备多克隆抗体.SDS-PAGE电泳分析结果表明,成功诱导表达了分子量约为71.6 kD的融合蛋白,而Western blot检测表明,免疫家兔的抗血清与水稻幼苗总蛋白杂交信号较好.Os-CER4抗体的制备有助于研究OsCER4基因的表达特性.
- 周玲艳秦华明周海杨家伟庄楚雄
- 关键词：SATIVA原核表达多克隆抗体
