国家质检总局科技计划项目(2008IK140) 作品数:6 被引量:23 H指数:4 相关作者: 王建广 石琰璟 房保海 雷质文 刘云国 更多>> 相关机构: 青岛科技大学 山东出入境检验检疫局 中国海洋大学 更多>> 发文基金: 山东出入境检验检疫局科研项目 国家质检总局科技计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
志贺菌依赖解旋酶DNA恒温扩增技术建立 被引量:2 2012年 目的利用依赖解旋酶DNA恒温扩增技术(HDA),建立一种快速检测志贺菌(Shigella)的新方法。方法根据志贺菌的ipaH基因序列设计特异性引物,优化反应体系和反应条件;并对方法进行特异性和灵敏度评价。结果对21株实验菌株检测,3株志贺菌均为阳性,其余18株非志贺菌均为阴性,灵敏度为5.1×103cfu/mL,与普通PCR方法检测结果相当。结论 HDA法检测志贺菌具有特异、灵敏及仪器要求低等特点,具有广阔的应用前景。 王建广 雷质文 刘云国 张健 姜英辉 祝素珍 房保海 石琰璟关键词:志贺菌 大肠埃希氏菌O157:H7的HDA检测方法的建立 被引量:5 2011年 采用自行建立和优化的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测体系,建立HDA检测方法对大肠埃希氏菌O157:H7进行检测。采用大肠埃希氏菌O157:H7的rfbE基因为目的片段设计特异性引物,建成可快速检测大肠埃希氏菌O157:H7的HDA检测法,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明:所建立起的检测法,灵敏度为4.3×103 cfu·mL-1,灵敏度与普通PCR方法相当。大肠埃希氏菌O157:H7的依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,用普通水浴槽即可进行反应。具有广阔的推广前景。 王建广 雷质文 石琰璟 付静芸 房保海 祝素珍 姜英辉 刘云国 张健 杨大伟溶藻弧菌的依赖于核酸序列恒温扩增检测方法的建立 被引量:2 2012年 采用自行建立和优化的依赖于核酸序列恒温扩增(NASBA)检测体系,对溶藻弧菌进行检测。采用溶藻弧菌的hsp60基因为目的片段设计特异性引物,建成可快速检测溶藻弧菌的NASBA检测法,并进行了特异性和灵敏度试验。结果表明:所建立起的NASBA检测方法,灵敏度为6.9×102 cfu.mL-1,高于普通PCR方法。溶藻弧菌的依赖于核酸序列恒温扩增检测方法具有较高灵敏度和和良好特异性,并且对仪器要求更低,用普通恒温设备即可进行反应,具有广阔的推广前景。 秦胜利 王建广关键词:溶藻弧菌 单核细胞增生李斯特氏菌依赖解旋酶DNA恒温扩增检测方法的建立 被引量:9 2011年 为建立单核细胞增生李斯特氏菌(Lm)的依赖解旋酶DNA恒温扩增(HDA)检测方法,本研究以Lm的iap基因为目的片段设计特异性引物,建立了可在65℃恒温扩增快速(90 min)检测Lm的HDA检测方法,分别对反应体系中的MgAc2、Bst聚合酶、UvrD解旋酶、dNTPs以及引物等的浓度进行优化,进行了特异性和灵敏度试验,并与普通PCR方法进行了比较。结果表明,所建立起的检测法最低检测限为7.8×103 cfu/mL,灵敏度与普通PCR方法相当。Lm的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,具有良好的应用前景。 王建广 雷质文 石琰璟 付静芸 祝素珍 房保海 姜英辉 刘云国 张健 杨大伟关键词:单核细胞增生李斯特氏菌 应用依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测副溶血性弧菌 被引量:10 2011年 以副溶血性弧菌的tlh基因为目的片段设计特异性引物,成功建立了恒温条件下快速检测副溶血性弧菌的依赖解旋酶DNA恒温扩增技术(HDA)的检测法,进行了特异性和灵敏度实验,并与普通PCR方法进行了比较。该HDA检测方法最低检测限为19.9ng·mL-1,与普通PCR方法相当。副溶血性弧菌的HDA检测方法具有普通PCR的特异、灵敏等特点,并且对仪器要求更低,用普通水浴槽即可进行反应。 石琰璟 王建广 房保海 张健 祝素珍 刘云国 姜英辉 雷质文 杨大伟关键词:副溶血性弧菌 应用依赖解旋酶DNA恒温扩增技术检测沙门菌的研究 被引量:5 2010年 目的:基于依赖解旋酶DNA恒温扩增技术(Helicase-dependent Isothermal DNA Amplification,HDA),建立一种快速检测沙门菌(Salmonella)的新方法。方法:以沙门菌的invA基因为目的片段设计特异性引物,根据设计的HDA的扩增条件,进行沙门菌的快速检测,进行特异性和灵敏度实验,并与普通PCR方法进行比较。结果:成功建立起沙门菌HDA检测法,最低检测限为460 pg/tube,与普通PCR方法相当。结论:HDA法检测沙门菌具有快速、简便、特异、灵敏等特点,极适合基层实验室使用,具有广阔的应用前景。 王建广 姜英辉 雷质文 石琰璟 房保海 刘云国关键词:沙门菌