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内蒙古自治区自然科学基金(2011BS0402)
作品数:
4
被引量:4
H指数:1
相关作者:
刘锴
张颖
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法氏囊病毒B87株B节段cDNA定点突变及真核表达载体的构建
2014年
为了探索构建具有分子标记的传染性法氏囊病毒(IBDV)B87株B节段真核表达载体,试验在不改变载体氨基酸序列的基础上,采用PCR方法将新的酶切标记位点引入表达载体上,通过酶切鉴定、测序鉴定及转染对载体表达情况进行观察和分析。结果表明:目的片段与载体片段连接正确,构建的绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-NB能在Vero细胞内表达。说明成功构建了含分子标记的突变真核表达载体pEGFP-NB。
刘锴
韩秀兰
关键词:
定点突变
绿色荧光蛋白
传染性法氏囊病病毒研究进展
被引量:3
2013年
传染性法氏囊病是一种严重威胁禽类健康的传染病,本文对传染性法氏囊病病毒的理化特性、基因组结构、结构蛋白以及病毒抗原和毒力变异的分子基础进行了阐述,以期对该病的综合防控提供参考。
张颖
刘锴
刘艳春
关键词:
传染性法氏囊病病毒
抗原变异
结构蛋白
法氏囊病毒B87株A节段cDNA定点突变及真核表达载体的构建
2013年
分子病毒学研究领域中的反向遗传操作技术(reverse genetics),或被称为病毒拯救(the rescue of virus)技术,解决了RNA病毒基因组难以操作这一困扰研究者多年的难题。通过对病毒在cDNA分子水平上的改造,如基因突变、缺失、插入等,可对RNA病毒的基因复制与表达调控机理、病毒与宿主间的相互作用关系以及新型疫苗开发等深入研究。
刘锴
张颖
林浩
宋军
关键词:
遗传学
法氏囊病毒
布鲁杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立
被引量:1
2013年
目的建立一种环介导等温扩增(LAMP)快速检测动物布鲁杆菌的方法。方法使用Primer4.0,针对布鲁杆菌外膜蛋白(0MP31)基因保守区设计4条特异引物,在Bst大片段聚合酶的作用下,实现DNA的梯状等温扩增,并在此方法最适扩增条件优化的基础上,对其特异性、灵敏度进行实验,同时与普通PCR灵敏度进行比较,以及进行LAMP可视化实验。结果本研究建立的检测方法对牛种布鲁杆菌( Brucella abortus ,B.abortus )544A和104M、羊种布鲁杆菌( Brucella melitensis ,B.melitensis )Rev-1和16M、猪种布鲁杆菌(Brucella suis,B.suis)S2和1330S、犬种布鲁杆菌(Brucella canis,B.canis)RM6/66、绵羊附睾种布鲁杆菌(Brucella ovis,B.ovis)63/290、沙林鼠种布鲁杆菌(Brucella neotomae,B.neotomae)5K33检测阳性,而耶尔森氏菌(Yersinia enterocolitica,Y.enterocolitica)0:9、大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)0157:H7和沙门氏菌(Salmonella typhimurium,S.typhimurium)47729检测阴性。LAMP法检出最低DNA浓度为8.5×10^-8mg/L,较普通PCR检测灵敏度高。检测结果既可以通过电泳判定也可以通过可视化判定。结论本研究所建立的布鲁杆菌LAMP检测方法具有特异、灵敏、设备要求简单等特点.适用于基层兽医部门进行布鲁杆菌的快速检测。
刘锴
关键词:
布鲁杆菌
环介导等温扩增
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