北京市自然科学基金(7082012)
- 作品数：11 被引量：28H指数：3
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- 相关机构：首都医科大学首都医科大学附属北京朝阳医院北京呼吸疾病研究所更多>>
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- 钙库操纵性钙通道特性及其与低氧性肺血管收缩、重构的关系
- 2008年
- 肺动脉平滑肌细胞内Ca^2＋浓度增加是导致低氧性肺血管收缩与重构的重要分子基础。由瞬时受体电位蛋白构成的钙库操纵性钙通道（store-operated channels，SOC）是调节细胞内Ca^2＋浓度的重要机制，并参与了肺动脉高压时血管收缩和重构过程。充分了解SOC通道的特性，对深入认识肺动脉高压发病的病理生理学机制、指导临床治疗策略具有重要意义。
- 王丛王军王辰
- 关键词：瞬时受体电位通道肺动脉平滑肌细胞肺动脉高压
- 小鼠急性肺血栓栓塞症模型的建立与比较被引量：4
- 2012年
- 目的通过评估不同方法诱导的肺血栓栓塞症小鼠模型效果,筛选建立操作简便、使用经济、成功率高的小鼠急性肺血栓栓塞症模型方法。方法制作全血血栓及白色血栓自体栓子,穿刺并注入小鼠右侧颈静脉,造成急性肺血栓栓塞症模型,分别于不同时间点检测相应生理、生化指标。结果经Mallory磷钨酸苏木精及HE染色证明,两种栓子制备肺血栓栓塞症模型的造模成功率为100%,栓子多处于肺动脉段及亚段水平,栓塞切实可靠;白色血栓栓塞组栓子较全血血栓组稳定性明显增高,自溶时间明显延长。结论白色血栓诱导的肺栓塞小鼠的病理状态更加稳定,且该急性肺血栓栓塞模型可以较好地模拟病理情况下这一疾病的病理、生理过程,为今后进一步研究肺血栓栓塞症的病理机制与筛选药物提供了一定的实验基础。
- 郑睿刘杰万钧姚建民徐洪涛
- 关键词：肺栓塞小鼠自体血栓
- 内皮素通过增强库容性钙内流促进肺血管平滑肌细胞增生
- 2009年
- 目的通过观察内皮素-1(ET-1)诱导人肺动脉平滑肌细胞(HPASMCs)增生的作用机制及细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)变化,探讨ET-1在肺动脉高压(PAH)发病过程中的作用,为进一步干预治疗提供有效的基础依据。方法体外培养HPASMCs并分为:正常对照组和内皮素组(ET-1:0.01μmol/L,0.1μmol/L,1.0μmol/L)。分别应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法和细胞计数检测细胞的增生情况,荧光钙成像法测定[Ca2+]i,运用RealTime-PCR、WesternBlotting检测编码钙库操控性钙通道(SOC)的规范瞬时受体电位1(TRPC1)基因及蛋白表达情况。结果ET-1可促进HPASMCs增生,且ET-1诱导的细胞增生依赖于细胞外Ca2+的内流,ET-1处理的细胞中[Ca2+]i和库容性钙内流(CCE)显著升高,同时TRPC1基因转录与蛋白表达也明显增加。结论ET-1能显著促进肺血管平滑肌细胞增生,其机制可能与上调编码SOC的TRPC1表达、增加库容性钙内流使肺血管平滑肌细胞的[Ca2+]i异常升高有关。
- 王丛王辰王辰刘杰王跃秀王军
- 关键词：瞬时受体电位通道肺动脉平滑肌细胞
- 瞬时感受器电位香草酸受体1在低氧诱导肺动脉平滑肌细胞内钙升高中的作用
- 2009年
- 目的观察记录低氧条件培养的人肺动脉平滑肌细胞中瞬时感受器电位香草酸受体1(transient potential vanilloid receptor1,TRPV1)对细胞内Ca2+浓度(用340nm/380nm的荧光强度比值表示)的影响,探讨TRPV1在低氧性肺动脉平滑肌细胞增生中的作用。方法应用4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色、流式细胞周期测定以及细胞内Ca2+浓度测定的方法检测细胞增生及细胞内Ca2+浓度变化。结果低氧能明显促进人肺动脉平滑肌细胞的增生,升高人肺动脉平滑肌细胞内静息Ca2+浓度,显著加强环并偶氮酸(cyclopiazonic acid,CPA)诱发的库容性Ca2+内流(capacitative Ca2+entry,CCE),上述效应均可被TRPV1阻断剂Capsazepine(CPZ)所抑制。结论在人肺动脉平滑肌细胞中,TRPV1可能是低氧所致细胞内Ca2+浓度增加、CCE增强和细胞过度增生的重要途径或调制因素。
- 王跃秀王辰王辰刘杰王丛
- 关键词：肺动脉平滑肌细胞瞬时感受器电位香草酸受体1
- 低氧通过Ca^(2+)-NFAT信号通路促进肺动脉平滑肌细胞增生被引量：3
- 2009年
- 目的通过观察低氧对肺动脉平滑肌细胞增生的影响及作用机制,探讨低氧在肺动脉高压发病过程中的作用,为肺动脉高压的进一步干预治疗提供可靠的理论依据。方法培养人肺动脉平滑肌细胞(human pulmonary artery smooth muscle cell,HPASMCs)并分为以下几组:正常对照组、低氧组(24h、48h、72h)、低氧并处理组(低氧48h并在细胞外液中加入EDTA2mmol/L或VIVIT4μmol/L)。分别应用细胞计数法检测细胞的增生情况、荧光钙成像法测定细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)、激光共聚焦显微镜观察活化T细胞核因子c3(nuclear factor of activated Tcells,NFATc3)在细胞核内外分布的变化。结果低氧呈时间依赖性促进HPASMCs增生;低氧处理的细胞静息[Ca2+]i和库容性钙内流(capacitative calcium entry,CCE)显著升高,NFATc3的核转位增多。EDTA(Ca2+螯合剂)或VIVIT(NFAT特异性抑制剂)能够明显抑制低氧诱导的细胞增生现象。结论低氧能促进HPASMCs的增生,其机制可能是通过增加静息[Ca2+]i和库容性钙内流,使HPASMCs内的Ca2+异常升高并导致NFATc3转位至核内,进而促进与增生有关的基因的表达。
- 李积凤王丛王丛王跃秀刘杰王辰
- 关键词：低氧肺动脉平滑肌细胞活化T细胞核因子
- Wnt信号通路的生物学效应及其与肺部疾病的关系被引量：16
- 2009年
- Wnt信号转导通路(Wnt通路)是一条在进化上保守的信号途径,它主要由经典Wnt/β-catenin信号途径和非经典的Wnt信号途径(Wnt/平面细胞的极性途径和Wnt/Ca2+途径)组成。其生物学效应广泛,可调控细胞的黏附、迁移、增生和凋亡等。作为一条与多种疾病密切关系的信号转导通路,其在肺部疾病发生、发展中所起的重要作用也逐渐被揭示。
- 于晓敏王辰王军
- 关键词：WNT信号肺动脉高压特发性肺纤维化
- 慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者肺血管平滑肌细胞膜电位的改变被引量：1
- 2011年
- 目的探讨分离培养的慢性血栓栓塞性肺动脉高压患者肺血管平滑肌细胞的方法,观察其电生理学特性。方法分离慢性血栓栓塞性肺动脉高压(chronic thromboembolic pulmonary hypertension,CTEPH)患者内膜剥脱术后的肺组织标本(CTEPH患者组)和肺癌或肺大泡患者正常肺组织标本(正常对照组)的肺血管平滑肌细胞,并进行体外培养,用特异性抗体(smoothmuscle-α-actin,SM-α-actin)进行免疫荧光鉴定。膜片钳记录两组肺血管平滑肌细胞的静息膜电位和动作电位,分析比较两者的异同。结果①酶解法成功分离肺血管平滑肌细胞,经鉴定SM-α-actin阳性细胞达90%以上;②CTEPH患者组肺血管平滑肌细胞静息膜电位(-21.05 mV±2.20 mV,n=11)明显低于正常对照组(-38.12 mV±2.28 mV,n=10),细胞膜电位降低了约45%,处于明显去极化状态(P<0.001);③CTEPH患者组肺血管平滑肌细胞动作电位时程(action potential duration,APD):APD50(0.185 s±0.035 s),APD75(0.277 s±0.053 s),APD90(0.333 s±0.064 s)与正常对照组APD50(0.100 s±0.016 s),APD75(0.150 s±0.024 s),APD90(0.180 s±0.028 s)相比,均明显延长(P<0.05)。结论 CTEPH患者肺血管平滑肌细胞静息膜电位明显减小,动作电位时程延长,提示CTEPH患者肺血管平滑肌细胞存在明显的电生理学特性改变,该变化可能是细胞膜上电压依赖性钙离子通道激活、钙离子浓度增加、肺血管重构发生的重要因素。
- 李晶王辰刘杰李积凤刘岩顾松杨媛华翟振国甘辉立王军
- 关键词：慢性血栓栓塞性肺动脉高压膜片钳动作电位
- 凝血酶对大鼠离体胸主动脉和肺动脉的收缩作用及其可能机制被引量：2
- 2011年
- 目的观察凝血酶对离体大鼠胸主动脉与肺动脉血管张力的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法采用Powerlab生物信号采集放大系统记录离体大鼠肺动脉与胸主动脉的张力信号,利用RT-PCR技术检测血管壁凝血酶受体的表达。结果凝血酶对离体大鼠肺动脉及胸主动脉具有明显的收缩作用,且该收缩作用与凝血酶受体-1激动剂的作用相似,不依赖于细胞外钙离子的存在。大鼠肺动脉及胸主动脉血管壁中均有凝血酶受体-1的表达。结论凝血酶对大鼠离体血管具有收缩作用并且可能是通过凝血酶受体-1而起作用,该作用不依赖于细胞外钙离子的存在。
- 张倩刘杰张知非林媛王军王军
- 关键词：凝血酶胸主动脉肺动脉血管收缩
- Bβ448野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系的建立被引量：1
- 2012年
- 目的构建野生型(BβArg448)和突变型(BβLys448)纤维蛋白原稳定表达细胞系,为进一步研究BβArg448Lys基因多态性的病理生理学意义及相关蛋白功能研究提供实验基础。方法以含纤维蛋白原野生型Bβ链cDNA全长的表达载体pMLP-FGB(448G)为模板,采用PCR定点突变技术构建BβLys448表达载体,即突变型质粒pMLP-FGB(448A)。应用脂质体转染及药物加压筛选的方法,将纤维蛋白原Aα链、野生型/突变型Bβ链、γ链表达载体共同转染至CHO-K1细胞,RT-PCR检测各条链mRNA的表达。结果野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞系在转录水平构建成功。结论野生型及突变型纤维蛋白原稳定转染细胞等在转录水平构建成功,为进一步体外研究BβArg448Lys所致纤维蛋白原的结构与功能异常奠定了基础。
- 林媛李积凤刘杰牛梦林孙然王军刘岩王辰
- 关键词：纤维蛋白原定点突变
- 电压依赖性钾离子通道在肺动脉高压发病过程中的作用被引量：1
- 2011年
- 肺动脉高压是一种肺血流受限引起肺血管阻力和压力持续性增高，最终导致右心衰竭甚至死亡的综合征。病理生理学改变主要为肺血管收缩、重塑及原位血栓形成。研究表明，钾离子通道尤其电压依赖性钾离子通道功能与表达水平的降低是引起肺血管平滑肌细胞增殖和凋亡异常、肺血管重塑的关键因素。本文着重论述近年来有关电压依赖性钾离子通道与肺动脉高压肺血管重塑发生相关机制的研究进展。
- 李晶王军
- 关键词：肺血管平滑肌细胞细胞增殖和凋亡肺血管重塑肺动脉高压
