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博士科研启动基金(20082)
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重组腺相关病毒-胸苷激酶-核糖体插入位点-内皮抑素双靶点基因治疗裸鼠膀胱癌的实验研究
2009年
目的探讨重组腺相关病毒(rAAV)-胸苷激酶(TK)-核糖体插入位点(IRES)-内皮抑素(ES)(简称rAAV-TIE)双靶点基因治疗膀胱癌的动物实验效果。方法膀胱癌T24细胞悬液接种于27只Balb/c裸鼠右侧肩胛区皮下,观察成瘤情况;取已成瘤裸鼠25只,随机分为对照组、rAAV-多克隆位点(MCS)组、rAAVTK组、rAAV—ES组、rAAV—TIE组,每组5只,瘤内分别注射生理盐水、rAAV—MCS、rAAVTK、rAAV—ES、rAAVTIE,4周后颈椎脱臼处死裸鼠,取出移植瘤,HE染色、计算微血管密度(MVD);采集裸鼠血液标本,双夹心酶联免疫吸附试验检测血清中ES浓度。结果①T24细胞接种3周后,接种部位肿瘤形成25只,成瘤率93%;②瘤内注射rAAVES、rAAVTK、rAAV-TIE 9d后,肿瘤生长明显抑制。治疗4周后rAAV—ES、rAAVTK、rAAV-TIE、rAAVMCS和对照组肿瘤体积分别为(0.75±0.08)、(0.71±0.11)、(0.52±0.09)、(1.27±0.13)、(1.24±0.17)cm^3;rAAV—ES组与rAAV—TK组间比较差异无统计学意义,其余组间比较差异均有统计学意义(P值均〈O.05);③5组裸鼠移植瘤MVD分别为(18.72±2.53)、(21.74±4.62)、(12.73±1.78)、(52.38±6.46)和(49.94±7.17)个/HP,治疗组显著低于空白对照组和空病毒组(P〈0.05)。结论重组rAAV—TIE腺相关病毒被成功构建,体外实验表明rAAV-TIE能抑制膀胱癌的血管生成和肿瘤生长,可有效双靶点基因治疗膀胱肿瘤。
潘建刚
周兴
韩瑞发
关键词:
腺相关病毒
自杀基因
内皮抑素
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