广东省科技计划工业攻关项目(2008B030301051)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：周奇王亚峰彭宝岗梁力建周祥兵更多>>
- 相关机构：中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 小干扰RNA沉默组织因子基因对肝癌侵袭转移能力的影响被引量：1
- 2011年
- 目的应用RNA干扰（RNAi）技术抑制人类肝癌细胞内组织因子（TF）基因表达，从而探讨对其侵袭转移能力的影响。方法本实验以人类肝癌细胞系HepG2细胞株为实验对象，将携带有针对TF小干扰RNA（siRNA）序列的质粒pGPU6／GFP／Neo—TFsiRNA，转染HepG2细胞株，以适当浓度的G418筛选获得阳性克隆，通过RT—PCR和蛋白质印迹法比较转染TF siRNA（＋）质粒、转染TFsiRNA（-）质粒以及未转染任何质粒的HepG2细胞内源性TF在基因及蛋白质表达水平的差异，进而应用Transwell体外侵袭实验检测三者的侵袭转移能力，探讨TF对肿瘤细胞侵袭转移能力的影响。结果（1）RT—PCR结果显示，转染TF siRNA（＋）质粒的HepG2细胞其内源性TF表达水平低于转染TF siRNA（-）质粒和未转染质粒的表达水平。（2）蛋白质Western印迹法结果显示，转染TF siRNA（＋）质粒的HepG2细胞其内源性TF蛋白表达水平低于转染TF siRNA（-）质粒和未转染质粒的表达水平。（3）Transwell体外侵袭实验结果显示，转染TFsiRNA（＋）质粒的HepG2穿膜细胞数[（14±10）个]少于转染TFsiRNA（-）质粒的HepG2穿膜细胞数[（128±18）个]，经t检验比较，两组差异有统计学意义（P〈0．05）。这提示应用RNA干扰技术抑制肿瘤细胞TF表达可以使HepG2细胞侵袭转移能力显著下降。结论TF与肝癌细胞的侵袭转移能力密切相关，应用RNA干扰技术抑制其表达可以明显降低细胞HepG2体外侵袭转移能力。
- 周奇周祥兵王亚峰梁力建彭宝岗
- 关键词：凝血致活酶RNA干扰肿瘤转移
- TIMP-3在肝癌组织中的表达及其与肿瘤侵袭转移的关系被引量：4
- 2011年
- 目的:检测金属蛋白酶-3组织抑制剂(TIMP-3)在肝细胞癌患者血浆和肿瘤及正常肝组织中的表达并探讨其临床意义。方法:收集56例肝细胞癌患者和30例对照组的血浆,从肿瘤大小、分化程度、肝外转移、门脉转移及淋巴转移几个因素比较TIMP-3蛋白表达水平;取手术标本包括30例原位癌组织标本、30例门脉癌栓组织标本、30例淋巴转移组织标本以及30例肝正常组织标本,采用RT-PCR和Western blotting法检测各个样本的TIMP-3mRNA及蛋白表达,结合临床病理资料分析其意义。结果:(1)有肝外转移患者的血浆TIMP-3蛋白表达水平明显低于无肝外转移者(P<0.05)。(2)TIMP-3 mRNA在原位肝癌组织中表达水平为0.52±0.09,在门脉癌栓组织中的表达水平为0.42±0.07,在淋巴转移灶的表达水平为0.40±0.08,在正常肝组织中表达水平为0.78±0.09;3组肿瘤组织与正常肝组织相比,TIMP-3 mRNA表达均降低,显著差异(P<0.01)。(3)TIMP-3蛋白在原位肝癌组织中表达水平为77.04±8.83,在门脉癌栓组织中的表达水平为64.43±3.80,在淋巴转移灶的表达水平为62.80±3.73,在正常肝组织中表达水平为115.08±8.60;3组肿瘤组织与正常肝组织相比TIMP-3蛋白表达均降低,显著差异(P<0.01)。结论:肝癌患者血浆和组织中TIMP-3的表达水平明显下降,在转移灶中的表达下降更显著,提示TIMP-3的低表达与肿瘤细胞的侵袭转移能力有关。
- 周奇王亚峰周祥兵梁力建彭宝岗
- 关键词：肝肿瘤肿瘤侵袭肿瘤转移
