国家自然科学基金(31160245)
- 作品数：14 被引量：38H指数：4
- 相关作者：马利兵贺小英程腾王凤梅李佳佳更多>>
- 相关机构：内蒙古科技大学包头轻工职业技术学院包头师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金内蒙古自治区高等学校科学研究项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 石蒜碱对人胃癌细胞体外增殖的影响被引量：9
- 2015年
- 以体外培养的h GCCs MGC-803细胞系为研究对象,采用不同浓度石蒜碱(5、2.5、1.25μmol/L)进行处理,倒置显微镜下观察其生长状态,同时采用血球计数板统计其体外增殖率,采用流式细胞技术检测处于不同细胞周期的细胞比例.结果表明,石蒜碱处理对h GCCs的体外增殖具有一定的抑制作用,其中5μmol/L石蒜碱对h GCCs的抑制作用最为明显.显微观察和计数分析结果表明,5μmol/L石蒜碱处理的h GCCs活力最低,细胞凋亡现象最明显.细胞周期检测的结果显示石蒜碱处理会使h GCCs增殖趋缓,细胞周期延长.
- 刘希宇贺小英王凤梅程腾马利兵
- 关键词：人胃癌细胞石蒜碱细胞活力细胞周期
- hTERT与SV40 LT协同表达对牛乳腺上皮细胞体外增殖的影响
- 2015年
- 人端粒酶催化亚基(human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和SV40大T抗原(simian virus 40 large antigen,SV40 LT)均能刺激细胞增殖并延长细胞体外寿命,但相对效率较低,二者协同能否增强功效有待于进一步研究。该文首先构建了h TERT和SV40 LT双基因共表达载体,转染牛乳腺上皮细胞(bovine mammary gland epithelial cells,b MGEs),获得阳性克隆。持续扩大培养时,细胞活力旺盛,且细胞能体外维持寿命超过30代。RT-PCR和Western blot检测结果表明,h TERT和SV40 LT能同时表达。流式细胞仪检测发现,阳性细胞具有较强的增殖能力。研究结果证实,h TERT和SV40 LT协同表达能刺激b MGEs体外增殖及延长细胞寿命。
- 贺小英马利兵程腾
- 关键词：端粒酶SV40乳腺细胞增殖
- 诱导性多潜能干细胞研究进展被引量：1
- 2014年
- 通过转染特定的一个或多个基因将已分化的体细胞诱导成为多潜能干细胞,这种干细胞称为诱导性多潜能干细胞(Induced pluripotent stem cells,iPS cells)。近年来关于iPS细胞的研究取得了举世瞩目的成就,多种已分化的体细胞都可以诱导成为iPS细胞,而且可以进一步将iPS细胞诱导成具有特定功能的细胞,称为诱导性细胞。这些研究极大地促进了细胞生物学、表观遗传学和发育生物学的研究,并且为人类再生医学和特异的细胞治疗带来了更美好的希望。对iPS细胞和诱导性细胞的最新研究状况进行了综述。
- 程腾贺小英马利兵
- 关键词：细胞治疗
- 发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响被引量：1
- 2012年
- 在动物卵母细胞体外成熟及胚胎体外培养体系中添加一定浓度的发情牛血清可能提高卵母细胞的成熟率及胚胎的发育率。本研究以屠宰场卵巢来源的绵羊卵母细胞为试验材料,探讨了发情牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响。结果表明,成熟液中添加10%第1天的发情牛血清能显著提高绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚卵裂率(P<0.05);孤雌胚体外培养72h后,向培养液中添加10%第7天的发情牛血清能显著提高绵羊孤雌胚的桑囊胚率(P<0.05)。结果表明,发情牛血清能够促进绵羊卵母细胞的体外成熟率及孤雌胚发育率。
- 李佳佳马利兵籍凤宇陈秀莉
- 关键词：卵母细胞孤雌胚体外成熟绵羊
- 内蒙古西部赤霞珠葡萄自然发酵酵母菌群的动态变化被引量：2
- 2016年
- 在无菌条件下,对内蒙古西部地区赤霞珠葡萄汁进行自然发酵,分别在发酵初、中、后期分离酵母菌株,采用WL营养琼脂对其进行形态学分类,采用基于酵母5.8S rRNA-ITS区域的RFLP(restriction fragment length polymorphism)分析对分类酵母菌株进行分子生物学鉴定,统计不同发酵时期发酵液中酵母菌株的种类及数量。结果表明,分离到的327株酵母菌分属于5个属的5个酵母菌种,分别是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、东方伊萨酵母(Issatchenkia orientalis)、克鲁维毕赤氏酵母(Pichia kluyveri)、浅黄隐球酵母(Cryptococcus flavescens)及葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum);自然发酵初期,葡萄汁有孢汉逊酵母、克鲁维毕赤氏酵母的数量占据优势,分别占分离总菌株数的64.22%、17.43%;随着发酵进行,非酿酒酵母(non-Saccharomyces)菌株的数量有所减少,酿酒酵母的数量逐渐增加,至发酵后期,发酵液中仅能检测到酿酒酵母的存在。这表明内蒙古西部地区野生酵母菌种较为丰富,WL营养琼脂形态学分类法结合酵母5.8S rRNA-ITS区域的RFLP分析能够快速分类、鉴定野生酵母菌种,实时监测发酵液中酵母菌群的动态变化趋势。
- 王凤梅马利兵
- 关键词：葡萄酒酵母赤霞珠
- 培养方法及胎牛血清浓度对人胎儿成纤维细胞体外生长的影响被引量：3
- 2013年
- 采用单细胞培养法和组织块培养法从原代培养人胎儿成纤维细胞,并在不同体积分数胎牛血清(FBS)(0%、4%、8%、10%、12%)的条件下观察人胎儿成纤维细胞培养的状况并采用台盼蓝染色法进行活细胞计数.结果表明,早期由组织块培养法原代培养获取的细胞形态要比单细胞培养法原代培养获取的细胞稍好些,且在细胞传代后极少出现无法贴壁的死细胞.FBS对hFFs生长影响比较明显.在实际应用中,在体积分数8%FBS下,采用组织块培养法进行人胎儿成纤维细胞体外培养,效果良好.
- 程腾李佳佳贺小英刘娟马利兵
- 关键词：组织块培养法胎牛血清
- 内蒙古西部地区霞多丽葡萄自然发酵过程中酵母菌群研究被引量：8
- 2015年
- 【目的】研究葡萄汁自然发酵过程中酵母菌种类及其数量动态变化,为筛选特色酿酒酵母菌株提供科学依据。【方法】在无菌条件下对内蒙古西部地区霞多丽葡萄汁进行自然发酵,在发酵初、中、后期使用培养基涂布法分离酵母菌株,以WL营养琼脂对分离获得的酵母菌株进行形态学分类分析,采用基于酵母5.8S r RNA-ITS区域的RFLP分析对分类后的酵母菌株进行分子生物学鉴定,统计不同发酵时期发酵液中酵母菌株的种类及数量。【结果】共分离获得312株酵母菌株,分属于5个属的6个酵母菌种,分别是酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、浅黄隐球酵母(Cryptococcus flavescens)、葡萄汁有孢汉逊酵母(Hanseniaspora uvarum)、异常毕赤酵母(Pichia anomala)、克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)和星形假丝酵母(Candida stellata)。在自然发酵初期,葡萄汁有孢汉逊酵母和克鲁维毕赤酵母的数量占据优势,分别占这一时期分离总菌株数的50.69%和25.00%,随着发酵的进行,非酿酒酵母(non-Saccharomyces)菌株的数量均有所减少,酿酒酵母的数量逐渐增加,至发酵后期,发酵液中仅能检测到酿酒酵母。【结论】在内蒙古西部地区葡萄浆果表面野生酵母菌种较丰富,WL营养琼脂形态学分类法结合酵母5.8S r RNA-ITS区域的RFLP分析能够实现对野生酵母菌种的快速分类、鉴定,能实时监测发酵液中酵母菌群的动态变化趋势。
- 王凤梅马利兵
- 关键词：葡萄酒酵母霞多丽葡萄RFLP
- 哺乳动物基因组印记的研究进展被引量：2
- 2015年
- 基因组印记是由亲本来源不同而导致等位基因表达差异的一种遗传现象。基因组印记产生的原因及过程是现代遗传学的一个热点问题。哺乳动物的许多基因组印记特征都使其成为后基因组时代的一个热点生物学问题。进化的基因组印记在哺乳动物生殖、发育中起到了特定的作用。综述了基因组印记的特点、印记基因的印记机理、基因印记与克隆动物的发育、印记基因与疾病的研究进展。
- 陈秀莉马利兵
- 关键词：基因组印记哺乳动物克隆动物胚胎发育
- 牛乳腺上皮细胞体外培养条件的优化及功能验证
- 2015年
- 乳腺上皮细胞是研究泌乳的调控机理、乳腺癌发病机制以及制备乳腺生物反应器靶细胞。由于乳腺细胞体外培养生命周期较短并且增殖活力与体外培养时间呈负相关,到目前为止,能够适合体外研究的乳腺细胞系报道较少。因此,在优化了乳腺细胞体外培养条件的基础上,进一步验证了优化体系后培养的乳腺上皮细胞生物学的稳定性、蛋白表达情况及转基因的效率。结果表明:1∶1 DMEM/F12基础培养液+10%胎牛血清+2 mmol/L谷氨酰胺+10 ng/m L表皮生长因子+10 ng/m L碱性成纤维细胞生长因子+10μg/m L的ITS+5μg/m L胰岛素+0.1 mmol/L非必须氨基酸是维持乳腺上皮细胞体外培养的最适条件。在此培养条件获得的乳腺上皮细胞生长旺盛,传代次数能延长到20代,生长后期仍然能稳定表达CK18,且具有较高的转基因效率。
- 贺小英马利兵程腾刘希宇刘娟吴飞
- 关键词：乳腺细胞体外培养转基因乳腺生物反应器
- 二甲基亚砜和胎牛血清对293T细胞冷冻效果的影响被引量：4
- 2013年
- 使用含不同体积分数二甲基亚砜(DMSO)(5%、10%、15%、20%)和不同体积分数胎牛血清(FBS)(5%、10%、20%、40%)的细胞冷冻液以三步冷冻法冻存293T细胞.台盼蓝染色法进行活细胞计数后计算出解冻后细胞存活率.结果表明:FBS对293T细胞冷冻效果的影响是显著的(P<0.05),但添加20%和40%FBS的效果无显著差异(P>0.05);DMSO对293T细胞冷冻效果的影响则是极显著的(P<0.01),添加10%DMSO时,细胞的冷冻效果最好;冷冻液中含10%DMSO、40%FBS时的冷冻效果最佳,细胞存活率可达到82.00%.而实际应用中,含10%FBS、10%DMSO或20%FBS、5%～10%DMSO的细胞冷冻液也可达到较理想的冷冻效果,足以达到一般实验的要求.
- 李佳佳程腾贺小英梁波陈秀莉籍凤宇马利兵
- 关键词：293T细胞胎牛血清冷冻效果
