广东省自然科学基金(7006655) 作品数:4 被引量:16 H指数:3 相关作者: 何平 初志战 黄卓烈 巫光宏 史清翠 更多>> 相关机构: 华南农业大学 茂名职业技术学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广东省自然科学基金 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 生物学 更多>>
不同疏水参数有机溶剂中木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的变化 被引量:8 2009年 【目的】探寻疏水参数(10gP)不同的有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的影响。【方法】制备固定化木瓜蛋白酶,在疏水参数不同(logP=-1.30,-1.10,-0.76,-0.33,-0.24,0.28,0.49,0.68,0.80,1.31,1,80,2.0,2.5,3.5和5.0)的15种有机溶剂及其不同体积分数(ψ-5%,10%,15%,20%,25%,30%,35%,40%,50%,60%和70%)的溶液中,测定木瓜蛋白酶及其固定化酶的活性,以不含相应有机溶剂的0.1mol/LpH7.2磷酸缓冲液或Tris-盐酸缓冲液为对照,分析不同有机溶剂及其体积分数对酶活性的影响。【结果】在低疏水参数(10gP≤-0.24)的有机溶剂中,有机溶剂二甲基亚砜、1,4-二氧六环和乙腈具有在低体积分数(妒≤10%)下,激活木瓜蛋白酶及其固定化酶活性的特性,有机溶剂甲醇、乙醇虽然在低体积分数(p≤10%)下不能激活木瓜蛋白酶及其固定化酶活性,但其活性与对照(So—O)相当;低疏水参数有机溶剂在高体积分数(9≥30%)下抑制酶活。当有机溶剂的疏水参数为0.28~1.31时,其对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性有显著抑制作用。在有机溶剂疏水参数较高(logP≥1.80)条件下,低体积分数(9≤10%)时酶活性下降较慢,超过-定体积分数(P≥30%)后,酶活性开始升高。【结论】低logP(10gP≤0.24)有机溶剂在低体积分数(ψ≤10%)时可激活或稳定木瓜蛋白酶及其固定化酶活性,而在高体积分数(ψ≥30%)时对酶活有抑制作用;中logP(0.28≤logP≤1.31)有机溶剂对木瓜蛋白酶及其固定化酶活性具有显著抑制作用;高logP(10gP≥1.80)有机溶剂在低体积分数(ψ≤10%)时抑制木瓜蛋白酶及其固定化酶活性,但在高体积分数(ψ≥30%)时酶活性升高。 何平 黄家乐 史清翠 巫光宏 初志战 黄卓烈关键词:木瓜蛋白酶 固定化酶 有机溶剂 酶活性 基于计算机模拟的蛋白质分离纯化实验 2010年 利用数学建模的方法首次提出了衡量分离纯化效果优劣的定量指标——纯化效益;建立了便于应用推广的聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)和硫酸铵沉淀分离纯化模型,并以海芋过氧化物酶分离纯化为例,对模型进行求解、应用和检验,求解最优实验试剂用量. 刘文彬 张鹏 占磊 何平关键词:计算机模拟 过氧化物酶 木瓜蛋白酶的固定化及其性质研究 被引量:5 2008年 在海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on sodium alginate-chitosan,IPSAC)的实验中,当给酶量为1mgg-1载体时,酶活性为39.2U,酶活力回收为21.1%。在尼龙布固定化木瓜蛋白酶(immobilized papain on nylon,IPN)的实验中,当每块尼龙布(3cm×3cm)给酶量为1mg时,酶活性为35.6U,酶活力回收为19.2%。木瓜蛋白酶(papain,PA)、IPSAC、IPN的最适pH分别为7.2、7.2和6.8。PA及IPSAC在70℃以下活性稳定;IPN在50℃以下活性稳定。IPSAC与IPN半衰期分别为59d和66d。 何平 黄卓烈 黎春怡 巫光宏 初志战 詹福建关键词:木瓜蛋白酶 固定化酶 海藻酸钠 尼龙布 用木瓜蛋白酶及固定化木瓜蛋白酶拆分DL-苯丙氨酸(英文) 被引量:3 2009年 为了将手性化合物D-苯丙氨酸和L-苯丙氨酸进行分离,利用木瓜蛋白酶及固定化木瓜蛋白酶催化的方法对其拆分.试验结果表明,用DL-苯丙氨酸合成N-乙酰-DL-苯丙氨酸,得率为88.7%.木瓜蛋白酶、海藻酸钠-壳聚糖固定化木瓜蛋白酶(IPSAC)、尼龙布固定化木瓜蛋白酶(IPN)催化合成N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺时,对催化合成过程影响最大的因素分别是溶液中的离子强度、溶液中的离子强度、反应温度;溶液中的离子强度与pH对合成的影响较大.本试验得出分别用木瓜蛋白酶、IPSAC、IPN催化合成N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺的3个最佳方案;用此3个方案合成时,产率分别为61.2%、54.7%、36.3%.N-乙酰-L-苯丙氨酰苯胺水解生成L-苯丙氨酸,产率59.2%,光学纯度为96.6%.N-乙酰-D-苯丙氨酸水解生成D-苯丙氨酸,产率61.7%,光学纯度为95.7%. 何平 黄卓烈 巫光宏 初志战 史清翠 黄家乐关键词:固定化木瓜蛋白酶 DL-苯丙氨酸 拆分 光学纯度