山东省滨州畜牧兽医研究院自主创新基金
- 作品数：10 被引量：42H指数：4
- 相关作者：沈志强夏小静苗立中王金良赵金花更多>>
- 相关机构：山东省滨州畜牧兽医研究院青岛农业大学山东农业大学更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 副产物乳酸对猪链球菌疫苗株ST171发酵的影响被引量：3
- 2012年
- 为提高猪链球菌(S.suis)疫苗的高密度发酵效果,本研究对S.suis疫苗株(ST171)的发酵过程进行检测,利用外源添加试验研究乳酸对ST171发酵的影响,并通过对发酵工艺的优化减少乳酸的生成。结果表明,ST171发酵液中积累有大量对其生长及活菌数量有不利影响的代谢副产物乳酸。经优化确定ST171发酵的最优工艺参数为:溶氧水平20%,初始葡萄糖浓度10 g/L,残糖浓度1 g/L,最大比生长速率小于0.7 h-1。在优化条件下,发酵过程中乳酸生成量与原工艺相比降低了41.41%,菌体生物量和活菌数量分别提高了70.58%、129.09%,取得了良好的发酵效果。
- 程立坤付强张莎莎苗立中夏小静沈志强
- 关键词：猪链球菌病疫苗乳酸发酵
- 山东省Ⅰ型鸭肝炎病毒的分离鉴定
- 为了研究鸭肝炎的发病原因,本试验从山东省发病鸭场中分离到6株鸭肝炎病毒。试验采用对分离的病毒进行鸡胚传代的方法。鸡胚传代可使鸡胚产生明显的病理变化,鸡胚出血较严重。分离病毒的ELD在10-10/0.2mL之间。使用标准D...
- 赵金花沈志强李峰赵蕾刘吉山苗立中
- 关键词：鸭肝炎病毒
- 文献传递
- 不同佐剂猪细小病毒蜂胶佐剂灭活苗免疫保护效果测定
- 比较蜂胶佐剂和油乳剂及铝胶佐剂对猪细小病毒灭活疫苗免疫保护的影响.对豚鼠进行免疫攻毒试验,检测血清抗体、IL-2和IL-4含量,用荧光定量-PCR测定各脏器猪细小病毒含量和各组体重变化.结果显示,蜂胶佐剂和油乳佐剂能加速...
- 马霞郭振环沈志强胡元亮
- 关键词：猪细小病毒灭活疫苗蜂胶佐剂免疫保护
- 文献传递
- 一株猪源链球菌的分离鉴定及生物学特性研究被引量：4
- 2012年
- 从送检的一份疑似链球菌病病死猪病料中分离出1株细菌,通过对分离菌株进行细菌的培养特性、生化试验、玻片凝集试验及PCR分型鉴定,确定为2型猪链球菌,动物致病性试验表明,1×108 CFU/mL的剂量可致死小白鼠,对该分离菌株的毒力因子进行PCR检测发现,溶菌酶释放蛋白(mrp)、胞外因子(ef)和溶血素(sly)均为阳性。此菌的分离鉴定为自家灭活菌苗的制备提供了候选菌株。
- 陈金龙李书光张莎莎张娜于新友孙翠平庄金秋沈志强
- 关键词：猪链球菌生物学特性
- Ⅰ型鸭肝炎病毒巢式RT-PCR检测方法的建立及应用被引量：13
- 2011年
- 根据GenBank中Ⅰ型鸭肝炎病毒的基因组序列,应用Oligo6.0软件设计合成了2对特异性引物,建立了Ⅰ型鸭肝炎病毒的巢式RT-PCR检测方法。结果显示,该检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好等优点,可以准确快速检测出极低含量(1pg)的Ⅰ型鸭肝炎病毒。本研究解决了该病在组织病料中检出困难的难题,为Ⅰ型鸭病毒性肝炎的快速诊断、净化及深入研究奠定了基础。
- 李娇王金良祖立闯赵金花沈志强
- 猪链球菌检测方法的研究进展被引量：5
- 2012年
- 猪链球菌是一种重要的人畜共患病病原,对猪链球菌进行快速而特异性地检测,具有重要的流行病学意义和临床应用价值。文章分别对猪链球菌免疫学检测方法与分子生物学检测方法进行了阐述,并对未来的研究方向进行了展望。
- 夏小静沈志强姜世金李书光王金良
- 关键词：猪链球菌免疫学检测方法
- 猪链球菌抗体GDH重组蛋白PPA-ELISA检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 以纯化的猪链球菌重组谷氨酸脱氢酶(GDH)蛋白作为包被抗原,酶标葡萄球菌A(PPA)蛋白为二抗,建立了检测猪链球菌抗体的间接PPA-ELISA诊断方法。经方阵滴定确定了抗原的最适包被浓度为12.5mg/L,血清样品的最佳稀释倍数为1∶80,PPA-ELISA阳性反应的临界值为D450nm≥0.378,交叉反应试验结果表明,该重组抗原与其他常见的6种猪病的阳性血清不发生交叉反应,批内和批间重复试验的变异系数均小于10%。经与武汉科前动物生物制品有限责任公司的商品化猪链球菌抗体检测试剂盒比较,二者的符合率为96.7%;对320份血清进行猪链球菌抗体检测,阳性检出率为73.1%。试验证明,所建立的PPA-ELISA检测法重复性好、特异性强、灵敏度高,为大规模地进行猪链球菌病的流行病学调查和血清学诊断提供了有效的技术手段。
- 夏小静李书光王金良陈金龙谢金文姜世金沈志强
- 关键词：猪链球菌谷氨酸脱氢酶
- 山东省Ⅰ型鸭肝炎病毒的分离鉴定
- 2011年
- 为了研究鸭肝炎的发病原因,试验从山东省发病鸭场中分离到6株鸭肝炎病毒,并进行了鉴定。结果表明:分离病毒ELD50为1×10-4.12～1×10-5.25/0.2 mL。
- 赵金花沈志强李峰单虎刘吉山苗立中
- 关键词：鸭肝炎病毒
- SS2溶菌酶释放蛋白(MRP)B细胞表位预测、原核表达及免疫学特性
- 2013年
- 运用ANTHEPROT 5.0综合分析二级结构、亲水性、表面可及性与抗原性指数,预测MRP的B细胞优势表位簇;PCR扩增出表达预测的抗原肽段的基因(mrp-1),构建重组原核表达载体pET32a-mrp-1,IPTG诱导表达,以渗透性休克法纯化重组蛋白;使用重组蛋白免疫血清和灭活猪链球菌2型SS2免疫血清Western blotting检测重组蛋白的免疫原性及其与SS2免疫血清的反应性;纯化的重组蛋白免疫雌性SPF昆明小鼠,SS2攻毒受试动物评估重组蛋白对小鼠的免疫保护力。Western blotting显示预测的950～1 210aa肽段与PET32a重组表达的蛋白(MRP)具有良好的免疫原性和反应性;攻毒试验结果表明重组蛋白对小鼠的免疫保护率为菌体免疫所提供保护率的66.7%。研究为利用该细胞表位簇作为高效免疫制剂奠定了基础。
- 吴立志伍晓雄张松林刘磊肖跃强夏小静沈志强
- 关键词：猪链球菌2型溶菌酶释放蛋白B细胞表位原核表达
- 新型鸭肝炎病毒的分离鉴定及VP1基因序列分析被引量：7
- 2011年
- 为了解新型鸭肝炎病毒(N-DHV)的变异情况,本实验从广西、河南、山东临床发病鸭体内分离到3株病毒。通过RT-PCR检测为N-DHV。将分离株进行鸭胚传代培养,并测定鸭胚毒的ELD50为10-3.29/0.2 mL～10-4.65/0.2 mL。以1型和N-DHV阳性血清分别与分离株进行血清交叉中和试验,结果表明,Ⅰ型鸭肝炎病毒(DHV-1)阳性血清对分离株无保护性。动物回归试验表明,分离株致死雏鸭的临床症状和病变与DHV-1相同,分离株的致死率为30%～70%。将分离株接种鸡胚,不产生任何病变,在鸡胚成纤维细胞中连续传5代后,细胞产生明显、规律的病变。扩增3株分离株的VP1基因,并进行氨基酸序列比对,结果表明3个分离株与DHV-C的同源性最高,与DHV-A的同源性最低,并存在氨基酸的插入和缺失。本实验表明3个分离株与韩国N-DHV属于同一血清型。
- 赵金花沈志强朱辉李峰甄洪花苗立中单虎
- 关键词：新型鸭肝炎病毒VP1基因
