国家自然科学基金(81200119)
- 作品数：5 被引量：6H指数：1
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- 形成拟胚体细胞数量对小鼠胚胎干细胞心肌细胞及内皮细胞分化的影响
- 2013年
- 目的:探讨形成拟胚体(EBs)起始小鼠胚胎干细胞(ESCs)数量对心肌细胞及内皮细胞分化的影响。方法:将形成EBs起始ESCs数量为400,1 000,4 000的3个组(HD400,HD1000,HD4000)通过悬滴法促进其分化。免疫荧光检测TnT及CD31的表达;在不同时间点计算三个组搏动EBs百分比;RT-PCR检测Nkx2.5,GA-TA4,β-MHC,flk-1,CD31,tie-2基因表达水平。结果:通过悬滴法形成的EBs能够出现自发性搏动并且有TnT及CD31表达;HD1000组和HD4000组相比HD400组有更高的搏动EBs百分比及Nkx2.5,GATA4,β-MHC基因表达水平;HD400组相比HD1000组和HD4000组有更高的flk-1,CD31,tie-2基因表达水平(P<0.05)。结论:形成EBs起始ESCs数量是影响心肌细胞和内皮细胞分化的一个重要因素,起始细胞数量多则心肌细胞分化程度高,数量少则内皮细胞分化程度高。
- 陈明毕琳琳王智泉赵芳干学东王扬淦
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞内皮细胞分化
- Wnt3a对小鼠胚胎干细胞心肌细胞分化的影响
- 2014年
- 目的：观察Wnt3a信号对小鼠胚胎干细胞（embryonicstemcell，ESC）心肌细胞分化的影响。方法：用悬滴培养法促进ESCs形成拟胚体（embryoidbodies，EBs）。用免疫荧光染色法检测心肌特异性蛋白cTnT的表达。在不同分化时间加入Wnt3a及Wnt信号通路抑制剂Dkk一1观察对搏动EBs百分率的影响。用RT—PCR检测Nk同源异型盒5（Nkx2．5）、锌指转录因子-4（GATA．4）、B．肌球蛋白重链（[~-MHC）及心房钠尿肽（ANP）基因表达水平的变化。用Westernblot检测cTnT表达水平的变化。将不加入Wnt3a，分化第0—5天及5～lO天加入Wnt3a的组分别命名为对照组，D0-5组及D5．10组。加入Dkk．1的组命名为Dkk．1组。结果：通过悬滴培养法形成的EBs能够出现自发性搏动并且有TnT表达。EBs形成过程中即分化第0—5天加入Wnt3a与对照组相比具有更高的搏动EBs百分率，Nkx2．5、GATA4、B．MHC和ANP基因表达的水平，以及cTnT蛋白表达水平，而EBs形成后即分化第5—10天加入Wnt3a的结果相反。分化第5—10天加入Dkk．1与对照组相比具有更高的搏动EBs百分率及cTnT蛋白表达水平，并且在分化第0—5天分别加入Wnt3a及Dkk．1与单独加入Wnt3a及Dkk-1相比，搏动EBs百分率及cTnT蛋白表达水平更高。结论：Wnt3a对ESCs向心肌细胞分化的调控呈时间依耐性，EBs形成过程中激活Wnt3a信号及EBs形成后阻断Wnt3a信号能够获得更多的心肌细胞。
- 陈明张光宇毕琳琳赵芳王智泉干学东王扬淦
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞分化WNT3A
- 冠心病患者血清脂蛋白(a)和胱抑素C与抑郁症的关系被引量：4
- 2021年
- 目的探讨冠心病患者血清脂蛋白a[lipoprotein(a),Lp(a)]和胱抑素C(cystatin C,Cys C)与抑郁症的相关性。方法选取102例冠心病患者为研究对象,入院后收集基本临床资料、Lp(a)和Cys C水平,根据贝克抑郁量表评估将研究对象分为抑郁组与非抑郁组。结果与非抑郁组相比,抑郁组血清Lp(a)及Cys C的水平均明显升高(P<0.01)。相关分析提示冠心病患者血清Lp(a)及Cys C水平与抑郁程度呈正相关。多因素Logistic回归分析提示血清Lp(a)(OR=1.004,95%CI:1.001~1.008,P<0.01)及Cys C(OR=32.715,95%CI:3.246-329.7373,P<0.01)水平是冠心病患者抑郁发生的独立危险因素;。ROC曲线分析提示,Lp(a)和Cys C诊断冠心病患者抑郁症的曲线下面积分别为0.741(95%CI:0.647~0.835)和0.719(95%CI:0.614~0.823)。当Lp(a)诊断临界值取90.7 mg/L时,其诊断效能最高,敏感度为87.5%,特异度为54.3%;当Cys C诊断临界值取0.98 mg/L时,其诊断效能最高,敏感度为75.0%,特异度为54.4%。结论在冠心病患者中,抑郁症患者血清Lp(a)及Cys C水平均显著高于非抑郁症个体,与抑郁程度呈正相关,且两者是冠心病患者抑郁症发生的独立危险因素。
- 徐振东张琳张胜利何涛罗慧敏吴晓燕范永臻王海蓉鲁志兵陈明
- 关键词：冠心病抑郁症血清脂蛋白A胱抑素C
- 拟胚体贴壁时间对小鼠胚胎干细胞心肌分化的影响被引量：1
- 2013年
- 目的观察拟胚体(EB)贴壁时间对小鼠胚胎干细胞(ESC)心肌分化的影响并研究其机制。方法用悬滴培养法促进ESCs形成EBs。EBs在不同的分化天数贴壁,观察搏动EBs百分比,RT-PCR检测Nkx2.5,GATA4和β-MHC mRNA表达,Western blot检测Src家族酪氨酸激酶磷酸化水平。结果分化第3,4天贴壁组搏动EB百分比及Nkx2.5,GATA4,β-MHC表达水平显著低于分化第5,6和7天贴壁组(P<0.05);EB贴壁能够使Src激酶磷酸化水平升高,Src激酶阻断剂PP2能够抑制贴壁诱发的Src激酶磷酸化水平升高(P<0.05);对于分化第4天贴壁组,在分化第4～6天使用PP2能够增加搏动EBs百分比及β-MHC表达水平(P<0.05)。结论 EB贴壁时间是影响ESC心肌分化的一个重要因素。在分化第4天或者之前贴壁可以显著抑制心肌分化,其机制可能是EB贴壁激活了Src激酶。
- 陈明毕琳琳赵芳王智泉干学东王扬淦
- 关键词：胚胎干细胞贴壁SRC激酶
- 拟胚体高密度培养促进小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化被引量：1
- 2013年
- 目的探讨拟胚体(EBs)培养密度对小鼠胚胎干细胞(ESCs)心肌细胞分化的影响。方法小鼠ESCs经过悬滴培养后形成EBs后,以高、低密度(120、60个EBs/60mm组织培养皿)贴壁培养,免疫荧光检测心肌特异性蛋白肌钙蛋白T(TnT)的表达。在不同时间点计算不同密度组搏动EBs百分比;RT-PCR检测Nkx2.5、GATA4、β-MHC及ANF基因表达水平;Western-blot检测TnT及p38表达水平。结果通过悬滴培养法形成的EBs能够出现自发性搏动并且有TnT表达。高密度培养组与低密度培养组相比具有更高的搏动EBs百分比,Nkx2.5、GATA4、β-MHC和ANF基因高表达水平,以及TnT蛋白高表达水平(P<0.05)。高密度培养组的p38活性更高,使用p38特异性阻断剂SB203580能够降低高密度组搏动EBs百分比和TnT蛋白表达水平。结论 EBs贴壁培养密度是影响ESCs向心肌细胞分化的一个重要因素,EBs高密度培养相比于低密度培养能够获得更大程度的心肌分化,且该现象可能是由p38信号通路所介导。
- 陈明毕琳琳赵芳王智泉干学东王扬淦
- 关键词：胚胎干细胞细胞计数细胞分化肌钙蛋白TP38丝裂原活化蛋白激酶类拟胚体
