国家自然科学基金(31170917)
- 作品数：5 被引量：17H指数：1
- 相关作者：刘玲蓉张其清王静洁陈晖娟张洋更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院福州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 胶原模拟多肽对L929细胞粘附的影响
- 2012年
- 设计合成了3种模拟胶原三螺旋结构或/和整合素识别位点的胶原模拟多肽(CMP),对其进行体外细胞相容性评价,研究其对小鼠成纤维细胞(L929)生长、粘附的影响。实验证实,3种CMP对成纤维细胞生长无明显的细胞毒性反应;3种包被胶原模拟多肽的基底均能在一定程度上促进细胞粘附、生长,具有良好的细胞粘附率和细胞附着形态,其中包含三螺旋结构和整合素识别位点的CMP27具有更好的促粘附效果,细胞粘附数量和形态与胶原接近。初步研究结果证实,胶原三螺旋结构与整合素识别位点共同作用促进L929细胞粘附。因此,CMP可以有效促进细胞粘附,有望作为粘附剂应用于生物医学领域,可为设计以多肽为基础的生物活性材料提供新的研究思路。
- 陈晖娟刘玲蓉王静洁张其清
- 关键词：胶原细胞粘附L929细胞
- 甲氨喋呤长循环脂质体对人骨肉瘤细胞的体外抗瘤活性被引量：1
- 2016年
- 背景:脂质体作为一种新型给药系统,具有不良反应小、无免疫原性和可生物降解等优点,将甲氨喋呤包载入脂质体中可显著降低药物毒性,改善药物抗肿瘤效果。目的:制备甲氨喋呤长循环脂质体,考察其对人骨肉瘤细胞MG-63的抗瘤活性。方法:采用薄膜分散法制备传统甲氨喋呤脂质体,后插入法制备甲氨喋呤长循环脂质体(甲氨喋呤初始质量浓度分别为9.1,1.82,0.364 g/L),分别采用超速离心法、葡聚糖凝胶G-10微柱离心法和葡聚糖凝胶G-50微柱离心法去除甲氨喋呤长循环脂质体未包载的游离药物,对3种方法纯化后脂质体的回收率、粒径、形态、包封率及药脂比等理化性质进行表征。分别以0,1,5,25 mg/L甲氨喋呤长循环脂质体(选择超速离心法与葡聚糖凝胶G-50微柱离心法纯化的脂质体)和游离甲氨喋呤稀释液培养人骨肉瘤细胞MG-63,24,48 h后采用MTS法检测细胞毒性。结果与结论:(1)甲氨喋呤长循环脂质体的粒径在200 nm左右,为均匀的球形或近球形;(2)回收率实验结果显示,葡聚糖凝胶G-50微柱离心法是最合适的甲氨喋呤长循环脂质体纯化方法,具有回收完全和快速的优点;(3)甲氨喋呤初始质量浓度相同时,超速离心法、葡聚糖凝胶G-10微柱离心法纯化的脂质体包封率与药脂比明显低于葡聚糖凝胶G-50微柱离心法纯化的脂质体;(4)体外细胞毒性实验表明,在同质量浓度条件下,甲氨喋呤长循环脂质体的细胞毒性远高于游离甲氨喋呤,葡聚糖凝胶G-50微柱离心法纯化的甲氨喋呤长循环脂质体细胞活性普遍比超速离心法纯化的脂质体细胞毒性高;(5)结果表明,甲氨喋呤长循环脂质体对于人骨肉瘤细胞具有较强的体外抗瘤活性。
- 秦迎州陈汉张洋张其清刘玲蓉
- 关键词：脂质体甲氨喋呤骨肉瘤长循环国家自然科学基金
- 胶原模拟多肽-PEG杂化水凝胶及用于兔骨髓间充质干细胞的三维培养被引量：1
- 2016年
- 目的 构建一种模拟细胞外基质的胶原模拟多肽-聚乙二醇（PEG）杂化水凝胶并应用于兔骨髓间充质干细胞（rBMSCs）的三维（3D）培养。 方法 利用胶原模拟多肽末端的半胱氨酸与马来酰亚胺修饰的多臂PEG偶联形成杂化水凝胶，圆二色谱表征胶原模拟多肽的三螺旋结构及其热稳定性，流变学检测和扫描电镜观察研究杂化水凝胶的成胶过程、机械强度及水凝胶内部结构。将rBMSCs包埋于杂化水凝胶中进行3D培养，检测水凝胶的细胞相容性及其对rBMSCs分化的影响。 结果 胶原模拟多肽能自发形成天然胶原的三螺旋结构，其热变性温度为49.4 ℃。胶原模拟多肽-PEG杂化水凝胶成胶迅速，内部呈现多孔的网络状纤维结构；杂化水凝胶3D培养rBMSCs 24 h后，绝大部分细胞保持存活状态，基因表达分析结果显示该水凝胶体系构建的3D培养环境能影响rBMSCs的分化。 结论 胶原模拟多肽-PEG杂化水凝胶制备条件温和，具有良好的机械强度和细胞相容性，有利于rBMSCs的软骨分化。
- 张洋王静洁任颖刘玲蓉
- 关键词：水凝胶
- 圆二色谱研究胶原模拟多肽三螺旋结构及其热稳定性被引量：15
- 2014年
- 胶原是广泛研究和应用的生物材料,具有独特的三螺旋结构,此结构与其生物学性能密切相关。以胶原模拟多肽(collagen mimetic peptide,CMP)作为胶原的模型分子,通过圆二色谱研究了CMP的三螺旋结构、热稳定性等随序列或长度的改变所发生的规律性变化。根据形成胶原三螺旋结构的重复序列(POG)_n及胶原上α_2β_1整合素识别位点序列GFOGER设计五种不同序列或长度的CMP,采用圆二色谱表征了CMP的三螺旋结构,并通过检测CMP的程序升温变性和程序降温复性过程中圆二色谱的变化,研究了CMP三螺旋结构的热变性过程、解链温度以及复性过程。实验结果显示,五种CMP室温下均以三螺旋结构的形式存在,CMP三螺旋结构的热稳定性随POG的个数增加而增强;不同于胶原,CMP三螺旋结构的热变性是可逆的,升温过程中三螺旋解聚(变性),降温过程又可重新组装(复性),复性过程有明显的'磁滞'现象。研究结果可为进一步研究胶原与CMP分子特征性的三螺旋结构形成规律以及基于CMP的人工类胶原生物材料的研究提供依据。
- 张之宝王静洁陈晖娟熊青青刘玲蓉张其清
- 关键词：热稳定性MIMETIC
- 透明质酸-MMP敏感肽仿生杂化水凝胶的制备及其对骨髓间充质干细胞分化调控的影响
- 2018年
- 设计合成了3种不同序列的基质金属蛋白酶(MMP)敏感肽,与活性基团马来酰亚胺修饰后的透明质酸进行共价交联,制备一类对MMP具有响应性的透明质酸仿生杂化水凝胶,并研究其对诱导兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)向软骨方向分化的影响。以N-羟基硫代琥珀酰亚胺(Sulfo-NHS)与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC·HCl)为催化剂,活化透明质酸羧基后,与N-(2-氨基乙基)马来酰亚胺三氟乙酸盐(AEM)常温搅拌反应,得到接枝马来酰亚胺基团的透明质酸(HA-MAL),马来酰亚胺基团与MMP敏感肽上的巯基在常温下即可发生加成反应。共价交联MMP敏感肽的水凝胶具有良好的机械性能,能够包埋细胞3D培养达4周以上。对水凝胶3D及孔板2D培养的BMSCs进行实时荧光定量PCR测定软骨方向分化的特征性基因Marker表达,结果显示,3种水凝胶对COL1A2、COL2A1、ACAN、SOX9 4种基因表达具有不同程度的上调作用,可促进BMSCs的软骨分化。
- 任颖杜博秦文娟刘玲蓉张其清
- 关键词：透明质酸基质金属蛋白酶软骨分化
