国家自然科学基金(30100081)
- 作品数：21 被引量：101H指数：7
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- α-辅肌动蛋白4与肾脏被引量：1
- 2005年
- αactinin(辅肌动蛋白) 4是新近发现的αactinin家族成员之一,在体内广泛表达,在肾小球主要表达于足细胞,具有交联肌动蛋白微丝的功能,对于肾小球足细胞肌动蛋白骨架的平衡有调节作用,并可能参与了肿瘤细胞的浸润和转移。αactinin4的编码基因(ACTN4)突变不仅引起常染色体显性遗传的家族性局灶节段性肾小球硬化,在肾病患者中还存在着ACTN4的多种突变形式以及αactinin4表达和分布的异常。该文主要就其分子结构、分布和生物学功能及其在肾脏疾病中发挥的作用作一综述。
- 沙玉根张爱华陈荣华
- 关键词：肌动蛋白类肾疾病
- c-Jun氨基末端激酶-激活蛋白1信号通路调控血管紧张素Ⅱ诱导的单核细胞趋化蛋白1表达被引量：11
- 2004年
- 目的 探讨c Jun氨基末端激酶 激活蛋白 1信号通路在肾小球肾炎单核细胞趋化蛋白1表达中的作用。方法 实验性肾炎应用兔抗鼠肾小球基底膜肾毒血清制备。应用凝胶电泳迁移率、超迁移实验和非放射性激酶活性检测法检测实验性肾炎肾组织和体外培养的肾小球系膜细胞内激活蛋白 1活化及其组成以及c Jun氨基末端激酶活性 ,应用核酸酶保护法检测体外培养的肾小球系膜细胞中单核细胞趋化蛋白 1表达。结果 实验性肾炎大鼠肾组织中c Jun氨基末端激酶和激活蛋白 1活性明显增强 ,分别是正常对照组的 (3 82± 0 5 8)倍和 (5 36± 0 6 1)倍 ,活化的激活蛋白 1主要含有c Jun和c Fos亚基 ;c Jun氨基末端激酶和激活蛋白 1活化与单核细胞趋化蛋白 1表达呈显著正相关。血管紧张素Ⅱ可诱导体外培养的肾小球系膜细胞单核细胞趋化蛋白 1表达、c Jun氨基末端激酶和激活蛋白 1活化 ,其作用呈剂量依赖性增加 ,10 0nmol/L血管紧张素Ⅱ诱导单核细胞趋化蛋白 1表达、c Jun氨基末端激酶和激活蛋白 1活性增加分别是对照组的 (2 0 99± 4 71)倍、(6 91±1 6 5 )倍和 (7 82± 1 32 )倍 ;应用c Jun氨基末端激酶特异性抑制剂SP6 0 0 12 5显著抑制血管紧张素Ⅱ诱导激活蛋白 1活化和单核细胞趋化蛋白 1表达。结论 血管紧张素Ⅱ可通?
- 张爱华黄松明丁桂霞吴元俊张维真吴红梅费莉郭梅陈荣华
- 关键词：激活蛋白1C-JUN氨基末端激酶单核细胞趋化蛋白1信号通路核酸酶凝胶电泳
- Podocin在大鼠微小病变肾病模型中的表达和分布被引量：13
- 2004年
- 目的 :观察podocin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素 (PAN)肾病模型中的表达和分布 ,探讨其在蛋白尿发生中的可能作用。 方法 :建立大鼠PAN肾病模型 ,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变 ,免疫荧光染色图像分析以及半定量RT PCR的方法 ,分别检测不同时间点 (1、3、1 0、2 0天 )大鼠肾组织中podocin的表达。 结果 :①PAN注射后第 1、3、1 0、2 0天大鼠肾小球podocin的表达强度分别为 :4 5 0 3± 5 1 0、33 35± 6 4 1、1 3 5 8± 3 73、4 2 34± 6 6 5 ,显著低于正常对照组 (5 4 95± 6 2 5 ,P <0 0 1 ) ,其中第 1 0天的表达强度最低。podocin的表达与尿蛋白排泄量呈负相关 (r=- 0 786 ,P <0 0 1 ) ;②podocin在正常大鼠肾小球沿毛细血管袢呈均匀连续的线样分布 ;模型第 1天podocin在肾小球局部呈颗粒状分布 ;第 3天呈弥散性的颗粒状分布 ;第 1 0天呈粗大的颗粒状分布 ;第 2 0天podocin的分布逐渐恢复为线样 ;③PAN注射后第 1、3、1 0、2 0天大鼠肾小球podocinmRNA的表达分别为正常对照组的 1 2、1 5和 1 4倍 ,第 2 0天大鼠肾小球podocinmRNA水平恢复正常。 结论
- 沙玉根张爱华陈荣华徐茵黄松明郭梅费莉
- 关键词：PODOCIN肾病模型免疫荧光蛋白尿
- 肾脏足细胞裂孔隔膜的分子组成被引量：1
- 2004年
- 足细胞裂孔隔膜结构的改变是导致肾小球疾病产生蛋白尿的主要原因 ,已陆续发现包括nephrin在内的与裂孔隔膜相关的多个蛋白分子 ,如ZO 1,CD2AP ,P cadherin ,podocin ,NEPH1,FAT及Filtrin等 ,它们的存在及相互作用对于保证裂孔隔膜的完整性和滤过功能有着直接或间接的作用 ,这些蛋白分子的发现有利于进一步阐明蛋白尿的发病机制 。
- 徐茵张爱华黄松明陈荣华
- 关键词：裂孔隔膜分子组成蛋白尿
- Nephrin在微小病变型肾病大鼠模型中的表达被引量：12
- 2005年
- 目的:观察nephrin在大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病模型(PAN)中的表达变化,探讨其在蛋白尿发生中的作用。方法:通过建立大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病模型,应用光镜、电镜观察肾脏病理改变,应用免疫组织化学技术和RT鄄PCR观察nephrin在不同时间点肾病模型大鼠蛋白水平和mRNA水平表达改变情况。结果:①PAN注射后第1天和第3天,大鼠24h尿蛋白的排泄量较对照组无显著差异;第10天达高峰,较对照组有显著差异(P<0.01);第20天,尿蛋白排泄量逐渐下降,较对照组仍有显著差异(P<0.05);②在PAN肾病模型第3和第10天,透射电镜显示足细胞足突融合;③nephrin蛋白和mRNA水平的表达在大鼠PAN肾病模型第1天即出现下降,第3天出现明显下降,第10天下降到最低点,第20天,随着蛋白尿的恢复nephrin的表达也逐渐恢复;④肾小球足细胞nephrin表达的变化与肾病模型大鼠24h尿蛋白定量的变化呈负相关。结论:①nephrin表达的改变与大鼠氨基核苷嘌呤霉素肾病模型蛋白尿的发生密切相关;②nephrin是判断肾小球足细胞损伤的一个早期重要指标。
- 徐茵张爱华黄松明沙玉根郭梅陈荣华
- 关键词：透射电镜免疫组织化学
- 重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体的构建及其在人胚胎肾293细胞中的表达
- 2011年
- 目的:构建人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,并观察其在人胚胎肾(HEK)293细胞中的表达。方法:应用基因重组技术,构建增强绿色荧光蛋白与NPHS2的融合表达载体,经PCR、限制性内切酶酶切和测序鉴定,应用基因转染技术将其转入HEK293细胞中,荧光显微镜和免疫印迹检测NPHS2的表达产物podocin。结果:经鉴定目的基因NPHS2全长插入重组质粒,HEK293细胞不表达NPHS2基因,转染后可以检测到绿色荧光蛋白分布于细胞的膜周部,免疫印迹证实为编码蛋白podocin。结论:成功构建重组人pEGFP-C2-NPHS2表达载体,有助于进一步研究podocin在足细胞疾病中的作用。
- 沙玉根赵非张爱华黄松明
- 关键词：足细胞HEK293细胞NPHS2基因重组
- 荧光表达载体Podocin过表达对HEK293细胞中CD2AP分布的影响被引量：1
- 2007年
- 目的:构建podocin荧光表达载体,并观察其转染HEK293后对CD2AP细胞内分布的影响。方法:PCR扩增NPHS2cDNA全长,通过T/A克隆连接至pGEMT-easy载体,应用XhoⅠ和BamHⅠ双酶切后,再将NPHS2全长亚克隆入pEGFP-C2。将构建好的荧光表达载体pEGFP-NPHS2转染HEK293细胞,通过免疫荧光的方法观察转染前后CD2AP细胞内的分布情况。结果:①成功构建pEGFP-NPHS2荧光表达载体;②Podocin表达载体转染HEK293细胞后,CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。结论:Podocin转染HEK293细胞可使CD2AP由核周转为弥散的细胞质分布。
- 沙玉根黄松明张爱华赵非陈荣华
- 关键词：PODOCINCD2AP
- NF-κB/IκB信号通路介导血管紧张素Ⅱ诱导的系膜细胞促炎性细胞因子表达被引量：4
- 2003年
- 目的:探讨核因子-κB(NF-κB)/IκB信号通路在血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的肾小球系膜细胞促炎性细胞因子表达中的作用。方法:应用核酸酶保护法检测系膜细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-1α和IL-1β mRNA表达;应用凝胶电泳迁移率和Western blot检测肾小球系膜细胞中NF-κB活化、p65亚基核转让以及IκBα和IκBβ的降解。结果:正常培养状态下,系膜细胞可组成型表达TNF-α和IL-1β,而不表达IL-1αmRNA,AngⅡ刺激后促炎性细胞因子表达显著上调,NF-κB特异性抑制剂2-疏代氨基甲酸吡咯烷显著抑制Ang Ⅱ诱导的促炎性细胞因子基因表达;Ang Ⅱ诱导系膜细胞NF-κB活化,p65核转位及胞质内IκBα和IκBα的降解。结论:Ang Ⅱ诱导肾小球系膜细胞中促炎性细胞因子表达可能通过NF-κB/IκB信号转导通路来实现。
- 黄松明张爱华丁桂霞吴元俊费莉郭梅陈荣华
- 关键词：系膜细胞IΚB
- 肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化及其意义被引量：1
- 2003年
- 目的:探讨肾毒血清性肾炎大鼠肾组织核因子-κB(NF-κB)活化及其意义。方法:肾毒血清肾炎应用免抗鼠肾小球基膜肾毒血清制备。应用凝胶电泳迁移率(EMSA)和Western blot检测肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化及IκBα和IκBβ的降解;采用核酸酶保护法检测肾组织中IL-8表达,并分析其与NF-κB活化的关系。结果:模型组肾组织中IL-8表达显著高于正常对照组;肾毒血清肾炎大鼠肾组织中NF-κB活化显著增强,p65由胞质转移至胞核,胞质内IκBα和IκBβ降解明显增加;NF-κB活化与IL-8表达呈显著正相关。结论:NF-κB/IκB信号通路介导肾小球肾炎肾组织中IL-8表达。
- 潘晓勤张爱华黄松明费莉郭梅陈荣华
- 关键词：核因子-ΚB肾小球肾炎白细胞介素-8
- JNK-c-Jun/AP-1信号通路介导血管紧张素Ⅱ诱导的肾小球系膜细胞增殖被引量：15
- 2004年
- 目的:探讨JNK-c-Jun/AP-1信号转导通路在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的肾小球系膜细胞(MC)增殖及细胞周期调控中的作用。方法:应用3H-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法及流式细胞术测定MC增殖和细胞周期的变化。应用凝胶电泳迁移率(EMSA)和非放射性激酶活性检测法检测系膜细胞内活化蛋白-1(AP-1)及c-Jun氨基末端激酶(JNK)活性。结果:AngⅡ可呈时间依赖性地诱导MC内JNK活化,AngⅡ刺激30min后,JNK活性达到高峰,1h几乎恢复至正常水平;AngⅡ刺激后MC内AP-1活性显著增强,3H-TdR掺入量明显增加,S期和G2/M期细胞数显著增多;JNK特异性抑制剂SP600125显著抑制AngⅡ诱导AP-1活化及MC增殖。结论:AngⅡ→JNK/SAPK→c-Jun/AP-1信号通路在MC增殖中发挥一定的作用。JNK特异性抑制剂SP600125能部分抑制AngⅡ诱导的AP-1活化及细胞增殖,从而可能具有一定的治疗作用。
- 张爱华黄松明丁桂霞吴元俊张维真吴红梅费莉郭梅陈荣华
- 关键词：系膜细胞活化蛋白-1C-JUN氨基末端激酶
