上海市青年科技启明星计划(07QH14020)
- 作品数：15 被引量：136H指数：8
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- 维持性腹膜透析患者营养不良-炎症复合体综合征的认识被引量：9
- 2010年
- 桂志红王会玲张金元
- 关键词：中重度营养不良腹膜透析技术透析患者维持性透析充分性
- 肌卫星细胞功能异常在慢性肾脏病骨骼肌消耗中的机制被引量：3
- 2010年
- 目的:骨骼肌消耗是慢性肾脏病(CKD)的主要特征,肌卫星细胞(muscle satellite cells,MSC)是具有自我增殖和更新能力的成肌干细胞,MSC功能异常可引起肌肉萎缩。本研究探讨MSC在CKD小鼠骨骼肌消耗中的作用机制。方法:采用5/6肾切除制作小鼠CKD模型,以假手术组为对照组。以免疫组化标记胫骨前肌层粘连蛋白(laminin),测量肌纤维横截面积,并计算面积百分位图;RT-PCR检测腓肠肌Pax-7、MyoD、Myf-5、Myogenin及myostatin mRNA表达水平;分离并原代培养骨骼肌MSC,原位免疫组化检测Pax-7和MyoD表达,检测分化后新形成的肌纤维胚胎型肌球蛋白重链(eMyHC)。结果:造模一个月后,CKD小鼠体重和骨骼肌重量明显下降,形态学表现为胫骨前肌明显变细,肌纤维横截面积减少,面积百分位图明显左移;肌肉组织的Pax-7、MyoD、Myf-5和Myogenin mRNA表达水平均有不同程度下降,myostatin mRNA表达则明显上调;原代培养的MSC中,CKD组的Pax-7和MyoD阳性细胞数目明显低于对照组,分化后新形成的eMyHC阳性肌纤维数目也明显降低。结论:CKD可引起显著的骨骼肌萎缩,使MSC增殖和分化功能下降,myostatin水平升高可能是抑制肌卫星细胞功能的重要原因。
- 王会玲张丽萍张金元
- 关键词：肾脏疾病肌卫星细胞MYOSTATINMYOD
- 炎症因子TNF-α/IL-6对透析患者骨骼肌消耗及Myostatin和Atrogin-1表达的影响被引量：11
- 2013年
- 目的研究血液透析患者骨骼肌消耗状态与炎症因子水平及肌萎缩基因表达的关系。方法选择维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者42例(HD组),以30例健康人群为正常对照组(Ctl)。主观全面营养评价法(SGA)法评估患者营养状态,采集人体测量学数据,收集临床生化指标,Elisa方法检测C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)等炎症因子水平;留取6位透析患者骨骼肌标本,与4位年龄性别匹配的非肾病者为对照,行HE染色并光镜下观察肌纤维形态,测量和分析肌纤维直径。荧光定量PCR检测肌萎缩标志分子Myostatin、Atrogin-1及炎症因子的转录水平。结果 HD组患者的体质量及体质量指数(BMI)低于健康对照组,其血尿素氮、肌酐和尿酸水平明显升高,并伴轻度贫血,其血清总蛋白和白蛋白、转铁蛋白等营养指标虽然在正常范围,但较对照组明显降低,血脂、血糖与对照组比较无差异;HD组的CRP、TNF-α和IL-6等炎症因子水平显著升高,P<0.05;骨骼肌标本光镜下观察到HD组肌纤维形态较纤细、萎缩,肌束间隙较宽,肌纤维直径降低;荧光定量PCR检测结果显示透析患者肌肉组织的myostatin mRNA转录水平上调5.96倍,Atrogin-1 mRNA上调2.43倍;同时TNF-α和IL-6mRNA转录水平分别上调8.37倍和3.36倍。结论血液透析患者骨骼肌消耗性营养不良与炎症因子水平升高相关;肌肉组织的TNF-α、IL-6表达上调,激活myostatin和Atrogin-1的转录,可能是引起骨骼肌消耗的重要机制。
- 丁婷婷王会玲陆石田军胡伟锋张金元
- 关键词：营养不良骨骼肌消耗
- 肌肉特异性糖皮质激素受体基因敲除对慢性肾脏病骨骼肌消耗的影响被引量：3
- 2012年
- 目的:内源性糖皮质激素水平异常升高可引起和加重慢性肾脏病(CKD)引起的骨骼肌消耗。本研究观察肌肉特异性糖皮质激素受体基因敲除(MGRKO)对CKD状态下小鼠骨骼肌消耗的影响。方法:采用5/6肾切除制作CKD小鼠模型,以假手术组(CTL组)为对照组。组织病理学检测胫骨前肌横截面积并计算肌纤维面积分布图;荧光定量PCR检测肌肉萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)和肌环指蛋白1(MuRF-1)mRNA水平;Western Blot检测其蛋白表达及Akt/FoxO1信号通路;ELISA方法检测血清皮质酮水平。结果:造模1月后,lox/lox-CKD和MGRKO-CKD小鼠的血尿素氮和皮质酮水平均明显升高;lox/lox-CKD的体重明显下降胫骨前肌湿重明显降低。而MGRKO-CTL和MGRKO-CKD两组间体重无明显差异,胫骨前肌湿重仅轻微降低。组织学观察到lox/lox-CKD胫骨前肌肌纤维明显萎缩,横截面积减少,肌纤维面积分布图明显左移。而MGRKO-CKD组的体重下降不明显,胫骨前肌仍较饱满,肌肉湿重略降低,横截面积略降低,与MGRKO-CTL组比较,肌纤维面积分布图仅轻度左移。荧光定量PCR和Western Blot结果显示lox/lox-CKD组的腓肠肌Atrogin-1和MuRF-1的mRNA和蛋白表达水平显著升高,同时其Akt磷酸化水平(pAkt/Akt)较lox/lox-CTL组显著降低3.1倍,FoxO1磷酸化水平(pFoxO1/FoxO1)较lox/lox-CTL组降低2.3倍;而MGRKO-CKD组的Atrogin-1表达仅轻微上调,MuRF-1则无明显变化;MGRKO-CKD组Atrogin-1蛋白表达水平仅比MGRKO-CTL组升高,同时pAkt/Akt、pFoxO1/FoxO1水平较对照组仅轻微降低。结论:内源性糖皮质激素水平升高在CKD肌肉消耗中发挥重要作用;MGRKO可减轻/阻止CKD状态下的体重下降和肌肉萎缩,下调肌萎缩关键基因Atrogin-1和MuRF-1表达水平;该效应与阻断糖皮质激素影响Akt/FoxO1信号途径有关,抑制糖皮质激素信号通路可能改善CKD肌肉消耗。
- 王会玲丁婷婷许烨张金元
- 关键词：慢性肾脏病骨骼肌消耗糖皮质激素
- 人参总皂苷对体外培养肌管形态及Atrogin-1表达的影响被引量：1
- 2012年
- 目的:慢性肾衰竭(CKD)尤其进入终末期透析的患者常并发以骨骼肌蛋白质-能量消耗为特征的营养不良,研究表明Atrogin-1激活是肌肉蛋白分解的关键步骤。本实验通过培养肌细胞,观察人参总皂苷的干预下,对糖皮质激素作用下肌细胞形态改变及Atrogin-1的表达的影响。方法:培养小鼠肌原细胞C2C12并使之融合成肌管,以不同浓度的地塞米松(0～10μm)和人参总皂苷(100μmol/L)刺激肌管后,镜下观察肌管形态改变,Westernblot检测Atrogin-1蛋白表达水平。结果:糖皮质激素地塞米松作用下,可剂量依赖性地使肌管变细,肌管Atrogin-1蛋白表达水平显著增高;在人参总皂苷干预后,肌管形态较地塞米松组增粗,同时肌管Atrogin-1蛋白降低(P<0.05)。结论:人参总皂苷能够改善地塞米松作用下肌肉消耗,并下调肌管Atrogin-1蛋白表达水平。
- 许烨丁婷婷王会玲张金元
- 关键词：骨骼肌人参皂苷ATROGIN-1
- 营养不良-炎症评分评估和判断维持性腹膜透析患者的营养不良-微炎症状态被引量：33
- 2010年
- 目的探讨营养不良-炎症评分(malnutrition inflammation score,MIS)对维持性腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)患者营养不良-微炎症状态的临床评价和判断。方法对上海解放军第四五五医院腹膜透析中心行维持性PD的患者的营养不良-炎症状态进行改良定量主观整体评估(modified quantitativesubjective global assessment,MQSGA)和MIS,同时检测PD患者人体测量指标、生化指标和微炎症指标,并分析MIS对营养不良-炎症状态的评价效能及与各项指标的相关性。结果符合纳入标准的PD患者共98例。按照MQSGA标准,营养不良者96例,占97.96%,其中轻度64例,占65.31%,中度27例,占27.55%,重度5例,占7.10%。按照MIS标准,98例PD患者全部为营养不良,占100%,其中轻度52例,占53.06%,中度39例,占39.80%,重度7例,占7.14%。MIS分值越高,患者年龄越大,营养状况越差,微炎症状态越严重。MIS与PD患者贫血指标、营养指标和人体测量指标显著负相关,差异有统计学意义(P<0.05);与微炎症指标显著正相关,差异有统计学意义(P<0.05),MIS与各指标的相关系数高于MQSGA。结论 MIS可准确评估和判断腹膜透析患者营养不良-微炎症状态,随着MIS分值的增加,患者的营养不良-炎症状态亦愈加严重,且高龄患者具有较高的MIS分值。
- 桂志红王会玲张金元
- 关键词：维持性腹膜透析
- CKD时高糖皮质激素通过激活Atrogin-1、MuRF-1引起骨骼肌萎缩被引量：13
- 2010年
- 目的:瘦体质量丢失和肌肉消耗状态是慢性肾脏病(CKD)严重并发症,并与患者不良预后有关。本研究观察CKD模型小鼠骨骼肌合成和分解代谢,分析肌肉特异性E3连接酶肌萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)在肌萎缩中的作用,探讨CKD肌肉消耗的病理机制。方法:采用5/6肾切除制作小鼠CKD模型,以假手术组为对照组。同位素14+C-苯丙氨酸掺入法检测肌肉蛋白合成,酪氨酸释放率分析检测肌肉分解代谢,组织病理学检测胫骨前肌横截面积并计算肌纤维面积分布图,Northern blot检测Atrogin-1和肌环指蛋白-1(MurF-1)mRNA水平,Western blot检测其蛋白表达及Akt/FOXO1信号通路,Elisa方法检测血清糖皮质激素水平。结果:造模1月后,CKD小鼠体重和骨骼肌重量明显下降,形态学表现为胫骨前肌横截面积减少,肌纤维面积分布图明显左移;蛋白质代谢方面显示肌肉蛋白分解增加明显,蛋白质合成代谢亦轻度下降,肌肉组织的Atrogin-1和MuRF-1mRNA表达明显上调,血清糖皮质激素水平较对照组升高13倍,CKD的代谢状态可导致骨骼肌组织Akt/FOXO1信号途径异常。结论:CKD时骨骼肌分解代谢旺盛,肌萎缩关键基因表达升高,致Akt/FOXO1信号途径异常,结果引起的肌肉萎缩,而糖皮质激素水平升高可能是原因之一。
- 王会玲桂志红许烨张金元
- 关键词：ATROGIN-1FORKHEADTRANSCRIPTION
- 血液透析患者微炎症状态与骨骼肌消耗性营养不良的临床研究被引量：12
- 2013年
- 目的:明确血液透析患者循环炎症因子水平与营养状态及骨骼肌消耗的关系。方法:选择年龄和性别匹配的维持性血液透析患者62例,依据血清高敏C反应蛋白(high sensitivity C reactive protein,CRP)水平将患者分为两组:微炎症状组(CRP≥5 mg/L)、非微炎症状态组(CRP<5 mg/L)。主观全面营养评价法(SGA)评估患者营养状态,采集人体测量学数据,收集临床生化指标,Elisa方法检测CRP、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)等炎症因子水平,核磁共振(MRI)图像分析测量患者右下肢骨骼肌含量,分析肌肉横截面积(cross-sectional area,CSA)。结果:微炎症状态组的体重和体质量指数略低于非微炎症状态组,但SGA分值、人体测量学指标差异均无统计学意义;微炎症状态组的CRP和IL-6水平明显升高,但TNF-α在两组间差异无统计学意义;该组的血清白蛋白、前白蛋白、转铁蛋白水平显著降低,血红蛋白和红细胞比积略低于非炎症状态组,血脂、电解质等差异无统计学意义;MRI显示两组患者的肌肉组织均呈不同程度的萎缩,皮下脂肪分布不均匀,局部变薄,但微炎症状态组的肌肉萎缩更显著,肌肉横截面积(CSA)降低(P<0.05)。结论:持续性循环炎症因子水平升高所导致的机体微炎症状态,可引起血透患者营养指标降低,使血红蛋白更难达标,并加剧透析相关性骨骼肌消耗。微炎症状态可能是引起或加剧透析患者营养不良的重要原因。
- 丁婷婷王会玲陆石田军胡伟锋张金元
- 关键词：营养不良骨骼肌消耗炎症因子
- 血液透析患者蛋白质-能量消耗与内源性糖皮质激素水平和胰岛素抵抗的临床研究被引量：7
- 2011年
- 目的探讨并发蛋白质能量消耗(protein-energy wasting.PEW)的维持性血液透析患者临床营养指标与内源性糖皮质激素水平及胰岛素抵抗的关系。方法采用改良主观营养评价法(MQSGA),对解放军第四五五医院2010年3月至2011年2月在血液净化中心行维持性血液透析的患者进行营养评分,选择MQSGA>10分者共70例,以30例健康成人为对照组。观察体质量指数等人体测量学指标、生化指标及血常规等;EIA法检测血清皮质酮浓度(透析前、空腹静脉血);ELISA法检测透析前空腹胰岛素浓度,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),并分析营养指标与血清皮质醇及HOMA-IR的相关性。结果 70例血液透析患者MQSGA平均评分为12.97±2.36;患者的体质量及体质量指数(BMI)、肱三头肌皮褶厚度、中臂围、中臂肌围等均低于健康对照组,血清白蛋白和总蛋白水平略低于对照组;皮质酮浓度显著高于对照组[(2.35±3.68)ng/L比(10.82±14.52)ng/L,P<0.01];空腹胰岛素水平明显升高[(6.4±1.3)mmol/l比(25.2±9.9)mmol/l,P<0.001],胰岛素抵抗指数HOMA-IR也明显升高[(91.39±0.49)比(5.3±2.70),P<0.001]。Spearman相关性分析显示血清皮质酮水平与MQSGA显著正相关,相关系数(r=0.684,P<0.001),与透析龄、血清未饱和铁、总铁结合力及转铁蛋白饱和度呈一定程度正相关,与中臂围、中臂肌围显著负相关;空腹胰岛素水平和HOMA-IR指数与MQSGA正相关,与体质量指数、中臂围、中臂肌围负相关。结论并发PEW的血液透析患者,虽然其血浆白蛋白在正常水平,但患者仍然存在较低体质量指数、肌肉含量较低等;内源性糖皮质激素水平升高和胰岛素抵抗可能与血液透析患者蛋白质能量消耗有关。
- 许烨王会玲陆石张金元
- 关键词：血液透析营养不良胰岛素抵抗糖皮质激素
- 肌肉萎缩蛋白Fbox-1基因沉默对糖皮质激素作用下肌管萎缩的影响
- 2011年
- 目的:研究糖皮质激素地塞米松(dexamethasone,DEX)对体外培养肌管的形态、蛋白质合成/分解代谢及肌肉萎缩蛋白Fbox-1(Atrogin-1)的表达,Atrogin-1基因沉默是否可减轻肌管萎缩。方法:体外培养小鼠肌纤维细胞株C2C12细胞并分化为肌管后,用DEX处理48h,同位素3H-酪氨酸掺入法检测蛋白合成,3H-酪氨酸释放率检测蛋白分解代谢;荧光显微镜观察肌管形态并拍照;Northern blot检测Atrogin-1mRNA水平;应用小分子干扰RNA片段(siRNA)技术使Atrogin-1基因沉默后,观察DEX作用下肌管形态的改变。结果:DEX5μmol/L作用后,肌管酪氨酸(tyrosine)掺入率下降17.4%,同时tyrosine释放率升高24.7%,使肌管形态变细、萎缩;剂量依赖性地升高Atroign-1蛋白表达水平,使Atroign-1mRNA表达升高3倍;Atrogin-1基因沉默可改善DEX引起的肌管萎缩。结论:DEX促进肌管蛋白质分解代谢,并抑制蛋白合成代谢,导致肌肉萎缩;Atrogin-1基因沉默可改善DEX引起的肌肉萎缩,Atrogin-1基因可能是逆转肌肉消耗性营养不良的有效靶点。
- 王会玲许烨张金元
- 关键词：糖皮质激素肌细胞细胞培养
