国家林业局948项目(2009-4-23) 作品数:4 被引量:9 H指数:2 相关作者: 汪阳东 陈益存 占志勇 崔琴琴 韩小娇 更多>> 相关机构: 中国林业科学研究院 安徽师范大学 更多>> 发文基金: 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 更多>>
油桐生物素羧基载体蛋白编码基因VfBCCP的克隆与表达分析 被引量:1 2012年 油桐(Vernicia fordii)属于大戟科(Euphorbiaceae)油桐属植物,原产于我国,是世界上著名的木本工业油料树种。其种子榨出的桐油是品质最好的天然干性油之一。桐油具有干燥快、抗酸碱、耐冷热、防腐蚀等特性,作为重要的工业用油广泛应用于制造涂料、高级油墨、增塑剂、医药以及化学试剂等行业(黄挺,2001;Brown et al.,2005)。同时油桐作为生物柴油原料树种具有良好的应用前景(钱能志等,2007;Shang et al.,2010;Chen et al.,2010)。在油桐种子生长发育过程中,7月为桐油的缓慢形成期,7月底到9月初为桐油的迅速累积期,而9月初至10月中旬为桐油累积完成期(王汉涛等,1985)。 崔琴琴 韩小娇 陈益存 占志勇 林丽媛 汪阳东关键词:油桐 基因克隆 油桐叶片和种仁总RNA提取方法 被引量:1 2011年 本研究测得油桐叶片和种仁总糖含量分别为75.20,32.80 mg/g,总酚含量分别为15.75,0.57 mg/g,在此基础上对TRIzol法、CTAB-LiCl法进行改良,分别提取出高质量的种仁、叶片总RNA,并与异硫氰酸胍法及NOGEN试剂盒法进行比较,结果表明:改良TRIzol法提取的油桐种仁总RNA OD260/OD280稳定在1.9~2.0,28S rRNA和18S rRNA条带清晰完整,RNA产率较高,改良CTAB-LiCl法得到的种仁总RNA有部分降解,异硫氰酸胍法则对小分子盐类去除不够充分,而试剂盒提取出的油桐种仁总RNA有少许降解且有DNA杂质污染。上述4种方法中只有改良CTAB-LiCl法能成功提取出质量较高的油桐叶片总RNA。因此,改良TRIzol法和改良CTAB-LiCl法可分别作为提取油桐种仁和叶片总RNA的首选方法。 徐玲娜 汪阳东 陈益存 周冠 张小平关键词:油桐 总RNA提取 异硫氰酸胍法 一种适合油桐种仁蛋白质分离的双向电泳技术体系 被引量:4 2012年 为奠定油桐蛋白质组学研究的基础,针对影响油桐种仁蛋白质分离效果的几个重要因素进行单因素优化实验,建立了油桐种仁蛋白质组分离效果良好的双向电泳技术平台。实验结果显示:采用TCA-丙酮结合酚抽法提取的油桐种仁蛋白质,经裂解液(7 mol.L-1尿素,2 mol.L-1硫脲,4%CHAPS,65 mmol.L-1DTT,2%IPG buffer)裂解之后,上样700μg聚焦70 000 Vh,经过SDS-PAGE电泳(分离胶浓度15%,恒功率5 W,电泳时间8 h)后有良好的分离效果,能满足开展后续蛋白质组学研究的实验要求。 占志勇 陈益存 韩小娇 崔琴琴 汪阳东关键词:油桐 双向电泳 蛋白质组学 油桐DGAT2基因克隆及其RNAi双元表达载体构建 被引量:3 2011年 油桐(Vernicia fordii(Hemsl.)Airy.Shaw)隶属大戟科(Euphor biaceae)油桐属(Vernicia Lour.),是我国重要的工业油料树种,利用油桐籽榨取的桐油是一种优质干性油,在涂料、油墨、合成树脂、药品等领域有着广泛的应用。桐油中80%以上是桐酸,涂料生产要求桐油中桐酸含量高,而制造优质生物柴油则要求单不饱和脂肪酸含量尽量高,因此,根据不同用途和目标调控油桐桐酸生物合成成为油桐品种改良的一个重要途径。 徐玲娜 汪阳东 陈益存 张姗姗关键词:油桐 DGAT2 RNAI 双向启动子