您的位置: 专家智库 > >

国家自然科学基金(39970581)

作品数:4 被引量:35H指数:2
相关作者:吴信忠潘金培张其中孙敬锋高劲松更多>>
相关机构:中国科学院天津农学院浙江大学更多>>
发文基金:国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目中国博士后科学基金更多>>
相关领域:农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 4篇牡蛎
  • 4篇近江牡蛎
  • 2篇类立克次体
  • 1篇杂交
  • 1篇室温
  • 1篇受性
  • 1篇梯度离心
  • 1篇梯度离心法
  • 1篇片段
  • 1篇葡胺
  • 1篇离心
  • 1篇离心法
  • 1篇酶谱
  • 1篇酶谱分析
  • 1篇密度梯度离心
  • 1篇密度梯度离心...
  • 1篇耐受
  • 1篇耐受力
  • 1篇耐受性
  • 1篇克隆

机构

  • 2篇浙江大学
  • 2篇中国科学院
  • 2篇天津农学院
  • 1篇暨南大学
  • 1篇华南师范大学
  • 1篇中山大学

作者

  • 4篇吴信忠
  • 2篇张其中
  • 2篇孙敬锋
  • 2篇潘金培
  • 1篇高劲松
  • 1篇毕相东

传媒

  • 1篇Curren...
  • 1篇水产科学
  • 1篇生态科学
  • 1篇天津农学院学...

年份

  • 1篇2009
  • 1篇2008
  • 1篇2005
  • 1篇2003
4 条 记 录,以下是 1-4
排序方式:
热休克诱导近江牡蛎对高温的耐受性被引量:19
2005年
设计6个温度组成的梯度,即38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃,对近江牡蛎加热处理1.5h后放回室温海水中连续观察3d,发现致死温度为42℃,半致死温度是40℃,亚致死温度为36℃。经亚致死温度36℃热休克1.5h后,在正常环境温度下恢复6h,再经受致死温度42℃处理1.5h后,放回室温海水中连续观察3d,发现三次重复的平均存活率为96.7%,显著高于对照组的存活率(0),结果表明预先的热休克极显著地增强了近江牡蛎对致死温度(42℃)的耐受力。
张其中邱马银吴信忠潘金培
关键词:近江牡蛎耐受性高温半致死温度耐受力室温
间接ELISA技术检测近江牡蛎病原—类立克次体被引量:2
2009年
以近江牡蛎病原—类立克次体为抗原,制备鼠抗血清,利用辣根过氧化酶标记的羊抗鼠血清(HRP-IgG)为酶标二抗,建立了检测近江牡蛎类立克次体的间接ELISA快速检测方法。结果表明,应用间接ELISA技术检测近江牡蛎类立克次体有较高的灵敏度,最低的检测量为50 ng的全菌抗原蛋白量。同时交叉反应试验表明该方法具有较高的特异性。利用建立的间接ELISA技术,对50份自然患病的近江牡蛎鳃组织进行类立克次体检测,阳性率为89%。
孙敬锋毕相东吴信忠
关键词:ELISA技术近江牡蛎类立克次体
近江牡蛎Hsc70蛋白基因cDNA片段的克隆及Southern杂交和RT-PCR分析被引量:15
2003年
In order to elucidate the molecular mechanisms of the oyster (Crassostrea ariakensis) against adverse stimulating factors, we cloned and sequenced a partial cDNA encoding a 70 kDa heat shock cognate protein (Hsc70) from the oyster. The live oysters were obtained from Chengcun, Yangxi County, Guangdong Province, China. Various tissues, including mantle, gills, adductor muscle, heart and blood cells, were respectively collected from 5 untreated live oysters or treated ones at 36℃ for 1 5 hours, and immediately frozen in liquid nitrogen except for the blood cells which were suspended with Trizol Reagent after centrifugation ( 12 000 r/min for 30 s) and stored at -20℃. Total RNA was isolated using Trizol Reagent according to the manufacture’s instructions. The first strand cDNA was synthesized using reverse transcriptase Superscript Ⅱ according to the manufacture’s instructions. The primers were designed from a conserved region of C. gigas Hsc70 cDNA sequence (GeneBank accession No. AF144646). The polymerase chain reaction (PCR) was performed for 30 cycles with denaturation at 94℃ for 30 s, annealing at 49℃ for 40 s, and elongation at 72℃ for 30 s. The product was cloned to pGEM T easy vector and sequenced. It is 509 base pairs (bp) and possesses 94% identity with the cDNA encoding C. gigas Hsc70 using Blastn. This homology was strongly confirmed by amino acid sequence comparison using the Blastx (99%). The 509 bp fragment was labeled with α 32 pdCTP and a random primer DNA labeling kit and employed as a probe to perform Southern blotting, the result demonstrated that the cDNA came from a partial mRNA transcript of C. ariakensis genomic DNA gene. The polymerase chain reaction (PCR) was carried out to investigate the expression of Hsc70, Using the cDNAs of several tissues, such as gills (heat shocked), mantle, adductor muscle (heat shocked), heart, blood cells (one sample with heat shock for 1 5 hours at 36℃ and another without any stimulus). The PCR results revealed that Hsc70 transcripts could be
张其中吴信忠高劲松潘金培
关键词:近江牡蛎CDNA片段克隆SOUTHERN杂交RT-PCR分析
泛影葡胺密度梯度离心法纯化近江牡蛎类立克次体
2008年
用国产泛影葡胺做介质,通过差速离心和密度梯度离心从患病近江牡蛎的鳃、外套膜、肝胰腺组织中纯化类立克次体。纯化的类立克次体在透射电镜下观察,20%~25%和25%~30%之间的条带为纯净的类立克次体,大多数呈球形、椭球形,偶见哑铃状(处于二分裂阶段)。纯化的类立克次体细胞形态完整,在光滑的细胞壁外围有一层疏松的粘液层,而且多个类立克次体常聚集在一起。利用API ZYM半定量法对类立克次体进行酶谱分析,检测到了11种酶,包括碱性磷酸酶、酸性磷酸酶、酯酶(C4)、类脂酯酶(C8)、亮氨酸芳胺酶、萘酚AS-BI-磷酸水解酶、β-半乳糖苷酶、N-乙酰葡萄糖胺酶、β-果糖酶、β-糖醛酸苷酶和缬氨酸芳胺酶。本实验证明,国产泛影葡胺是直接从患病贝类组织中纯化类立克次体的良好介质。
孙敬锋吴信忠
关键词:泛影葡胺类立克次体纯化近江牡蛎酶谱分析
共1页<1>
聚类工具0