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国家自然科学基金(30670667)

作品数:8 被引量:15H指数:3
相关作者:丁斐蒋茂荣顾晓松诸葛晓旻程琼更多>>
相关机构:南通大学中国医学科学院北京协和医学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学医药卫生更多>>

文献类型

  • 7篇中文期刊文章

领域

  • 4篇生物学
  • 3篇医药卫生

主题

  • 2篇蛋白
  • 2篇神经损伤
  • 2篇壳寡糖
  • 2篇寡糖
  • 1篇蛋白组
  • 1篇蛋白组学
  • 1篇新西兰兔
  • 1篇质粒
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇神经再生
  • 1篇坐骨
  • 1篇坐骨神经
  • 1篇坐骨神经损伤
  • 1篇坐骨神经再生
  • 1篇腓总神经
  • 1篇腓总神经损伤
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞分化
  • 1篇小鼠
  • 1篇抗体

机构

  • 5篇南通大学
  • 1篇中国医学科学...

作者

  • 5篇丁斐
  • 2篇顾晓松
  • 2篇蒋茂荣
  • 1篇李文婷
  • 1篇吴欣
  • 1篇许增禄
  • 1篇顾芸
  • 1篇刘梅
  • 1篇王莉莉
  • 1篇陈褚
  • 1篇孙华林
  • 1篇邵晨昕
  • 1篇龚蕾蕾
  • 1篇程琼
  • 1篇诸葛晓旻

传媒

  • 2篇Scienc...
  • 1篇中国科学(C...
  • 1篇神经解剖学杂...
  • 1篇交通医学
  • 1篇苏州大学学报...
  • 1篇南通大学学报...

年份

  • 3篇2010
  • 3篇2009
  • 1篇2007
8 条 记 录,以下是 1-7
排序方式:
Protein expression profile in the differentiation of rat bone marrow stromal cells into Schwann cell-like cells被引量:1
2009年
During the last decade,increasing evidence suggested that bone marrow stromal cells(MSCs) have the potential to differentiate into neural lineages.Many studies have reported that MSCs showed morphological changes and expressed a limited number of neural proteins under experimental conditions.However,no proteomic studies on MSCs differentiated into Schwann cell-like cells have been reported.In this study,we isolated MSCs from adult Sprague-Dawley rat femur and tibia bone marrows and induced the cells in vitro under specific conditions.By using two-dimensional gel electrophoresis(2-DE),we compared the protein profiles of MSCs before and after induced differentiation.We obtained 792 protein spots in the protein profile by 2-DE,and found that 74 spots changed significantly before and after the differentiation using PDQuest software,with 43 up-regulated and 31 down-regulated.We analyzed these 74 spots by a matrix assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry(MALDI-TOF-MS) and by database searching,and found that they could be grouped into various classes,including cytoskeleton and structure proteins,growth factors,metabolic proteins,chaperone proteins,receptor proteins,cell cycle proteins,calcium binding proteins,and other proteins.These proteins also include neural and glial proteins,such as BDNF,CNTF and GFAP.The results may provide valuable proteomic information about the differentiation of MSCs into Schwann cell-like cells.
LI WenTing1,SUN HuaLin2,XU ZengLu1,DING Fei2 & GU XiaoSong2 1 Department of Anatomy,Histology and Embryology,Peking Union Medical College,Institute of Basic Medical Science,Chinese Academy of Medical Sciences,Beijing 100005,China
关键词:STROMALDIFFERENTIATIONCELLS
Isolation and differentiation of neural stem/progenitor cells from fetal rat dorsal root ganglia被引量:4
2010年
To find a promising alternative to neurons or schwann cells (SCs) for peripheral nerve repair applications,this study sought to isolate stem cells from fetal rat dorsal root ganglion (DRG) explants.Molecular expression analysis confirmed neural stem cell characteristics of DRG-derived neurospheres in terms of expressing neural stem cell-specific genes and a set of well-defined genes related to stem cell niches and glial fate decision.Under the influence of neurotrophic factors,bFGF and NGF,the neurospheres gave rise to neurofilament-expressing neurons and S100-expressing Schwann cell-like cells by different pathways.This study suggests that a subpopulation of stem cells that reside in DRGs is the progenitor of neurons and glia,which could directly induce the differentiation toward neurons,or SCs.
GU YunHU NanLIU JieDING FeiGU XiaoSong
关键词:IMMUNOCYTOCHEMISTRY
Myostatin干扰质粒的构建及在C2C12细胞中的效果验证
2007年
目的:研究Myostatin干扰质粒在小鼠骨骼肌成肌细胞系C2C12细胞中的沉默作用。方法:根据Myo-statin mRNA序列,选择3个19nts的靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补DNA链以及1个无干扰作用DNA链,退火后插入pSilencer2.1-U6表达载体,构建3个RNAi阳性质粒:M1/pSilencer、M2/pSilencer、M3/pSilencer及一个阴性质粒Mc/pSilencer并转染C2C12细胞,采用实时荧光定量PCR和Western blot观察RNAi对C2C12细胞中MyostatinmRNA和蛋白表达的下调作用。结果:构建的3个阳性干扰质粒中M1/pSilencer能显著降低C2C12细胞中Myostatin表达量,随着M1/pSilencer干扰质粒剂量的增加,Myostatin表达量逐渐降低。结论:成功构建Myostatin RNAi质粒,该质粒能下调目的基因Myostatin在C2C12细胞中的表达量。
吴欣邵晨昕顾芸丁斐刘梅
关键词:MYOSTATINRNA干扰C2C12
壳寡糖促进小鼠坐骨神经再生的实验研究被引量:4
2010年
目的观察壳寡糖(COS)对小鼠损伤坐骨神经的修复作用。方法ICR小鼠50只,行坐骨神经夹伤术,随机分成5组,分别为COS高、中、低剂量组(实验组),弥可保组(阳性对照组),生理盐水组(空白对照组),每组10只,术后每日腹腔注射给药。采用小鼠坐骨神经功能指数(SFI)、组织形态学及电镜检查,观察COS对损伤坐骨神经的影响。结果与空白对照组相比,COS可显著改善小鼠的坐骨神经功能(P<0.01)。超微结构观察表明,实验组有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于空白对照组(P<0.01),而变性纤维的数目少于空白对照组。结论COS能促进小鼠坐骨神经损伤后的修复及其功能的恢复。
蒋茂荣诸葛晓旻丁斐
关键词:壳寡糖坐骨神经损伤神经再生
犬S100β蛋白的体外克隆表达及抗体制备
2010年
目的:制备犬S100β蛋白抗血清,为组织工程和神经损伤及修复研究提供实验基础。方法:提取犬坐骨神经总RNA,采用RT-PCR方法扩增S100β基因,并克隆入pGEM-T载体。经测序验证后,将S100β基因亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中,IPTG诱导GST-S100β融合蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中表达。GST-S100β融合蛋白经Glutathione Sepharose亲和层析纯化后免疫新西兰大白兔,获得抗血清,经酶联免疫吸附试验(ELISA)法、Western Blot和免疫组化法检测抗体的效价和特异性。结果:测序结果表明,扩增的犬S100β基因序列与GenBank中的序列一致;并得到了较高纯度的GST-S100β融合蛋白和兔源性抗S100β血清,经Western Blot、免疫组织化学及ELISA实验证实所得抗体具有较高的特异性及效价。结论:构建了犬S100β基因的重组原核表达质粒,并获得了高效表达。成功制备了兔抗犬S100β抗血清,并具有较高的效价和特异性,为进一步研究神经损伤与修复机制提供实验基础。
蒋茂荣王莉莉顾晓松丁斐
关键词:融合蛋白抗血清
壳寡糖对兔腓总神经损伤的影响被引量:1
2009年
目的:研究壳寡糖(COSs)对兔周围神经损伤的修复作用。方法:对32只健康成年兔行腓总神经夹伤术。再分为4组:COSs高、低剂量组(剂量3mg/kg及1.5mg/kg),弥可保组(阳性对照,剂量30μg/kg),空白对照组(给予等体积双蒸水),均耳缘静脉给药6周,行Meyer's改良神经三色染色和透射电镜观察。结果:COSs高、低剂量组再生髓鞘数目显著优于空白对照组(P<0.01)。超微结构观察显示COSs高、低剂量组再生神经的髓鞘形态明显优于空白对照组,变性纤维数少于空白对照组。结论:COSs能促进兔腓总神经夹伤后的再生。
陈褚龚蕾蕾程琼丁斐
关键词:壳寡糖新西兰兔腓总神经
大鼠骨髓基质细胞向Schwann细胞分化后蛋白表达变化的研究被引量:1
2009年
近年来很多研究报道大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,MSCs)可以向神经细胞或神经胶质细胞分化,其中多数研究观察了细胞形态以及几种神经相关蛋白的免疫反应,也有报道用基因组学方法分析MSCs诱导过程中基因谱的表达变化.尚未见报道用蛋白质组学方法分析MSCs在诱导过程中蛋白谱的表达变化.本研究利用蛋白质组学技术分析MSCs向Schwann细胞样细胞诱导分化过程中蛋白谱的表达变化.从成年SD大鼠的股骨和胫骨中分离培养MSCs,应用复合诱导因子体外连续诱导MSCs向Schwann细胞样细胞分化.采用2-DE技术分离未诱导和诱导分化后MSCs总蛋白,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱得到相应的肽质量指纹图谱,搜索数据库分析差异蛋白质点.所得到的MSCs蛋白谱有792个蛋白点,通过PDQuest软件分析诱导前后MSCs的蛋白谱,初步分析发现有74个蛋白质的表达发生了明显的变化,其中43个蛋白表达上调,31个蛋白表达下调.本研究通过质谱分析并进行网上数据库搜索匹配,初步分析发现这些蛋白主要包括骨架和结构蛋白、生长因子类的蛋白、代谢相关蛋白及酶类、伴侣蛋白、受体类蛋白、细胞周期蛋白、钙结合蛋白以及其他蛋白等.研究表明,MSCs体外条件诱导分化过程中有较多蛋白表达发生变化;其中与神经细胞和神经胶质细胞相关蛋白:BDNF,CNTF,GFAP等在MSCs体外条件诱导分化后中表达明显上调;本研究从蛋白质水平为MSCs体外向Schwann细胞样细胞条件诱导提供了新的研究资料。
李文婷孙华林许增禄丁斐顾晓松
关键词:分化蛋白组学
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