国家自然科学基金(81260142)
- 作品数：9 被引量：32H指数：4
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- 凋亡在糖皮质激素性骨质疏松症中的研究进展被引量：6
- 2017年
- 糖皮质激素(glucocorticoid,GC)是临床最常用的药物之一,由于良好的抗炎、抗风湿、抗休克和免疫抑制作用而广泛用于风湿性疾病、呼吸系统疾病等的治疗,同时GC在骨重建过程中也发挥着重要的作用。然而长期应用GC会导致许多并发症,其中骨量丢失尤其是骨质疏松性骨质疏松(GIOP)是最为严重的并发症。凋亡对保持组织的健康和正常生长具有十分重要的意义,但异常的凋亡就可能造成机体损伤。基于细胞凋亡的形态特征和分子改变过程,有很多种方法可进行细胞凋亡的检测。近年来的研究发现成骨细胞是GC主要的作用靶点,GC主要是通过抑制成骨细胞介导的骨形成,造成了骨量的丢失,其中成骨细胞凋亡可能是GC抑制骨形成的主要环节,现就凋亡在GIOP中的作用及作用机制进行综述,为提高临床对GIOP的认识提供帮助。
- 丁香莹梁敏
- 关键词：凋亡成骨细胞糖皮质激素性骨质疏松症
- 二甲双胍对SD大鼠骨密度和体成分作用的研究被引量：3
- 2020年
- 目的观察不同剂量二甲双胍作用不同时间对SD大鼠骨密度和体成分的影响。方法60只3月龄SD大鼠按随机数字法分为对照组和二甲双胍100 mg/(kg·d)组、200 mg/(kg·d)组、300 mg/(kg·d)组、500 mg/(kg·d)组。每组12只。每日灌胃1次。分别于干预前,干预后4周、8周、12周测定大鼠全身骨密度及体成分。结果干预8周和12周,不同剂量二甲双胍组骨密度均高于对照组(P<0.05)。干预8周,不同剂量二甲双胍组骨密度均高于4周组(P<0.05);干预12周,二甲双胍200 mg/(kg·d)组和300 mg/(kg·d)组骨密度均高于8周组(P<0.01)。干预12周,不同剂量二甲双胍干预组体重均低于对照组(P<0.01),二甲双胍500 mg/(kg·d)组体重低于100 mg/(kg·d)组和200 mg/(kg·d)组(P<0.05)。干预8周,不同剂量二甲双胍组脂肪含量均低于对照组(P<0.05);干预12周,不同剂量二甲双胍组脂肪含量均低于对照组(P<0.05),二甲双胍300 mg/(kg·d)组脂肪含量低于100 mg/(kg·d)组和200 mg/(kg·d)组(P<0.01),二甲双胍300 mg/(kg·d)组和500 mg/(kg·d)组脂肪含量均低于8周组(P<0.05)。干预12周,二甲双胍200 mg/(kg·d)组和300 mg/(kg·d)组肌肉含量均高于对照组(P<0.05)。结论二甲双胍可增加SD大鼠的骨密度和肌肉含量,减少脂肪含量和减轻体重,与干预时间和剂量有关。
- 张书蔡劲薇梁敏
- 关键词：二甲双胍骨密度体成分
- 维生素D、骨钙素与2型糖尿病患者胰岛功能相关性研究进展被引量：6
- 2017年
- 随着社会人口老龄化进程的加速和人们生活方式的改变，糖尿病的发病率逐年升高。荟萃分析显示，我国2型糖尿病（type 2 diabetes meilitus，T2DM）发病率由2000-2004年的7．1％增加至2010-2014年的10．1％，呈逐年增长趋势。糖尿病发病率不仅在发展中国家不断增长，在发达国家，
- 陈明慧梁敏
- 关键词：维生素D骨钙素2型糖尿病胰岛功能
- 酶消化法联合组织块法培养大鼠原代成骨细胞被引量：5
- 2017年
- 背景:获取高纯度、高活性的成骨细胞是进行骨代谢研究的基础。目的:探索一种简便、高效的原代成骨细胞培养方法。方法:将新生24 h内的SD大鼠,分离获取颅骨的顶骨和额骨,预先采取胰酶和胶原酶消化,再进行组织块培养的方法提取成骨细胞。通过倒置相差显微镜和透射电镜观察细胞形态,细胞计数绘制细胞生长曲线,采用碱性磷酸酶BCIP/NBT染色和茜素红矿化结节染色进行成骨细胞鉴定。结果与结论:(1)细胞形态呈长梭形、三角形、不规则多边形,有两至三个细胞突起;(2)透射电镜下线粒体和内质网在成骨细胞中非常丰富,并且有较多细胞突起,呈现出典型成骨细胞特点;(3)细胞刚接种时生长缓慢,3 d后增殖加快,第7天达高峰;(4)碱性磷酸酶BCIP/NBT染色显著阳性,茜素红钙结节染色橘红色;(5)采用酶消化法联合组织块法提取的细胞具有典型的成骨细胞特征和功能,是一种理想的原代成骨细胞分离培养方法。
- 丁香莹蔡劲薇潘吉铭梁敏
- 关键词：骨细胞原代培养酶消化法组织块法国家自然科学基金
- 糖皮质激素性骨质疏松大鼠模型建立的研究被引量：6
- 2013年
- 目的:建立糖皮质激素性骨质疏松症(GIOP)动物模型。方法:3.5月龄Sprague Dawley(SD)大鼠40只,随机分成模型组和对照组,每组20只,雌雄各半。模型组予肌肉注射地塞米松2.5mg/kg,每周2次,连续9周;对照组予肌肉注射等量的生理盐水。两组均每周测一次体重。于9周结束时用双能X射线吸收法(DXA)测定大鼠活体整体骨密度和离体股骨的骨密度;股骨切片镜下观察骨小梁变化。结果:①模型组死亡率(40%)较对照组(10%)显著升高(P<0.05),模型组雌性大鼠死亡为2/10,雄性大鼠死亡为6/10,雌雄死亡率之比为1∶3。②大鼠活体整体骨密度和离体股骨的骨密度变化一致,模型组骨密度均较对照组明显降低(P<0.05)。模型组股骨切片显微镜下观察见骨小梁变细、稀疏、断裂、排列紊乱。结论:肌肉注射地塞米松2.5mg/kg,每周2次,共9周,可成功建立GIOP大鼠模型,测定活体整体和离体股骨的骨密度可用于评价GIOP模型。
- 田丽花梁敏张劼冼晶黄松蔡劲薇罗佐杰
- 关键词：骨质疏松糖皮质激素大鼠模型
- 地塞米松诱导体外培养成骨细胞凋亡作用机制的研究被引量：1
- 2018年
- 目的研究地塞米松对体外培养的成骨细胞增殖和凋亡的影响，及其可能的作用机制。
方法体外分离培养SD大鼠成骨细胞，观察细胞形态，应用碱性磷酸酶染色法和茜素红染色法鉴定成骨细胞。取1~3代对数生长期细胞，分为空白对照组、低剂量地塞米松组（10-8 mol/L）、中剂量地塞米松组（10-7 mol/L）、高剂量地塞米松组（10-6 mol/L），分别干预12、24、48 h，运用Cell Counting Kit-8法检测细胞增殖情况，采用Annexin V/PI双染法流式细胞术检测细胞凋亡率，免疫荧光法观察细胞核的形态和caspase-3的表达，蛋白质印迹法检测Bcl-2、Bad、caspase-3、磷酸化Akt的表达。采用单因素方差分析，两两比较方差齐采用LSD-t法进行统计分析。
结果10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6 mol/L地塞米松能抑制成骨细胞增殖，以48 h最为明显（A值分别为：0.980±0.028，0.798±0.057，0.728±0.031），与空白对照组（1.143±0.017）相比，差异有统计学意义（t=5.454，11.555，13.908；P均〈0.05）；不同浓度地塞米松干预48 h后，成骨细胞凋亡率逐渐升高。与空白对照组[（4.1±0.8）%]相比，10-8 mol/L地塞米松组细胞凋亡率[（4.9±1.2）%]升高差异无统计学意义（t=0.470，P〉0.05），10-7 mol/L、10-6 mol/L地塞米松组的成骨细胞凋亡率分别为（9.8± 2.6）%、（12.4±2.6）%，呈显著性升高（t=3.508，5.140，P均〈0.05）；免疫荧光检测结果显示，不同时间地塞米松作用后，成骨细胞caspase-3表达逐渐增强，其中10-7 mol/L、10-6 mol/L地塞米松组的caspase-3表达显著增加（t=4.320，t=8.475；P〈0.05）；蛋白质印迹法检测结果显示，地塞米松干预浓度为10-7 mol/L和10-6 mol/L时，Bcl-2蛋白表达分别较空白对照组减少53.8%、78.4%（t=4.109，5.988；P〈0.05），p-Akt蛋白表达分别减少37%、49.6%（t=2.067，3.491；P〈0.05），Bad蛋白表达分别增加276.9%、334.8%（t=7.342，8.872�
- 潘吉铭蔡劲薇伍龙果梁敏
- 关键词：地塞米松骨质疏松P13K/AKT
- 25(OH)D_3、维生素D受体与糖皮质激素性骨质疏松关系的研究被引量：4
- 2015年
- 目的观察地塞米松(Dex)不同作用时间对大鼠骨量、骨组织维生素D受体(VDR)和血清25羟维生素D3(25(OH)D3)的影响。方法 40只3.5月龄的sprague-dawley(SD)雌性大鼠,随机分为Dex组和对照组,每组20只,分别干预4周和9周。Dex组肌肉注射Dex 2.5 mg/kg,每周2次,对照组注射等量生理盐水。干预4周和9周分别用双能X线骨密度仪测骨密度,逆转录聚合酶链反应和免疫组化法检测骨组织VDR mRNA和蛋白的表达水平,用ELISA法检测血清25(OH)D3的含量。结果干预4周,Dex组大鼠体重下降(56.67±24.43)g,9周下降(85.83±26.35)g(P<0.05);Dex组体重低于对照组(P<0.01)。干预9周,Dex组骨密度低于对照组(P<0.05)。干预4周,Dex组大鼠骨组织VDR mRNA表达高于对照组(1.48±0.32 vs 1.15±0.19)(P<0.05);9周,Dex组大鼠骨组织VDR mRNA表达低于对照组(1.07±0.35 vs 1.38±0.29)(P<0.05)。Dex组大鼠骨组织VDR蛋白表达在4周和9周与对照组均无差异(P>0.05)。干预4周,Dex组血清25(OH)D3含量与对照组无差异(P>0.05);9周,Dex组血清25(OH)D3含量低于对照组(P<0.05)。结论 SD大鼠肌肉注射Dex2.5mg/kg,每周2次,9周能成功建立糖皮质激素性骨质疏松模型。Dex可能通过减少VDR的转录和25(OH)D3的含量来引起骨密度下降,导致骨质疏松的发生。
- 田丽花张劼黄松蔡劲薇冼晶梁敏
- 关键词：糖皮质激素骨密度VDR25(OH)D3
- 不同剂量和作用时间地塞米松对大鼠骨密度和成骨细胞作用的研究被引量：1
- 2018年
- 目的观察地塞米松(Dex)不同剂量及不同作用时间对大鼠骨量、成骨细胞的影响。方法 120只3月龄SD雌性大鼠,随机分对照组(生理盐水)、小剂量组(地塞米松1 mg/kg)、中剂量组(地塞米松2.5 mg/kg)、高剂量组(地塞米松5 mg/kg),每组30只,2次/周肌内注射,分别干预4 w、9 w、12 w。给药前及干预后采用双能X线骨密度仪测大鼠全身骨密度(BMD),免疫组化法检测骨组织碱性磷酸酶(ALP)、I型胶原蛋白表达。从新生SD大鼠颅骨体外分离培养成骨细胞,随机分为5组:空白对照组、5×10-8mol/L Dex组、5×10-7mol/L Dex组、5×10-6mol/L Dex组、5×10-5mol/L Dex组,分别培养12h、24 h、48 h后,采用CCK8法检测成骨细胞增殖,采用RT-PCR检测成骨细胞ALP mRNA、I型胶原mRNA表达。结果 (1)干预4 w,不同剂量Dex组大鼠的骨密度与对照组无差异(P>0.05)。干预9 w,不同剂量Dex组大鼠的骨密度均低于对照组(P<0.05),高剂量组大鼠骨密度低于小剂量组(P<0.05);干预12 w,不同剂量Dex组大鼠的骨密度均低于对照组(P<0.05),且随着剂量的增加,大鼠的骨密度逐渐降低。(2)干预4 w,ALP、I型胶原蛋白表达与对照组无差异(P>0.05);干预9w,中剂量和高剂量组大鼠骨组织I型胶原蛋白表达均低于对照组(P<0.05),不同剂量组大鼠骨组织ALP蛋白表达均低于对照组(P<0.05);干预12 w,大鼠骨组织ALP、I型胶原蛋白表达均低于对照组(P<0.05);随着Dex剂量的增加,大鼠骨组织ALP及I型胶原蛋白表达逐渐降低。(3)体外分离培养成骨细胞干预12 h,5×10-6mol/L Dex和5×10-5mol/L Dex均抑制成骨细胞增殖(P<0.05),5×10-5mol/L Dex组成骨细胞的ALP、I型胶原mRNA表达减少(P<0.05);干预24 h及48 h,不同浓度Dex均明显抑制成骨细胞增殖(P<0.05),ALP、I型胶原mRNA表达明显减少(P<0.05),呈剂量和时间依赖性。结论地塞米松可能通过抑制成骨细胞的增殖及骨形成,导致SD大鼠骨密度降低。
- 吴丽婷蔡劲薇潘吉铭伍龙果梁敏
- 关键词：地塞米松骨密度成骨细胞骨形成
- 地塞米松对大鼠骨密度及体成分的影响被引量：1
- 2014年
- 目的探讨不同剂量地塞米松对大鼠骨密度(BMD)和体成分的影响。方法 3月龄SD雌性大鼠40只,按随机数字表法分为对照组(生理盐水),地塞米松低剂量组(1 mg/kg)、中剂量组(2.5 mg/kg)和高剂量组(5 mg/kg),每组10只,每周2次肌内注射。给药前、给药4周后应用DEXA骨密度仪测定大鼠全身BMD和体成分。结果干预1～4周后不同剂量地塞米松干预组体质量均较对照组下降(P<0.01)。干预4周后,对照组总BMD、股骨BMD、总骨矿含量(BMC)及全身、躯干、腿部脂肪含量均较干预前增加(P<0.01),全身、躯干肌肉含量均较干预前下降(P<0.01);低剂量组、中剂量组大鼠股骨BMD、总BMC、腿部脂肪含量、腿部肌肉含量均低于对照组(P<0.05);低剂量组、中剂量组股骨BMD、腿部脂肪含量均低于高剂量组(P<0.05)。结论中、低剂量地塞米松对SD大鼠股骨BMD及腿部成分的影响更大。
- 刘思瑶张劼黄松冼晶罗佐杰梁敏
- 关键词：地塞米松骨密度身体成分
