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国家重点基础研究发展计划(2011CB944302)
作品数:
2
被引量:1
H指数:1
相关作者:
李喜霞
郑乔松
季韶洋
张君
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睾丸高表达蛋白质HSD13调节CHO细胞系周期进程
2013年
目的研究HSD13蛋白的组织表达定位及其对细胞周期的影响。方法利用王琳芳教授实验室构建的人睾丸特异ESTs文库,通过电子克隆方法获得一新基因命名为HSD13。通过Northern和Western印迹方法检测HSD13蛋白在不同组织中的表达,并用免疫组化观察其在小鼠睾丸组织中的表达定位。通过构建HSD13过表达的CHO稳定细胞系,用双胸苷阻断法并结合流式细胞术检测对细胞周期的影响。结果电子克隆获得HSD13基因。HSD13蛋白在睾丸组织中高表达,主要定位于生精细胞中的精原细胞和初级精母细胞。成功构建HSD13过表达和对照的CHO稳定细胞系,过表达HSD13蛋白可以显著加快细胞G2/M期进程。结论 HSD13蛋白于睾丸中精子发生早期表达,其过表达能够加速细胞周期进程。
宋伟
胡廷徽
缪时英
王琳芳
关键词:
精子发生
细胞周期
流式细胞术
Sf1,Wnt和cAMP信号通路协同参与抑制素α基因转录的调控
被引量:1
2013年
抑制素仪是抑制素组成性蛋白的亚基之一.它广泛表达于睾丸、卵巢和肾上腺.敲除抑制素α亚基的雄性小鼠常具有性腺基质细胞瘤的表型,这提示,抑制素α亚基可能在性腺发育过程中发挥重要的作用.据报道,类固醇生成因子1(Sf1)能与Wnt或cAMP信号通路协同诱导抑制素α亚基的表达,然而Sf1,Wnt和cAMP信号通路协同调控抑制素α亚基表达的分子机制仍然未知.本研究发现,cAMP和wnt信号通路对于协同Sf1转录调控抑制素α亚基的表达是至关重要的.抑制素α亚基启动子上的CRE位点(cAMP反应元件)的特异突变,能够完全消除Sf1和wnt信号通路的协同调控作用.本研究还发现,cAMP信号通路参与的协同调控抑制素α亚基的表达是通过CRE结合蛋白(CREB-1)介导实现的.利用CREB-1特异的shRNA敲降CREB-1的蛋白水平,能够消除cAMP信号通路参与的协同调控抑制素α亚基的表达.此外,特异的突变Sf1蛋白配体结合域(LBD区)的氨基酸残基235—238能够影响Sf1和cAMP信号通路协同调控抑制素α亚基的转录表达,这表明,Wnt信号通路参与了Sf1和cAMP信号通路协同调控抑制素α亚基转录表达的过程.
季韶洋
李蕾
李喜霞
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陈军
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刘以训
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