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国家自然科学基金(81071773)

作品数：4 被引量：6H指数：2
相关作者：刘健林晨王海娟钱海利孟希亭更多>>
相关机构：中国医学科学院肿瘤医院中国人民解放军总医院大连大学附属中山医院更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生生物学环境科学与工程更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学
  • 2篇医药卫生
  • 1篇环境科学与工...

主题

  • 3篇MTA1
  • 2篇基因
  • 1篇单克隆
  • 1篇食管
  • 1篇食管癌
  • 1篇食管癌细胞
  • 1篇食管癌细胞系
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤转移
  • 1篇转基因
  • 1篇转基因小鼠
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞系
  • 1篇小鼠
  • 1篇芯片分析
  • 1篇克隆
  • 1篇基因芯片
  • 1篇基因芯片分析
  • 1篇过表达
  • 1篇癌细胞

机构

  • 2篇中国医学科学...
  • 1篇首都医科大学...
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇中国医学科学...
  • 1篇大连大学附属...

作者

  • 3篇钱海利
  • 3篇王海娟
  • 3篇林晨
  • 3篇刘健
  • 2篇付明
  • 2篇张雪燕
  • 2篇孟希亭
  • 1篇常亚楠
  • 1篇黄常志
  • 1篇薛洪省
  • 1篇梁萧
  • 1篇梁肖
  • 1篇赵玫
  • 1篇张金龙
  • 1篇胡毅
  • 1篇赵志龙
  • 1篇詹启敏
  • 1篇张素洁
  • 1篇张丽

传媒

  • 2篇癌症进展
  • 1篇The Ch...
  • 1篇中国比较医学...

年份

  • 1篇2013
  • 3篇2012
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
MTA1转基因小鼠的构建及鉴定被引量：2
2013年
目的将人的MTA1外源基因整合到C57BL/6J小鼠中,构建稳定高表达MTA1的小鼠模型。方法通过RT-PCR方法克隆人的MTA1编码序列,将MTA1插入真核表达载体pcDNA3.1构建pcDNA3.1-MTA1载体,回收片段后利用显微注射技术将目的基因片段注入到受精卵的雄原核中,使用MTA1特异性的引物经PCR鉴定出基因型阳性的转基因小鼠,再利用Western-blot及免疫组化方法检测MTA1在转基因小鼠全身级织表达情况。结果成功构建了MTA1转基因注射片段。在320枚显微注射受精卵中挑选出300枚存活卵移植到10只ICR小鼠假孕受体的输卵管中,10只ICR小鼠均怀孕,移植成功率为100%,共生出子代鼠80只,经PCR检测其中共有9只整合了MTA1基因,整合率为11.25%。经PCR鉴定MTA1整合阳性的F1代小鼠,再经Western-blot和免疫组化分析检测MTA1表达水平在脑、肺、肝、肠等组织中表达明显增高,肾、骨骼肌表达无差异。结论成功构建了脑、肝、肺、结肠高表达MTA1的转基因小鼠,为进一步MTA1研究奠定了良好的研究模型。
薛洪省王海娟刘健张丽林晨詹启敏赵志龙钱海利
关键词：MTA1转基因
以双质粒逆病毒载体系统快速建立梯度过表达hMTA1稳转单克隆细胞系的方法被引量：1
2012年
目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库,以阳性克隆为模板,RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础,经过多次酶切连接,构建逆病毒表达载体pMX-MTA1-flag-IRES-EGFP。将构建好的逆病毒载体系统,转染293-gag/pol细胞,包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞,获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿,获得大量单克隆细胞系,以GFP为筛选标志,筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、Western Blot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关,相关系数r=0.932,P<0.01。结论利用逆病毒表达系统,快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系,为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。
刘健王海娟张金龙常亚楠孟希亭张雪燕梁肖付明赵玫林晨黄常志钱海利
关键词：MTA1GFP单克隆
食管癌细胞系KYSE150中RNA干扰MTA1的基因芯片分析被引量：3
2012年
目的探讨MTA1对食管癌转移相关基因的影响。方法用RNA干扰的方法在食管癌细胞系KYSE150中沉默MTA1基因的表达,随后进行转移相关基因芯片分析。以两次芯片分析中均上调2倍以上(或下调1/2)为差异显著基因。通过DIVID生物信息学数据库进行gene ontology的通路分析。结果在两次基因芯片分析中均有意义上调的基因共有7个,分别是LAMC1、MMP14、MMP15、MDM2、API5、ODC1、PTGS2;而两次均显著下调的基因共有14个,它们是CSF1R、HGF、IGF2、ITGA6、MMP9、MMP11、MMP13、CASP8、CTSD、TMPRSS4、THBS2、TIMP1、ENPP2、SNCG。通过在DAVID生物信息学数据库中对上述表达差异显著的基因进行通路分析,结果提示差异基因主要富集在5条信号通路上,分别是肿瘤信号通路(MDM2、CASP8、CSF1R、HGF、ITGA6、LAMC1、MMP9、PTGS2)、ECM受体整合信号通路(LAMC1、THBS、ITGA6)、基质金属蛋白酶信号通路(TIMP1、MMP9)、小细胞肺癌信号通路(ITGA6、Cox2)和黏着斑信号通路(ITGA6、HGF、IGF2)。结论 MTA1参与了转移相关的一系列分子改变事件,尚需进一步的分子生物学方法验证这些基因调控的信号途径。
张素洁王海娟刘健张雪燕梁萧孟希亭付明林晨胡毅钱海利
关键词：MTA1肿瘤转移食管癌RNA干扰基因芯片
Hypotheses explaining cancer metastasis
2012年
Cancer metastasis is the most important factor causing patients death. Cancer diseases will be controllable if metastasis does not happen. Concerning the mechanism of cancer metastasis, there are still many points to be clarified. Currently, the mechanism of cancer metastasis has been explained from several aspects of its biological behaviors. Here we briefly summarized some newly-developed metastasis models to provide a global glance at this topic.
Haijuan WangChen LinHaili Qian
关键词：METASTASISDORMANCY
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