国家高技术研究发展计划(2006AA02A119)
- 作品数：9 被引量：20H指数：3
- 相关作者：金岩余春艳刘世宇李娟兰青艳更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学唐都医院第四军医大学口腔医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划陕西省社会发展科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 天然聚合物胶原、硫酸软骨素、透明质酸在组织工程真皮支架材料中的研究进展被引量：2
- 2008年
- 王伟红陆伟余春艳金岩
- 关键词：胶原硫酸软骨素透明质酸真皮
- 胶原-硫酸软骨素-透明质酸真皮支架材料修复兔角膜基质缺损的研究被引量：4
- 2009年
- 目的探讨以角膜基质细胞与胶原-硫酸软骨素-透明质酸(Collagen-chondroitin sulfate-hyaluronic acid,Co-CS-HA)真皮支架材料复合共培养构建组织工程化角膜基质的可行性,为寻找理想的组织工程角膜支架提供依据。方法先行制备Co-CS-HA真皮支架材料,对其进行扫描电镜、孔隙率、体外降解性、力学性能和细胞增殖的检测和分析。培养兔角膜基质细胞,将其与上述材料复合共培养构建组织工程角膜基质,行兔角膜板层移植。术后大体观察植片和新生血管状况,并于术后第8周取材行组织学观察。结果所制备的Co-CS-HA真皮支架材料为白色海绵状结构,其孔径为(109±11)μm,孔隙均匀并有广泛的交通孔,孔隙率为(94.75±0.39)%。体外降解性和力学性能检测结果显示材料的强度和抵抗酶解的能力显著提高。MTS结果表明,材料对角膜基质细胞的增殖有明显促进作用。兔角膜板层移植后,组织工程角膜植片与宿主角膜组织相融性良好,能够部分修复并填充角膜基质缺损,但直到8周取材时仍留有大量的角膜新生血管。结论本实验室制备的Co-CS-HA真皮支架材料符合支架材料的理化和生物学要求,可一定程度修复兔角膜基质缺损,但在维持角膜的透光度方面仍存有缺陷,眼科应用还需进行更深入研究。
- 王伟红张米许小林余春艳金岩
- 关键词：胶原硫酸软骨素透明质酸角膜基质
- 用两种毛囊细胞构建细胞团以再生毛囊的初步研究
- 2011年
- 目的:探索体外制备毛乳头细胞和隆突部细胞复合而成的细胞团在体内构建毛囊的可行性。方法:分别分离培养毛囊毛乳头细胞、隆突部细胞,利用毛乳头细胞混合I型胶原制作细胞团包裹隆突部细胞团,移植于大鼠肾被膜下。结果:移植后的混合细胞团内有毛囊样结构产生。结论:毛乳头细胞和隆突部细胞复合形成的细胞团有生成毛囊的潜力,为组织工程皮肤中构建毛囊做了进一步铺垫。
- 韦蔚刘世宇金岩
- 关键词：毛乳头细胞毛囊
- 旋转发生器培养扩增人皮肤成纤维细胞被引量：1
- 2011年
- 目的:研究旋转发生器扩增人皮肤成纤维细胞的可行性。方法:利用组织贴壁法从人皮肤中分离出人真皮成纤维细胞(hDFBs),使用DIO标记细胞后结合微载体在旋转发生器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的状况使用荧光显微镜、扫描电镜观测。并且检测细胞周期和分析细胞群体倍增时间,以比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。对照组细胞按常规平面培养。结果:在旋转发生器的微重力培养体系中,人成纤维细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,旋转发生器培养的细胞倍增时间为(2.99±0.50)d,对照组为(3.43±0.42)d(P<0.05);旋转发生器培养细胞增殖指数48.2±4.3,对照组35.2±3.4。结论:利用生物反应器和微载体悬浮培养人皮肤成纤维细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。
- 晁洋倪华兰青艳李娟王卫华金岩
- 关键词：微载体人真皮成纤维细胞
- 使用旋转式生物反应器体外扩增人表皮细胞被引量：1
- 2011年
- 目的:使用Cytodex-3微载体和高截面纵横比的旋转式生物反应器容器作为培养系统大规模扩增人表皮细胞(hECs)。方法:使用中性蛋白酶和胰蛋白酶-EDTA两步骤法从人皮肤中分离出人表皮细胞,使用DIL标记细胞后结合微载体后在旋转式生物反应器(RCCS)中培养,细胞贴附微载体的生长状态使用倒置显微镜,扫描电镜观测。并且分析细胞群体倍增时间来比较微重力培养与平面培养的体外增殖能力差异。结果:在旋转式生物反应器的微重力培养体系中,人表皮细胞能快速贴附到微载体表面,在培养过程中达到很大的细胞密度,并且表现出很强的增殖能力和细胞活性。结论:使用旋转式生物反应器和微载体悬浮培养人表皮细胞,是大量制备皮肤组织工程种子细胞的一种有效方法。
- 晁洋倪华兰青艳李娟王卫华金岩
- 关键词：微载体人表皮细胞
- 人羊膜上皮干细胞对皮肤增生性瘢痕形成的作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨人羊膜上皮细胞的干细胞对皮肤增生性瘢痕形成的作用。方法从足月分娩的人胎盘中剥离羊膜,采用胰蛋白酶消化法分离人羊膜上皮干细胞(human amniotic epithelial stem cells,hAECs),并在体外使用含表皮生长因子的LG-DMEM培养基进行培养,利用免疫荧光染色、流式细胞术和定向诱导等鉴定人羊膜上皮细胞的干细胞特性。构建兔耳全层皮肤缺损模型,左耳创面注射磷酸盐缓冲液(PBS)作为对照组,右耳创面注射羊膜上皮细胞悬液为实验组。结果实验中hAECs表达干细胞标志物SSEA-4和OCT-4,并表达间充质干细胞表面标记物,具有多向分化潜能。1个月后,兔子右耳瘢痕比左耳瘢痕薄,HE染色示:移植干细胞组有效的抑制了增生性瘢痕的形成,纤维化面积较小。在激光共聚焦细胞仪下可发现移植的hAESCs存活。结论人羊膜上皮细胞可以促进创面愈合,减少炎症反应,有效抑制兔耳创面瘢痕的形成。这可能成为瘢痕预防和治疗的新手段和切入点。
- 江兰刘世宇李海建余春艳金岩
- 关键词：人羊膜上皮细胞增生性瘢痕纤维化
- 利用组织工程双层皮肤修复糖尿病溃疡的研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨组织工程双层皮肤修复糖尿病溃疡的效果。方法利用同种异体的皮肤表皮细胞和皮肤成纤维细胞分别作为表皮和真皮的种子细胞制备组织工程双层皮肤,选取已制备的溃疡面积相当的糖尿病溃疡动物模型20例,随机分为实验组和对照组各10例,临床选取26例溃疡面积差异无统计学意义的糖尿病患者,随机分为试验组和对照组各13例,分别将制备的皮肤用于动物模型和用于临床糖尿病足溃疡患者,同时控制血糖,对溃疡进行清创处理,以制备的组织工程双层皮肤覆盖创面,行常规护理;对动物模型的创面愈合情况和临床创面愈合效果分别进行统计和分析。结果动物实验中,实验组愈合速度明显快于对照组,平均愈合时间较对照组提前6 d,实验组与对照组愈合时间差异有统计学意义(F=0.178,P>0.05,方差齐,t=-10.919,P<0.05);移植4周时,实验组愈合率为60%,对照组10例均未完全愈合,愈合率为0,两组愈合率比较差异有统计学意义(t=0.011,P<0.05)。临床试验中,移植6周时,试验组愈合率为84.6%;对照组愈合率为23.1%,两组比较差异有统计学意义(χ2=0.001,P<0.05)。试验组的平均愈合时间为43.25 d,对照组的平均愈合时间为76.69 d,与对照组相比,试验组创面的平均愈合时间缩短了约33 d,对照组的愈合速率较试验组明显缓慢,试验组与对照组的创面愈合时间差异有统计学意义(方差齐性检验结果,χ2=16.971,P<0.05,方差不齐,χ2=7.649,P<0.05)。结论应用组织工程双层皮肤修复糖尿病足溃疡是一种切实可行的临床治疗方法。
- 肖厚安凡孝菊周小茜鲁美茹张丽安鸿肇刘晨王煜高淑萍
- 关键词：糖尿病溃疡表皮细胞成纤维细胞动物实验
- 联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞增殖和形态的影响
- 2007年
- 目的:观察体外联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞形态和增殖的影响,为研究成纤维细胞和平滑肌细胞生物学特性和相互关系以及体外构建含此两种细胞的组织工程皮肤提供理论和实践基础。方法:在体外分别分离培养成纤维细胞和平滑肌细胞并常规传代培养。模拟组织工程皮肤的结构及成纤维细胞和平滑肌细胞间的相互影响途径,按照不同比例(平滑肌细胞:成纤维细胞=1:1,1:2,1:3)建立以胶原凝胶为基质的成纤维细胞与平滑肌细胞联合培养模型。应用荧光标记、组织学观察和MTT法对平滑肌细胞的形态和代谢进行研究。结果:联合培养模型法可以有效地建立起成纤维细胞和平滑肌细胞的相互影响模式。1:1组的成纤维细胞对联合培养的平滑肌细胞增殖有促进作用,1:3组的促增殖作用则不明显。结论:1:1联合培养的成纤维细胞对平滑肌细胞增殖有促进作用,对它们体外培养和扩增以及相互关系的研究对阐明这两种细胞组合作为真皮替代物种子细胞具有重要的意义。
- 冯雅琴黄沙余春艳汪海伦冯枫邹运动牛杰金岩
- 关键词：成纤维细胞平滑肌细胞胶原
- 组织工程皮肤与正常皮肤组织学差异的实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的:研究组织工程皮肤与正常皮肤表皮层组织学的差异,并探讨其意义.方法:用组织工程方法构建人全层皮肤,以正常在体皮肤作为对照,组织学、免疫细胞化学、透射电镜观察表皮层的异同.结果:组织工程皮肤与正常皮肤在组织学上有一定差异,缺少上皮钉突,CK19在组织工程皮肤成熟期表达阴性,但CK10和pan-CK在两者表达皆为阳性,透射电镜观察上皮结构接近正常皮肤.结论:组织工程皮肤表皮层与真皮层结合不如正常皮肤紧密,可能与缺少上皮钉突有关,其表皮细胞基本分化成熟.
- 李媛陆伟冀堃刘源董绍忠金岩
- 关键词：组织工程皮肤正常皮肤
