Sef(similar expression to fgf genes)作为FGF信号通路中可诱导的拮抗分子相继在斑马鱼,小鼠,和人类中被鉴定出来,并进行了相应的功能研究.目前对于Sef蛋白本身稳定性的研究还未见报道.对c-Cbl对Sef稳定性的影响进行了研究.免疫荧光实验表明Sef能够和c-Cbl蛋白在细胞中发生共定位,随后的免疫共沉淀实验证明Sef能够和c-Cbl发生相互作用.体内泛素化实验表明c-Cbl能够使Sef发生明显的泛素化作用.这种泛素化最终导致了Sef本身的剂量依赖性的降解.针对c-Cbl的siRNA表达也使Sef稳定细胞系的表达水平得到恢复.结果表明,c-Cbl对Sef的泛素化及降解可能作为一种调控拮抗因子的蛋白质水平从而最终调节信号通路的一种机制.
Novel Oncogene with Kinase-domain(NOK)是一个新的肿瘤相关基因,其结构上与受体蛋白相似,具有一个蛋白激酶结构域。过量表达NOK会导致肿瘤的产生与转移。为了更进一步研究生理状态下NOK的功能,需要制备NOK特异性的抗体。利用GST融合蛋白制备了人源NOK的多克隆抗体,并进行了纯化。检测表明所得的抗体具有很高的滴度,能够特异性检测NOK蛋白的表达。使用该抗体进行了人肺癌组织的免疫组化检测,发现该抗体能够高效识别组织内源性表达的NOK蛋白,可为肺癌的诊断提供依据。
