国家高技术研究发展计划(2006AA02A105)
- 作品数：15 被引量：33H指数：4
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- 环孢菌素A-纳米乳预处理抑制猪脂肪组织来源干细胞的凋亡
- 2013年
- 目的通过与环孢菌素A（CsA）比较，评估环孢菌素A-纳米乳（CsA—NP）预处理保护猪脂肪组织来源干细胞（ASC）抗凋亡作用及可能机制。方法采用过氧化氢（H2O2）体外诱导ASC凋亡模型，将ASC细胞分为6组：对照组（无特殊干预），单纯H2O2组，CsA或CsA—NP0．1mg／ml±H202组，CsA或CsA—NP1．0mg／ml±H202组，CsA或CsA—NP5．0mg／ml±H202组，CsA或CsA—NP10．0mg／ml±H2O2组。观察凋亡细胞形态并计算凋亡率，用流式细胞仪检测ASC细胞凋亡，用细胞计数CCK一8试剂检测细胞活性，分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶一3（caspase-3）活性，蛋白质免疫印迹法（Westernblot）检测细胞色素C表达。结果细胞形态和生化检测结果显示，采用H2O2（100~mol／L）能诱导ASC细胞凋亡，但添加CsA或CsA—NP（0．1～10．0mg／m1）预处理后细胞凋亡率均明显下降（P〈0．01），其中又以5mg／ml浓度组下降最多（与单纯H2O2比较，CsA：10．6％±2．8％比25．2％±3．8％；CsA—NP：6．2％±2．6％比25．2％±3．6％；P均〈0．01）。与CsA相同浓度组比较，CsA—NP组在1mg／ml（8．4％±3．2％比12．1％4-3．2％，P〈0．05）和5mg／ml（6．2％±2．6％比10．6％4-2．8％，P〈0．05）细胞凋亡率较低；添加CsA或CsA—NP（0．1～10．0mg／m1）预处理后细胞存活率均明显高于单纯H，0，组（P〈0．01）。同时检测CsA或CSA-NP保护细胞抗凋亡的可能机制，与单纯H。0：组比较，CsA或CsA—NP（0．1～10．0mg／m1）预处理后可下调easpase-3活性；与CSA组比较，CSA-NP组在5mg／ml浓度下调作用更为明显（1．42％±0．12％比1．68％±0．18％，P〈0．05）。Westernblot结果显示添加CSA或CSA-NP（5mg／m1）可完全抑制H2O2诱导的细胞色素c释放。结论CSA—NP预处理能保护ASC抗凋亡，可能机制是减轻细胞凋亡率，提高细胞存活率，下调caspase-3活性和抑制细胞色素
- 尹巧香裴志勇王恒赵玉生
- 关键词：干细胞环孢菌素
- 钙调神经磷酸酶抑制剂对过氧化氢诱导的干细胞凋亡的影响被引量：2
- 2014年
- 目的比较钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂FK-506和环孢菌素A(CsA)保护脂肪组织来源干细胞(AT-DSCs)抗凋亡作用及可能机制。方法采用过氧化氢(H2O2)[分浓度0(对照组)、50、100、200、300、400μmol/L H2O26组]体外诱导AT-DSCs凋亡模型,凋亡模型的评价采用磷脂酰丝氨酸结合蛋白-异硫氰酸荧光素(AnnexinV-FITC)/碘化丙啶(PI)双染流式细胞术和线粒体内跨膜电位测定法;观察AT-DSCs凋亡细胞形态;AT-DSCs细胞活性检测采用CCK-8试剂;细胞色素C的表达采用Western blot分析。结果与对照组比较,引起细胞凋亡率最高的是浓度100μmol/L H2O2(15.60%±8.50%vs 4.50%±0.88%;P<0.01);但CaN抑制剂FK-506(质量浓度1mg/mL)(9.8%±1.3%vs17.0%±1.6%,P<0.01)和CsA(质量浓度1mg/mL)(12.2%±1.2%vs 17.0%±1.6%,P<0.01)预处理后细胞凋亡率均明显下降,细胞存活率明显提高(P<0.01)。Western blot结果显示,CaN抑制剂FK-506(质量浓度1 mg/mL)和CsA(质量浓度1 mg/mL)可完全抑制H2O2诱导的细胞色素C释放。结论 CaN抑制剂能保护H2O2诱导的干细胞凋亡。可能机制是CaN抑制剂能抑制细胞凋亡,提高细胞存活率,下调细胞色素C的释放。
- 尹巧香王恒裴志勇赵玉生
- 关键词：钙调神经磷酸酶干细胞细胞凋亡抑制剂
- 干细胞移植改善心功能的旁分泌机制及治疗策略被引量：2
- 2010年
- 急性心肌梗死（acute myocardial infarction，AMI）是当前威胁人类健康的头号杀手，现有的治疗措施（药物、冠状动脉介入、冠状动脉旁路移植术）在一定程度上可恢复心肌灌注，改善心功能，但对于已坏死的心肌却无能为力。随之而来的心肌细胞凋亡及心室重构使心功能进行性恶化，预后极差。近年出现的干细胞移植为心肌再生治疗带来了新的希望。
- 裴志勇赵玉生
- 关键词：干细胞移植心功能分泌机制冠状动脉介入心肌细胞凋亡
- 地黄低聚糖联合脂肪组织来源干细胞移植治疗小型猪急性心肌梗死的疗效被引量：3
- 2016年
- 目的探讨地黄低聚糖（RGOs）联合同种异体脂肪组织来源干细胞（ASCs）移植治疗小型猪急性心肌梗死（AMI）的疗效及其可能的机制.方法经皮球囊封堵冠状动脉左前降支制备小型猪AMI模型（n=17）,随机分为4组：对照组（n=5）,RGOs组（n=4）,ASCs组（A组,n=4）及RGOs＋ASCs联合治疗组（n=4）.RGOs组及联合治疗组造模前3天及造模后1月饲以RGOs粗提物（4g,2次/天）;造模1周后（7-10d）经冠状动脉移植同种异体ASCs（0.8×106kg^-1）,对照组及RGOs组注入0.9%氯化钠注射溶液.移植后8周,延迟增强核磁共振扫描（DE-MRI）评价各组心脏结构及功能变化,荧光显微镜及激光共聚焦扫描观察ASCs存活及分化,免疫组织化学法观察梗死区微血管密度,Masson三色染色法评价梗死区纤维化程度.结果与对照组比较,联合治疗组可以明显改善左心室功能,增加梗死区室壁厚度,减小左心室质量指数及梗死体积（均P〈0.05）.病理和免疫组织化学结果显示,联合治疗组ASCs的存活多于ASCs组（P〈0.01）,并表达心肌细胞标记物（cTnT、α-actin）及血管标志物（vWF、α-SMA）.联合治疗组梗死区微血管密度明显高于其他3组（P〈0.01）.与对照组比较,ASCs组以及联合治疗组均能明显降低梗死区纤维化程度（P〈0.05,P〈0.01）.结论RGOs可以提高ASCs移植治疗小型猪AMI疗效,改善心功能,减轻左心室重构,其作用机制可能与RGOs促进ASCS增殖分化,抗纤维化有关.
- 裴志勇尹巧香张晓晶高伟苟鹏赵玉生
- 关键词：干细胞移植地黄心室重构
- 同种异体脂肪组织来源干细胞联合地黄低聚糖对心肌梗死小型猪心肌凋亡的影响被引量：1
- 2017年
- 目的探讨同种异体脂肪组织来源干细胞(ASCs)联合地黄低聚糖(RGOs)对心肌梗死(MI)小型猪心肌凋亡的影响。方法球囊封堵冠状动脉前降支制备小型猪MI模型,17头小型猪造模成功,采用随机数字表法分为4组:ASCs组(n=4),RGOs组(n=4),RGOs+ASCs组(n=4)及对照组(n=5)。造模前3天、造模后1月RGOs组及RGOs+ASCs组均饲以RGOs粗提物;造模7~10 d经冠状动脉移植ASCs,RGOs组及对照组均注入0.9%氯化钠注射溶液。移植后8周检测心肌梗死边缘区细胞凋亡(TUNEL法)及Bax、Bcl-2的表达。结果与对照组比较,RGOs组及RGOs+ASCs组心肌细胞凋亡均显著降低(P<0.05,P<0.01),三组Bax的表达均明显降低(P<0.05),RGOs组及RGOs+ASCs组Bcl-2的表达均明显升高(P<0.01)。结论 ASCs联合RGOs抑制了梗死边缘区心肌细胞凋亡。
- 裴志勇曹丹阳尹巧香高伟赵玉生
- 关键词：地黄心室重构
- 地黄低聚糖对体外培养的小型猪脂肪组织来源干细胞增殖的影响被引量：7
- 2012年
- 目的分离培养小型猪脂肪组织来源干细胞(ASCs),观察不同浓度地黄低聚糖(RGOs)对其增殖的影响。方法酶消化法及贴壁法从小型猪腹股沟脂肪组织中分离、培养ASCs,流式细胞仪检测ASCs表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105、HLA-DR的表达,CCK-8比色法观察不同浓度RGOs(0g/L、0.001g/L、0.01g/L、0.1g/L、1g/L、10g/L)对其增殖的影响。结果第4代ASCs表面抗原CD29、CD44、CD90、CD105表达呈阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达呈阴性。RGOs在0.01～1 g/L浓度范围内对体外培养的小型猪ASCs具有促增殖作用(P<0.05),最佳浓度为0.1 g/L。结论一定浓度的RGOs对体外培养的小型猪ASCs具有促增殖作用。
- 裴志勇赵玉生高伟尹巧香
- 关键词：干细胞移植地黄细胞增殖
- 老年隐性高血压患者中心动脉压及增强指数与脉搏波传导速度的相关性被引量：3
- 2017年
- 目的探讨老年隐性高血压(MH)患者中心动脉压(CAP)及增强指数(AI)与脉搏波传导速度(PWV)的相关性,为完善老年MH患者的诊疗方案提供参考。方法选择健康体检人群170例,根据《中国高血压防治指南》将其分为高血压组55例、MH组50例、对照组(血压正常)65例。观察比较三组受检者一般资料、动态血压及偶测血压情况、颈-桡动脉PWV与CAP参数。结果 MH组饮酒、吸烟、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及空腹血糖显著高于对照组(P<0.05)。MH组偶测舒张压与收缩压高于高血压组(P<0.05)。MH组颈-桡动脉PWV、AI、血压第一峰值与最小血压差(P1 Height)、增强压、收缩末压(CESP)、平均舒张压(CMDP)、平均收缩压(CMSP)、脉压(CPP)、舒张压(DBP)、收缩压(SBP)显著高于对照组(P<0.05)。颈-桡动脉PWV与LDL-C、CPP与SBP、体质量指数、TC、年龄、空腹血糖、DBP、P1 Height、CESP、AI及增强压呈正相关(P<0.05)。LDL-C、CPP及SBP为颈-桡动脉PWV的主要影响因素。结论老年MH患者CAP明显高于血压正常者,PWV明显升高。LDL-C、CPP及SBP增高为颈-桡动脉PWV的危险因素。
- 裴志勇周冬翠曹丹阳郑舒毕磊刘晓丽
- 关键词：隐性高血压
- 地黄低聚糖对过氧化氢-血清饥饿诱导的脂肪组织来源干细胞Bax/Bcl-2表达的影响被引量：1
- 2016年
- 目的探讨地黄低聚糖(RGOs)对过氧化氢-血清饥饿诱导的小型猪脂肪组织来源干细胞(ASCs)Bax、Bcl-2表达的影响。方法过氧化氢(200μM)联合血清饥饿(H2O2/SD,6 h)建立小型猪ASCs凋亡模型。RGOs(0.01 g/L、0.1 g/L、1 g/L、10 g/L)预处理12 h并继续干预6 h。Western-blot法测定细胞Bax、Bcl-2的表达。结果 RGOs在一定浓度范围(0.1 g/L^10 g/L)可以减轻H2O2/SD引起的ASCs损伤,表现在Bax表达下调,Bcl-2表达上调。结论地黄低聚糖对过氧化氢-血清饥饿诱导的脂肪组织来源干细胞的凋亡具有保护作用。
- 裴志勇张健尹巧香杨桂利赵玉生
- 关键词：干细胞移植地黄过氧化氢BCL-2相关X蛋白质
- 过氧化氢-血清饥饿诱导脂肪组织来源干细胞凋亡模型的建立被引量：2
- 2012年
- 目的探讨过氧化氢/血清饥饿(H2O2/SD)法建立脂肪组织来源干细胞(ASCs)凋亡模型的可行性。方法酶消化法及贴壁法从小型猪腹股沟脂肪组织中分离、培养ASCs,流式细胞仪检测ASCs表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105、HLA-DR的表达。采用不同浓度H2O2(100μM、200μM、400μM、600μM、800μM)联合SD作用于ASCs 6 h,Annexin V-FITC/PI、罗丹明123检测各组细胞凋亡率及线粒体内跨膜电位(ΔΨm)的变化。结果第4代ASCs表面抗原CD29、CD44、CD90、CD105表达呈阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达呈阴性。与对照组比较,不同浓度的H2O2/SD干预6 h均可引起ASCs不同程度的凋亡,而细胞凋亡率最明显的是200μM组(P<0.05),该浓度组也引起ΔΨm明显下降(P<0.01)。结论过氧化氢联合血清饥饿是一种简单有效诱导干细胞凋亡的方法。
- 裴志勇赵玉生高伟尹巧香
- 关键词：干细胞移植脂肪组织过氧化氢
- 环孢菌素A-纳米乳促进猪脂肪组织来源干细胞的增殖被引量：3
- 2012年
- 目的评估环孢菌素A-纳米乳(cyclosporine A-nanopaticals emulsion,CsA-NP)对体外脂肪组织来源干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ASCs)增殖和分化的影响。方法提取小型猪腹股沟脂肪组织经分离、消化、培养和扩增。ASCs表面标志物经流式细胞仪检测。ASCs增殖和分化采用细胞直接计数和MTT检测。结果检测结果提示ASCs分子表型CD29、CD44、CD90、CD105均呈阳性表达,而CD31、CD34、CD45、HLA-DR均呈阴性表达。CsA-NP浓度在(0.01～1.00mg/ml)之间1～3天对细胞增殖有明显促进作用(P<0.01);其中又以0.5mg/ml的CsA-NP浓度组为最佳。而5mg/ml以上抑制细胞增殖。结论 CsA-NP能促进ASCs增殖和分化,但呈现剂量、时间效应。
- 尹巧香王恒裴志勇赵玉生
- 关键词：脂肪组织来源干细胞增殖
