福建省自然科学基金(2011D005) 作品数:10 被引量:7 H指数:2 相关作者: 姚江武 左起亮 苏艳君 林昌健 张怡 更多>> 相关机构: 福建医科大学 厦门大学 更多>> 发文基金: 福建省医学创新课题 福建省自然科学基金 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
pH值、温度和离子强度对色素与人类唾液相互作用的影响 被引量:1 2012年 目的:通过表面等离子体共振(surface plasma resonance,SPR)技术在分子水平上原位、实时和动态考察pH值、温度和离子强度对茶黄素(theaflavin,TF)、姜黄素(curcumin,Cur)和矢车菊素(cyanidin,Cy)吸附于人全唾液(human whole saliva,WS)表面的影响。方法:利用表面等离子共振技术和吸附动力学原理,在SPR芯片表面自组装形成人全唾液蛋白质生物膜。通过改变实验条件,在不同的pH值、温度和离子强度条件下监测TF、Cur和Cy吸附于WS表面的响应强度。统计采用双因素方差分析和SNK-q检验,检验水平α=0.05。结果:伴随着pH值和温度的升高,三种色素在人类全唾液表面的响应强度降低,吸附量逐渐减少。当反应体系的离子强度位于5.0~12.5 mmol/L范围内时,吸附量与离子强度呈正相关,而当反应体系的离子强度低于5.0 mmol/L或高于12.5 mmol/L时,吸附量与离子强度呈负相关。结论:静电反应是色素和唾液蛋白质分子之间相互作用的主要驱动力。 林锋 姚江武关键词:唾液 色素 PH值 温度 离子强度 3种巯基蛋白酶对去磷酸化牛乳β-酪蛋白和茶黄素复合膜的清除 被引量:2 2014年 目的:采用茶黄素(theaflavin,TF)和去磷酸化牛β-酪蛋白(dephosphorylated bovineβ-casein,Dβ-CN)在芯片表面形成蛋白质/色素复合膜的模型,评估3种巯基蛋白酶(cysteine proteases,CPs),木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和无花果蛋白酶,对Dβ-CN/TF复合膜的清除作用。方法:在消散石英晶体微天平(quartz crystal microbalance with dissipation,QCM-D)上建立Dβ-CN/TF复合膜,Boltzman方程评估3种CPs水解复合膜的效率,水解前后膜变化通过原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)和接触角表征。结果:3种CPs水解复合膜的效率由大到小依次为无花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶(P<0.05)。AFM图和接触角表征结果证实,CPs能够有效地清除结合在Dβ-CN表面的TF。结论:CPs具有在牙色渍清除中潜在的应用价值。在开发口腔保健产品中该类酶值得进一步研究。 姚江武 张怡 左起亮关键词:原子力显微镜 巯基蛋白酶水解对残余蛋白质膜再吸附色素能力的影响 2014年 目的:观察蛋白质/色素复合膜和蛋白质单层膜分别经木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、无花果蛋白酶3种巯基蛋白酶(CPs)水解后再吸附色素的能力。方法:在消散因子石英微天平(QCM-D)芯片表面分别自组装构建去磷酸化牛乳β-酪蛋白(Dβ-CN)/茶黄素(TF)复合膜和Dβ-CN单层膜,经3种CPs水解后,观察残余膜的厚度及其再吸附TF的质量;用SPSS 18.0软件对结果进行单因素方差分析,非线性回归法拟合曲线分析膜厚度与TF吸附量的相关性。结果:Dβ-CN/TF复合膜和Dβ-CN单层膜分别经3种CPs水解后,其厚度均明显减少(P<0.05);残余膜再吸附TF的量也显著下降(P<0.05),膜厚度与其吸附TF的质量呈非线性正相关。结论:巯基蛋白酶可降低蛋白质残余膜与TF亲和力,在清除和预防蛋白质色渍方面具有潜在应用价值。 左起亮 张怡 姚江武福建地区天然牙表面着色沉积物的理化表征 被引量:3 2011年 目的:本实验旨在表征天然牙表面着色沉积物表面和内部的微结构及着色物粉末的化学成分。方法:通过扫描电子显微镜(SEM)对着色物表面形态结构和厚度进行观察。利用能谱仪(EDS)和X射线光电子能谱仪(XPS)分析着色物粉末的化学元素。借助于傅立叶变换红外光谱(FT-IR)和X射线衍射仪(XRD)分析色物粉末的官能团和晶体结构。结果:着色沉积物中除含有高度钙化的成分外,还含有C、O和N等有机成分及以磷酸钙盐的形式存在的P、Ca和Fe微量元素。着色沉积物在牙表面成片层样结构。结论:结果提示:着色物可能是以磷酸钙盐和大分子有机成份的混合形式沉积在天然牙的表面。 姚江武 苏艳君 林昌健关键词:天然牙 羟基磷灰石表面唾液/色素复合膜的形成 2014年 目的:采用消散因子石英晶体微天平(QCM-D)原位监测羟基磷灰石(HA)表面人全唾液(WS)/茶黄素(TF)复合膜形成的动力学过程。方法:利用电泳沉积技术(EPD)在QCM-D金芯片表面制备纳米HA涂层,并通过扫描电子显微镜(SEM)和X射线能谱(EDS)对涂层表征进行观察分析。QCM-D监测WS在HA表面及TF在WS膜表面的吸附的全过程,并判断Langmuir和Freundlich吸附等温线。结果:SEM和EDS的图证实QCM-D芯片表面形成了均匀的纳米HA涂层;Freundlich模型较Langmuir模型更适合于描述TF在WS膜表面的吸附过程(P<0.05)。结论:一定条件下,TF能够与HA涂层表面的WS膜结合并形成稳定的复合膜,促进色渍形成。 陈天来 姚江武 左起亮关键词:羟基磷灰石 唾液 茶黄素 色素与唾液相互作用的吸附动力学研究 2012年 目的通过表面等离子体共振(SPR)技术在分子水平上原位、实时和动态监测茶黄素(TF)、姜黄素(Cur)和矢车菊素(Cy)吸附于人全唾液(WS)表面的过程。方法运用SPR技术和Langmuir、Freundlich模型确定色素与WS之间的亲和力及色素吸附于WS表面的结合速率常数ka、解离速率常数kd、结合平衡常数KA和解离平衡常数KD。数据用单因素方差分析和SNK-q检验处理。结果 3种色素之间的ka、kd、KA和KD的差异具有统计学意义(P<0.05)。Freundlich模型较Langmuir模型更适合于描述色素吸附于WS表面的等温线。色素对WS表面的吸附受到特殊反应的控制,如氢键结合。色素对WS表面的亲和力为TF>Cur>Cy(P<0.05),该结果被速率常数和平衡常数所证实。结论与Cur和Cy相比较,TF显示出与WS表面高度结合的能力,提示羟基官能团在色素与唾液相互作用中有重要作用。 李水根 姚江武关键词:唾液 色素 巯基蛋白酶水解蛋白质/色素复合膜 2013年 目的:采用茶黄素(theaflavin,TF)和去磷酸化牛β-酪蛋白(dephosphorylated bovineβ-casein,Dβ-CN)在芯片表面形成蛋白质/色素复合膜的模型,评估3种巯基蛋白酶(cysteine proteases,CPs),木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶和无花果蛋白酶,对Dβ-C/TF复合膜的清除作用。方法:在消散石英晶体微天平(quartz crystal microbalance with dissipation,QCM-D)上建立Dβ-C/TF复合膜,Boltzman方程评估CPs水解复合膜的质量,水解前后膜变化通过掠角傅里叶变换红外光谱(grazing angle fourier transform infrared spectroscopy spectra,GA-FTIR)。结果:3种CPs水解复合膜的功效由大到小依次为无花果蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶(P<0.05)。红外光谱表征结果证实,CPs能够有效地清除结合在Dβ-CN表面的TF。结论:本研究表明,CPs具有在牙色渍清除中潜在的应用价值。在开发口腔保健产品中该类酶值得进一步研究。 张怡 左起亮 姚江武木瓜蛋白酶水解对β-酪蛋白膜的润湿性和构象的影响 被引量:2 2012年 目的:评价木瓜蛋白酶水解对牛β-酪蛋白(β-CN)膜的润湿性和构象的影响。方法:将β-CN通过自组装固定于芯片表面,采用消散因子石英晶体微天平(quartz crystal microbalance with dissipation,QCM-D)测量β-CN膜频率(ΔF)变化。β-CN膜水解前后的润湿性和构象变化分别通过接触角测量仪和掠角红外光谱(GA-FTIR spectra)仪测量。结果:水解后β-CN膜接触角变小,伴随酶的浓度从0.5~12.5mg/L增加,β-CN膜由疏水性向亲水性转变。FTIR测量表明β-CN膜水解后的构象发生了改变。除α-螺旋结构外,β-CN膜含有的二级结构(%)均变小,表明水解反应首先发生与β-CN分子的疏水性C端。疏水性反应和氢键结合是水解反应的主要驱动力。结论:木瓜蛋白酶水解β-酪蛋白β-CN膜导致了润湿性和构象的改变,其生物学意义有待于进一步研究。 姚江武 左起亮 林峰关键词:木瓜蛋白酶 Β-酪蛋白 润湿性 构象 不同条件下木瓜蛋白酶对唾液/色素复合膜的清除效果 被引量:1 2014年 目的:考察3种条件(离子强度、pH值和温度)下木瓜蛋白酶对羟基磷灰石(hydroxyapaptite,HA)表面人全唾液(whole saliva,WS)/茶黄素(theaflavin,TF)复合膜的水解效率。方法:通过消散石英晶体微天平(quartz crystal microbalance with dissipation,QCM-D)在芯片HA的表面构筑WS/TF复合膜,运用玻尔兹曼方程评估不同离子强度、pH值和温度下酶水解WS/TF复合膜的水解参数。结果:木瓜蛋白酶水解复合膜效率的离子强度依次为10mmol/L>100mmol/L>70mmol/L>50mmol/L>30mmol/L(P<0.05);pH值依次为pH 7.0>pH 6.5>pH 7.5(P<0.05);温度依次为35℃>25℃>20℃(P<0.05)。结论:木瓜蛋白酶水解HA表面WS/TF复合膜的效率具有离子强度、pH值和温度依赖性。 陈天来 姚江武 左起亮关键词:全唾液 茶黄素 离子强度 PH值 3种天然色素与人唾液富组蛋白5亲和力的比较 2014年 目的:本研究旨在用3种天然酚式色素——茶黄素、姜黄素和矢车菊素猝灭人唾液富组蛋白5的内源性荧光,从而在分子机制水平研究不同色素与H5之间的亲和力差异。方法:应用荧光分光光度计检测不同色素导致H5内源性的蛋白质荧光猝灭的效果。通过获得的荧光光谱,判断3种色素对H5的荧光猝灭类型并计算相应的荧光猝灭常数。数据采用单因素方差分析及SNK-q检验统计,检验水平α=0.05。结果:TF和Cur对H5的荧光猝灭类型以静态猝灭为主,同时伴随动态猝灭,而Cy对H5猝灭类型为静态猝灭。猝灭能力表现为Cy>TF和Cur(P<0.05)。结论:只有Cy会导致H5蛋白质分子构象发生改变。在溶液环境中,色素与H5之间的亲和力为Cy>TF和Cur(P<0.05)。 林锋 姚江武关键词:色素 荧光 猝灭