国家科技攻关计划(2002BA7112A16)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：王富强赵颖郑桂珍贾茜任志红更多>>
- 相关机构：华北制药集团新药研究开发有限责任公司河北师范大学中国科学院更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 产黄青霉谷胱甘肽S-转移酶基因PcgstA的克隆与鉴定(英文)被引量：1
- 2006年
- 从青霉素工业生产菌产黄青霉(Penicilliumchrysogenum)中首次克隆了一个谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因,定名为PcgstA.该基因的开放阅读框长840bp,含有两个内含子,编码一个238氨基酸残基的蛋白质.其推断的氨基酸序列与一些已经鉴定的丝状真菌GST具有50%左右的序列一致性.PcgstA的完整编码区经RT-PCR扩增、验证,插入原核表达载体pET11a,转化大肠杆菌BL21(DE3)-RP菌株,表达得到重组PcGSTA蛋白.酶活测定证实,重组PcGSTA具有GST活性,其对底物CDNB(1-chloro-2,4-dinitrobenzene)的比活为(0.159±0.031)μmol/(min·mg).利用TaqMan探针法,对PcgstA的表达情况进行了比较.结果表明,在添加了侧链前体苯乙酸的青霉素生产培养基中,PcgstA的表达水平和在不含苯乙酸培养基中的表达相比明显下调,显示了该基因与苯乙酸代谢的关系.
- 王富强郑桂珍赵颖任志红贾茜贺建功于军
- 关键词：产黄青霉谷胱甘肽S-转移酶苯乙酸
- 一个新的产黄青霉谷胱甘肽转移酶基因的克隆和鉴定被引量：1
- 2007年
- 以产黄青霉(Penicillium chrysogenum Thom)cDNA为模板,克隆得到一个新的谷胱甘肽转移酶基因PcgstB,其开放阅读框长651bp,编码216个氨基酸的蛋白质。与已知序列进行BLASTp比较显示,该蛋白具有保守的GST结构域,与烟曲霉GstB的序列一致性最高,达65%。将PcgstB与原核表达载体pTrc99A连接得到表达质粒pTrc-gstB,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导后获得以可溶形式表达的重组PcGstB蛋白。以1-chloro-2,4-dinitrobenzene(CDNB)为底物检测,确认该蛋白具有GST活性。
- 张媛王富强郑桂珍戴梦刘静赵颖任志红赵宝华贾茜
- 关键词：谷胱甘肽转移酶产黄青霉原核表达活性测定
- 微生物来源的HLE抑制剂N01 WA-735E的研究
- 2007年
- 人白细胞弹性蛋白酶抑制剂为筛选炎症和癌症的重要靶点。应用白细胞弹性蛋白酶抑制剂高通量的筛选模型对数千株放线菌进行筛选,发现了阳性菌株N01 WA-735。首先通过形态学和化学分类学鉴定其为链霉菌属。采用有机溶剂提取、硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱和结晶等方法对该菌株的发酵产物进行了分离纯化,得到活性单体化合物N01 WA-735E,通过对N01 WA-735E的理化性质和波谱数据分析,确定其结构与文献报道的化合物BE-52440A相同。该化合物对人白细胞弹性蛋白酶有很强的抑制活性,其IC50为3.02μmol/L。该化合物对人白细胞弹性蛋白酶的抑制活性国内外未见报道。
- 魏亚闪张华路新华董悦生赵宝华
- 关键词：微生物炎症链霉菌
