国家自然科学基金(81071766)
- 作品数：14 被引量：45H指数：5
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- 脑肿瘤发生过程中免疫细胞与肿瘤细胞相克相生关系的研究进展被引量：7
- 2012年
- 肿瘤与宿主免疫系统之间的相生相克关系是个尚难于理清的复杂关系。目前在从肿瘤干细胞和微生态学层面对浸润的肿瘤细胞与机体正常组织的作用系统性研究中，发现了一些值得我们进一步思考的问题，如机体免疫防御功能似乎只能在肿瘤发生前（癌前病变）起作用，一旦形成了肿瘤，特别在恶性进展阶段．非但不抑制，反而促进肿瘤生长。如果把肿瘤免疫视为宿主与肿瘤在其相互接触之初发生了剧烈攻击排斥反应的话．那么肿瘤的恶性进展则与宿主免疫队伍发生集体“哗变”相关。本综述结合文献报道和笔者的工作对此进行初步介绍。
- 崔宝乾王爱东董军黄强
- 关键词：肿瘤免疫肿瘤发生免疫细胞功能
- 双色荧光示踪胶质瘤原位移植裸鼠模型的建立及其特征分析被引量：5
- 2014年
- 目的建立红、绿双色荧光示踪的胶质瘤原位移植裸鼠模型，并分析其实用价值。方法将发红色荧光的c6胶质瘤细胞接种于绿色荧光裸小鼠脑内，动态活体荧光成像。实验结束时，取全脑做连续冰冻切片，在普通光镜、荧光显微镜和激光共聚焦显微镜下观察移植瘤组织结构。结果活体荧光显像分析显示，接种肿瘤细胞的相应部位均可见到发红色荧光的肿瘤团块影存在，且其大小随着肿瘤移植时间的延长而增大。在移植瘤组织冰冻切片中，可清晰显示肿瘤组织中存在红色、绿色和黄色等3种颜色的荧光细胞，并可在不同部位界定3种荧光细胞之间的位置关系；肿瘤细胞迁徙、定植及其与宿主细胞的融合等清晰可见；根据荧光颜色可以鉴别组成肿瘤血管的起源细胞是宿主细胞（绿色）、肿瘤细胞（红色）或者是肿瘤细胞与宿主细胞融合（黄色）。此外，肿瘤周边微环境中宿主固有的星形胶质细胞和少突胶质细胞被激活和去分化成Nestin阳性细胞。结论与传统模型比较，双色荧光示踪的胶质瘤原位移植裸鼠模型在肿瘤活体成像及研究肿瘤细胞侵袭、转移、肿瘤血管生成和肿瘤周边微环境中宿主固有细胞被激活等方面，具有更高的实用价值。
- 张金石陆朝晖费喜峰代兴亮吴金鼎万意王之敏王爱东董军兰青黄强
- 关键词：神经胶质瘤动物细胞融合
- 在SU3-RFP／GFP模型中观察胶质瘤间质细胞恶性转化被引量：4
- 2014年
- 目的 通过建立小鼠移植瘤模型及荧光蛋白示踪技术,探讨肿瘤间质细胞恶性转化的相关特性. 方法 将转染红色荧光蛋白（RFP）的人脑胶质瘤干/祖细胞SU3接种于表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠皮下,致瘤后取移植瘤组织再培养,克隆永生化的间质细胞,分析这些细胞体外生长特性、DNA合成能力、细胞染色体特征以及在BALB/c无胸腺裸小鼠中的致瘤情况. 结果 SU3-RFP干/祖细胞接种GFP裸小鼠的致瘤率为100％（12/12）.移植瘤组织再培养的细胞群中,克隆到了ihSTC-H8、ihSTC-F8和ihSTC-S2（简称H8、F8和S2）3株具有永生化特征且表达GFP和成纤维细胞标志蛋白——成纤维细胞活化蛋白（FAP）、S100钙结合蛋白A4（S100A4）的细胞,并且具备异常高的DNA合成能力和超5倍体的染色体核型（H8、F8和S2染色体条数分别为110.58±6.51、106.17±6.36和102.58±6.94）,在BALB/c无胸腺裸小鼠中达到100％（9/9）的致瘤率. 结论 异位生长在宿主皮下的SU3-RFP胶质瘤干/祖细胞具有诱导表达S100A4和FAP的间质成纤维细胞恶性转化的潜能.
- 代兴亮戴纯刚贾敬云谢涛刘兵马笑宇陆朝晖王爱东董军兰青黄强
- 关键词：肿瘤干细胞肿瘤移植间质细胞
- 胶质瘤干祖细胞招募骨髓源细胞模型的建立被引量：1
- 2014年
- 目的 建立荧光示踪骨髓重建裸小鼠模型及其在胶质瘤干祖细胞招募骨髓源细胞研究中的应用.方法 不同放射剂量辐照裸小鼠并收集辐照后外周血及骨髓数据确定清髓性骨髓毁损的最佳剂量;辐照后24 h内经尾静脉移植表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠骨髓细胞.流式检测GFP^＋细胞在骨髓及外周血中的分布,比较移植前后骨髓细胞集落形成能力、骨髓切片来评价重建骨髓功能;在此模型上原位接种红色荧光蛋白（RFP^＋）的胶质瘤干祖细胞（SU3-RFP）观察其对骨髓源细胞的影响.结果 6 Gy辐照后3-5d裸小鼠外周血白细胞数接近于0;骨髓细胞集落数与正常组比较显著减少.骨髓移植后裸小鼠外周血白细胞在28 d恢复到辐照前水平;流式结果显示骨髓和外周血中GFP^＋细胞分别为（90.95±2.05）％和（83.62±0.73）％;骨髓细胞集落数与正常组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.SU3-RFP原位移植瘤中发现GFP^＋骨髓源细胞特异性迁徙到肿瘤区域.结论 6 Gy是裸小鼠清髓性骨髓毁损的最佳剂量;GFP^＋骨髓细胞裸小鼠模型可用于示踪研究肿瘤与宿主骨髓源细胞的关系;胶质瘤干祖细胞对骨髓源细胞具有特异性招募作用.
- 施佳陈骅沈云天陈列松戴纯刚贾敬云谢涛刘兵郭辰田野陆朝晖董军兰青黄强罗良生
- 关键词：胶质瘤
- 人脑胶质瘤新生血管的细胞来源与血液流通功能的初步评价被引量：2
- 2011年
- 目的探讨胶质瘤中部分新生血管是否源于胶质瘤干细胞转分化，并初步评价其血液运输功能。方法将SHG44人脑胶质瘤细胞系接种于30只NC裸小鼠皮下和20只NC裸小鼠脑内尾状核，将SU-2细胞接种于12只表达绿色荧光蛋白的NC／C57BL／6J-绿色荧光蛋白裸小鼠的尾状核内。取移植瘤组织，石蜡切片后，分别进行CD34-PAS双染及CD31、CD34、CD133、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、人类白细胞抗原（Ki67）、HLA免疫组化染色，并结合HLA免疫荧光共聚焦显微成像对移植瘤血管进行分类，对肿瘤血管起源细胞进行鉴定。每组取3只荷瘤鼠，以活性炭颗粒混悬液行心脏灌注，对移植瘤切片进行相应的免疫组化染色，并在光镜下观察炭颗粒在肿瘤血管中的分布。结果裸小鼠移植瘤中，同时存在CD34一PAS双阳性的内皮细胞依赖型血管、CD34-PAS^＋的血管生成拟态和由肿瘤细胞与CD34^＋细胞嵌合而成的马赛克血管，炭颗粒随机分布在这些血管腔内。在人脑胶质瘤干细胞移植瘤中，CD31^＋细胞依附于血管壁腔侧面；CD34^＋细胞亦沿血管分布，但在形态上介于肿瘤细胞与内皮细胞之间；在血管壁上可见HLA^＋和人Ki67^＋细胞，提示构成血管壁的这些细胞来自人源细胞。HLA免疫荧光共聚焦显微成像可见，移植瘤中的血管以表达HLA（红色）的人源肿瘤细胞为主，兼有表达GFP（绿色）的宿主细胞，或人鼠融合细胞。结论在移植性人脑胶质瘤组织中存在具有血液运输功能的内皮细胞依赖型血管、血管生成拟态和马赛克血管3类血管，人脑胶质瘤干祖细胞有通过分化和转分化机制自主形成后两类肿瘤血管的潜能。
- 费喜峰张全斌董军王爱东王之敏黄强
- 关键词：胶质瘤SHG44细胞肿瘤干细胞
- 胶质瘤干祖细胞可诱导宿主脑胶质细胞癌变被引量：15
- 2013年
- 目的探讨可移植性人癌组织重构过程中，肿瘤干细胞植入方与宿主受体间的关系。方法将红色荧光蛋白（RFP）基因稳定转染于已建株的胶质瘤干祖细胞SU3，再将建立的SU3．RFP细胞接种于表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠脑内。取移植瘤组织，筛选高增殖力GFP细胞，单克隆化后，鉴定细胞类型，测定其DNA含量，行染色体显带分析。并将建系的GFP细胞H1和H9分别接种于裸小鼠腋下和颅内，观察致瘤率和癌性表型。结果在可移植性肿瘤组织中，RFP、GFP和RFP／GFP细胞的比例分别为（88．99±1．46）％、（5．59±1．00）％和（4．11±1．02）％。经2次单克隆化的宿主GFP细胞株Hl和H9，在体外表现出无限增殖、接触抑制消失、超四倍体等癌细胞特征，并表达少突胶质细胞特异性标志蛋白2’，3’-环腺苷酸-3’-磷酸二酯酶（CNP）。H1和H2细胞的体内致瘤率均为100％，肿瘤均向接种周围组织呈广泛侵袭性生长。结论在可移植性胶质瘤模型中的肿瘤细胞，并非像传统观点那样均由移植的肿瘤干祖细胞产生，被接种的肿瘤干细胞侵袭的宿主脑细胞也可以转化为肿瘤细胞。
- 陈延明费喜峰王爱东代兴亮张金石崔宝乾张全斌赵耀东陈骅王之敏兰青董军黄强
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞肿瘤移植癌变裸小鼠
- 人脑胶质瘤干细胞SU2耐辐射实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人脑胶质瘤干细胞SU2对辐射的耐受性及可能机制。方法U251细胞常规培养，SU2细胞分别在无血清DMEM／F12培养基、含10％胎牛血清（FBS）的DMEM培养基中培养后得到悬浮干细胞球（SU2）和贴壁分化细胞（SU2-FaS）。U251、SU2、SU2-FBS接受0、2、10、15Gy剂量x线照射后24h流式细胞仪检测侧群细胞（SP）、CD133＋细胞比例；接受0、246、8Gy剂量照射1周后绘制剂量存活曲线，确定放射敏感性参数，即细胞经2GyX线照射后的存活分数（SF2）；Balb／C裸鼠35只分为SU2干细胞移植组、SU2-FBS移植组、空白对照组，前2组又都分为3个亚组（n=5），分别脑内原位接种受照过0、10、20GyX线的1x10s个细胞，5μL SU2干细胞悬液和SU2．FBS细胞悬液，空白对照组注入5乩生理盐水，21d后解剖取脑，HE染色观察致瘤情况并计算肿瘤体积，免疫组织化学染色检测肿瘤巢蛋白（nestin）、毛细血管扩张性共济失调突变（ATM）蛋白的表达。结果SU2干细胞中SP、CD133＋细胞比例随着辐射剂量的提高而增加，SP细胞从5．63％±0．71％增加到22．05％±3．33％；CD133＋细胞由4．60％±0．82％增至17．89％±1．33％，差异有统计学意义体0．051；SU2干细胞的生存曲线位于其他细胞的上方，对辐射的抗拒性（SF2=0．7I±0．03）比SU2．FBS（SF2=0．54±0．04）和U251（SF2=0．57±0．04）要高，差异有统计学意义（氏0．05）。与0GySU2-FBS移植组比较，O、10GySU2干细胞移植组小鼠移植瘤体积较大，差异有统计学意义（P〈0．05），nestin、ATM的阳性表达较强。结论体外培养的胶质瘤干细胞SU2与同类分化细胞SU2-FBS相比具有更强的耐辐射性，这与其高表达ATM有关。
- 王中勇沈云天陈延明董军代兴亮孙超田野陆雪官兰青黄强
- 关键词：神经胶质瘤胶质瘤干细胞放射抗拒
- 肿瘤相关巨噬细胞癌变在双色荧光示踪肿瘤模型中的发现被引量：6
- 2012年
- 机体在形成实体瘤的过程中，存在肿瘤细胞增殖时对宿主组织重构的问题。在解析这个问题时，目前最受关注的是肿瘤微环境理念，已有实验证实，大量机体自身的免疫炎性细胞浸润到实体瘤组织中，成为组成肿瘤微环境的重要成员。其中的巨噬细胞不再对肿瘤细胞起免疫监视作用，而“哗变”为肿瘤细胞的附庸，起促进肿瘤细胞生长的作用，称之为肿瘤相关巨噬细胞（tumor—associated macrophages，TAM）。本文报道，这种TAM其本身似已癌变，此现象值得重视并应进一步分析研究。
- 崔宝乾费喜峰王爱东王之敏兰青董军黄强
- 关键词：肿瘤相关巨噬细胞细胞癌变肿瘤模型肿瘤细胞增殖炎性细胞浸润肿瘤细胞生长
- 替莫唑胺衍生物治疗人脑胶质瘤的实验研究被引量：4
- 2012年
- 目的观察替莫唑胺(TMZ)类水溶性衍生物2T-P400、2T-P600对人脑胶质瘤的抑制效应。方法体外抑瘤实验:以MTT法测定2T-P400、2T-P600、PEG400、PEG600、TMZ相对于空白对照组对胶质瘤细胞SHG-44的抑制率。体内抑瘤实验:制备荷SHG44人脑胶质瘤裸小鼠模型,将荷瘤鼠随机分为TMZ组、2T-P400组、2T-P600组、聚乙二醇(PEG)组及生理盐水组,TMZ口服给药,其他药物均为鼠尾静脉注射给药,每4天测量肿瘤体积。结果体外抑瘤效应:2T-P400和2T-P600对SHG44细胞的杀伤效果与TMZ相近,均明显优于PEG400和PEG600(P<0.01)。体内抑瘤效应:TMZ组、2T-P400组和2T-P600组抑瘤率亦明显高于PEG组及生理盐水组(P<0.05),未见明显药物不良反应。结论 2T-P400、2T-P600保留TMZ的抑瘤活性,为胶质瘤病人在术后TMZ类药物化疗提供新的药物及用药途径选择。
- 唐东方董军黄强兰青周微颜露露王永峰
- 关键词：神经胶质瘤替莫唑胺
- 胶质瘤干／祖细胞诱导宿主巨噬细胞癌变的实验研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨进展期肿瘤组织中的巨噬细胞是否癌变并对肿瘤生长起促进作用。方法将转染红色荧光蛋白（RFe）的人脑胶质瘤干／祖细胞（SU3）接种于12只表达绿色荧光蛋白（GFP）的裸小鼠腹腔，致瘤后取腹水或肿瘤结节培养，从GFP十细胞中克隆可传代的SU3细胞诱导的宿主腹腔肿瘤细胞株（SU3-ihCTC），并进行体外生长特性检测和分子表型试验、分子遗传学检测和致瘤试验。结果SU3-RFP／GFP荷瘤鼠腹水为血性，在肠系膜等腹腔脏器上长出许多肿瘤结节，取其培养细胞中RFP^＋和GFP^＋细胞，发现它们都具有增殖潜能，经单克隆的SU3-ihCTC细胞，具有生长接触抑制消失．增殖速度快，高集落形成率，染色体异倍体、端着丝粒等体外生长的癌细胞表型，而且在裸小鼠体内具有高致瘤率（12／12），同时表达巨噬细胞标志蛋白CD68。结论胶质瘤中被肿瘤细胞征集来的巨噬细胞不但能促进肿瘤细胞生长，而且自身已癌变。
- 崔宝乾费喜峰王爱东陈延明张金石代兴亮张全斌赵耀东王之敏陈骅兰青董军黄强
- 关键词：肿瘤移植巨噬细胞细胞癌变
