国家自然科学基金(81071725)
- 作品数：11 被引量：20H指数：3
- 相关作者：唐建武张军黄玉红王波王静文更多>>
- 相关机构：大连医科大学大连医科大学附属第二医院天津市第一中心医院更多>>
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- 烯酯酰辅酶A水解酶1基因在小鼠肝癌细胞株中的表达及其与增殖和迁移能力的关系被引量：2
- 2011年
- 目的 研究烯酯酰辅酶A水解酶1（ ECH1）在小鼠肝癌高、低淋巴转移Hca-F/Hca-P细胞株中的表达及ECH1基因表达下调后对Hca-F细胞增殖和迁移能力的影响.方法 采用免疫荧光方法检测ECH1在小鼠肝癌细胞株中的表达.构建pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1表达载体,稳定转染至高淋巴转移Hca-F细胞中干扰ECH1基因的表达,通过CCK8法检测肿瘤细胞的增殖能力,Transwell小室检测肿瘤细胞的迁移能力,并应用流式细胞仪检测肿瘤细胞的细胞周期情况.结果 ECH1在小鼠肝癌细胞株中主要表达于细胞质,且ECH1在Hca-F细胞的表达强于其在Hca-P细胞的表达.ECH1表达下调后,Hca-F细胞的增殖能力明显下降.Transwell小室检测穿膜细胞数pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组（27.07±17.49）较阴性对照组（72.38±18.83）和Hca-F组（59.06±30.33）明显减少,细胞周期S期pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组（86.1％）较阴性对照组（75.8％）和Hca-F组（66.2％）停留细胞数明显增多,G1期pGPU6/GFP/Neo-shRNA-ECH1转染Hca-F组（9.4％）较阴性对照组（24.2％）和Hca-F组（30.3％）停留细胞数明显减少.结论 ECH1可能在肿瘤淋巴转移中发挥作用,抑制ECH1的表达可有效降低体外高淋巴转移肿瘤细胞的增殖和迁移能力.
- 张军唐建武宋美英王波李荣宽侯力黄玉红王梅宋波金艳玲
- 关键词：淋巴转移
- Sorcin在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移株中的表达及定位被引量：3
- 2014年
- 目的:研究抗药蛋白sorcin(又称可溶性抗药相关蛋白)在小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移潜能不同的细胞株Hca-F/Hca-cP中的定位及表达差异,进一步探讨其在肿瘤淋巴道转移中的作用。方法:以小鼠腹水肝癌高淋巴道转移株Hca-F和小鼠腹水肝癌低淋巴道转移株Hca-P为研究对象,采用实时定量PCR技术检测sorcin在Hca-F/Hca-P细胞中基因水平的表达差异;采用Western免疫印迹技术检测sorcin在Hca-F/Hca-P细胞中蛋白水平的表达差异;采用免疫荧光技术检测sorcin在细胞中的定位情况;采用细胞计数试剂盒-8检测肿瘤细胞的增殖能力;应用Transwell小室检测肿瘤细胞的迁移和侵袭能力。结果:Hca-F细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力都明显高于Hca-P细胞;sorcin在Hca-F细胞中的基因水平和蛋白水平表达分别为Hca-P细胞的1.5和1.8倍;sorcin在两种小鼠腹水型肝癌细胞株中的定位主要位于细胞质。结论:sorcin在Hca-F中呈高表达,主要定位于细胞质,可能在其增殖、迁移和侵袭过程中发挥重要作用,为进一步探讨其作用机制和功能奠定了基础。
- 宋琳唐建武张军孙雷宋波黄玉红
- 关键词：SORCIN淋巴道转移肝癌增殖迁移
- Ech1的表达下调对小鼠肝癌淋巴道转移的影响及其可能机制
- 2015年
- 目的:探讨Ech1表达下调对小鼠肝癌淋巴道转移率的影响,及其与肿瘤相关蛋白Anxa7的相互关系。方法:将Ech1基因表达下调的Hca-F细胞植入小鼠足垫,28天后观察小鼠成瘤及转移情况。在Ech1基因表达下调的Hca-F细胞和对照Hca-F细胞中,通过Western blot检测Anxa7表达变化,同时在Anxa7表达下调Hca-F细胞和对照Hca-F细胞中通过Western blot检测Ech1表达变化。结果:下调Ech1基因的表达,使肿瘤细胞体内淋巴结转移率明显降低。Ech1表达下调后,肿瘤转移相关蛋白Anxa7表达增加;Anxa7表达下调后,Ech1蛋白表达下降。结论:肿瘤细胞Ech1基因表达水平与小鼠肝癌淋巴道转移密切相关,Ech1和Anxa7在Hca-F肿瘤淋巴道转移中可能相互作用。
- 张军金艳玲毛俊魏元怡黄玉红王波唐建武
- 关键词：淋巴道转移肝癌ANNEXIN
- VEGFC/D-VEGFR3/NRP2轴通路相关分子在肿瘤及其淋巴道转移时的变化与意义被引量：4
- 2016年
- 本文综述VEGFC/D-VEGFR3/NRP2轴通路相关分子Furin-like酶、CNTN1、Prox1、LYVE-1、Podoplanin、SOX18、SDF1、CXCR4等的结构功能,在不同部位、不同类型、不同发展阶段的肿瘤及其淋巴道转移过程中的变化规律和细胞内外信号系统转导、执行、合成等网络调控特点以及肿瘤细胞-淋巴管内皮细胞相互作用及其生物学行为影响,特别是在肿瘤发生发展和淋巴道转移分子机制中的意义。
- 王静文唐建武赵君怡
- 关键词：肿瘤淋巴管生成淋巴道转移
- 不同小鼠腹水型肝癌细胞增殖侵袭能力与膜联蛋白A7的亚细胞定位和亚型表达研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨在小鼠淋巴道转移潜能不同的肝癌细胞中,肝癌细胞增殖侵袭能力与膜联蛋白A7的亚细胞定位和亚型的表达。方法以小鼠腹水型肝癌高、低淋巴道转移潜能不同的细胞株Hca-F细胞和Hca-P细胞为研究对象,通过CCK8法检测细胞的增殖能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力;Western blotting方法检测膜联蛋白A7在体外增殖侵袭能力不同的肿瘤细胞中的亚细胞定位和亚型的变化。结果发现Hca-F细胞无论是增殖能力还是侵袭能力都高于Hca-P细胞。膜联蛋白A7在Hca-F细胞和Hca-P细胞主要为47 kD亚型表达,而51 kD亚型只少量表达于细胞浆。47 kD亚型在Hca-F细胞的细胞浆、细胞膜、细胞器膜以及细胞骨架中的表达均明显高于Hca-P细胞,分别为(73%±7%)v(s49%±19%)、(36%±8%)v(s24%±9%)和(53%±7%)v(s40%±12%)(均P<0.05)。结论膜联蛋白A7的47 kDa亚型在细胞浆、细胞膜、细胞器膜和细胞骨架的定位表达,可能与肝癌细胞增殖侵袭能力密切相关。
- 黄玉红Asma saleem qaziMohmmed mibrahim张军范姝君唐建武
- 关键词：亚细胞定位
- 解偶联蛋白与阿尔茨海默病
- 2015年
- 解偶联蛋白(uncoupling protein,UCP)是线粒体内膜上的质子转运蛋白,被激活时能引发质子漏,质子经UCP渗漏回基质,使氧化磷酸化部分解耦联,降低线粒体膜电位,减少过量活性氧的产生。另外,UCP对ATP合成、钙离子稳态、能量代谢等也有调节作用。阿尔茨海默病是一种中枢神经系统退行性疾病,由多种因素共同作用引起,其中活性氧的作用越来越引起重视。UCP,特别是UCP2在中枢神经系统疾病方面的保护作用日益引起关注,有望成为阿尔茨海默病治疗的靶向目标。
- 张军于霄郭羽吴琼邹原
- 关键词：解偶联蛋白2阿尔茨海默病活性氧
- Ech1基因表达下调对小鼠肝癌细胞株Hca-F黏附能力的影响被引量：2
- 2012年
- 目的在蛋白质水平检测Ech1在小鼠肝癌高低淋巴道转移Hca—F细胞／Hca—P细胞中的表达及其对Hca-F细胞黏附能力的影响。方法采用荧光差异双向凝胶电泳（2DDIGE）和质谱技术定量分析鉴定Ech1在Hca—F细胞和Hca-P细胞中的表达；构建pGPU6／GFP／Neo--shRNA—Ech1质粒，稳定转染至Hca-F细胞中，并通过实时荧光定量PCR和Westemblot验证Ech1表达下调效果，检测Ech1基因表达下调后对细胞外基质和淋巴结的黏附能力。各组细胞间的差异采用单因素方差分析。结果Ech1在Hca-F细胞的表达明显高于其在Hca-P细胞表达;Ech1表达下调细胞株构建成功，Ech1基因表达下调后，降低Hca-F细胞对细胞外基质纤维连接蛋白和I型胶原成分的黏附能力，降低其对体内淋巴结的黏附能力。Hca-F组与pGPU6／GFP/Neo-shRNA-Ech1组黏附吸光度值的差异有统计学意义，层黏连蛋白和I型胶原吸光度值分别为1．42±0．26和1．14±0．07与1．01±0．27和0．90±0．09，P值均〈0．05。结论抑制Ech1基因和蛋白的表达，可以降低小鼠肝癌细胞株Hca—F细胞的黏附能力。
- 张军唐建武孙明忠刘淑清宋美英王波宋波黄玉红
- 关键词：淋巴转移SHRNA
- 肝癌中烯酯酰辅酶A水解酶1的表达及其亚细胞定位被引量：1
- 2015年
- 目的探讨烯酯酰辅酶A水解酶1(enoyl coenzyme A hydratase 1,Ech1)表达变化在肝癌中的意义及Ech1的亚细胞定位与肿瘤恶性生物学行为的关系。方法应用免疫组化法检测20例正常肝组织和30例原发性肝癌组织中Ech1的表达;应用亚细胞分离法检测Ech1在Hca-F和FEch1下调细胞的四种不同亚细胞组分中的表达。结果 Ech1在原发性肝癌中的表达高于正常肝组织,差异有统计学意义(P<0.05);Ech1表达与患者年龄、AFP值及是否伴有肝硬化或伴有病毒性肝炎差异无统计学意义(P>0.05)。Ech1在Hca-F和FEch1下调细胞的四种亚细胞组分中表达均定位于细胞质和细胞膜,并且细胞质表达强于细胞膜,细胞核和细胞骨架部分中不表达。结论 Ech1在肝癌组织中的表达明显高于正常肝组织,提示其可能与肝癌的发生、发展有关;体外培养细胞中Ech1表达调控对其亚细胞定位的改变没有影响,Ech1对肿瘤恶性生物学行为的影响可能不是通过其亚细胞定位改变而实现的。
- 张军曲鸿曲鸿毛俊魏元怡王华新黄玉红
- 关键词：肝肿瘤亚细胞定位
- 血管内皮生长因子比值在胃癌及转移中的变化及意义被引量：4
- 2012年
- 胃癌转移早期以淋巴系统转移为主，淋巴结转移的程度和范围是决定其预后的重要因素。血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor，VEGF）-C和VEGF-D是特异性淋巴管生成调节因子，以往研究较多关注胃癌中VEGF-C、VEGF-D各自的表达情况，但对于VEGF-C／VEGF-D比值在胃癌及转移灶中的情况及其与淋巴道转移的相关性还不十分清楚，国内外鲜见报道。因此，深入探讨VEGF-C／VEGF-D比值与胃癌淋巴系统转移的关系，将有助于早期发现胃癌淋巴结转移和胃癌预后评估指标。
- 王静文唐建武王波侯力张军金燕玲王朔李荣宽
- 关键词：血管内皮生长因子胃癌转移VEGF-DVEGF-C淋巴系统淋巴管生成
- 淋巴道转移潜能及ANXA7对肝癌细胞共培养淋巴管内皮细胞的调控作用被引量：1
- 2022年
- 目的探讨淋巴道转移潜能及膜联蛋白A7(ANXA7)对肝癌细胞共培养淋巴管内皮细胞(LEC)的调控作用。方法将各肝癌细胞及LEC共培养,收集与F细胞(高淋巴道转移潜能)、P细胞(低淋巴道转移潜能)、F_(A7下调)细胞(ANXA7表达下调)、F_(无关序列)细胞、P_(A7上调)细胞(ANXA7表达上调)、P_(空载体)细胞共培养的LEC(L-F_(共)、L-P_(共)、L-F_(A7下调共)、L-F_(无关序列共)、L-P_(A7上调共)、L-P_(空载体共)细胞)以及正常LEC用于实验。分别用实时定量PCR、Western blotting检测共培养LEC内淋巴管内皮相关分子(VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3、NRP-2、PDPN、LYVE-1、SOX18)mRNA与蛋白表达。用细胞免疫荧光法检测共培养LEC内淋巴管内皮相关分子定位,用ELISA法检测细胞上清液VEGF-C、VEGF-D水平,用淋巴管成管实验测算淋巴管成管节点数和分支总长度。结果VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3、NRP-2、PDPN、LYVE-1、SOX18在mRNA和蛋白水平表达上,L-P_(共)、L-F_(共)细胞高于LEC(P均<0.05),L-F_(共)细胞高于L-P_(共)细胞(P均<0.05)。与L-F_(无关序列共)、L-P_(空载体共)细胞相比,L-F_(A7下调共)细胞上述分子表达均低(P均<0.05),L-P_(A7上调共)细胞上述分子表达均高(P均<0.05)。ANXA7调控前后,各细胞中VEGF-C、VEGFR-3、PDPN相对表达量与同类分子(VEGF-D、NRP-2及LYVE-1/SOX18)比较变化更显著(P均<0.05)。VEGF-C、VEGF-D主要在细胞质内表达;VEGFR-3/NRP-2主要在细胞膜表达,少量在细胞质表达;PDPN、LYVE-1主要在细胞质表达;SOX18主要在细胞核表达,少量于细胞质表达。ANXA7调控前,细胞上清液中VEGF-C、VEGF-D表达比较,L-F_(共)、L-P_(共)细胞高于LEC,L-F_(共)细胞高于L-P_(共)细胞(P均<0.05),且VEGF-C表达均高于VEGF-D表达(P均<0.05)。ANXA7调控前后,各细胞上清液中VEGF-C相对表达量与同类分子(VEGF-D)比较变化更显著(P均<0.05)。在节点数和分支总长度上,L-F_(共)、L-P_(共)细胞均多于LEC,L-F_(共)细胞多于L-P_(共)
- 王静文钱雪娇章明放章明放
- 关键词：肝癌细胞淋巴管内皮细胞体外共培养
